초록 ▼

목적: 생쥐 동물모델 연구를 통한 국내에서 개발 중인 DTaP 백신의 체액 및 세포매개 면역원성 평가와 표준 균주와 국내 환자에서 분리된 임상 균주를 통한 방어력 평가와 안전성 평가

대상 및 방법: 생후 4주령인 BALB/c female 마우스를 대상으로 국내에서 개발된 3가 DTaP 백신의 PT, FHA, PRN 항원에 대한 체액 면역원성을 ELISA법으로 분석하였고, 개발 DTaP 백신의 Th1, Th2 세포매개 면역원성 평가를 비장 내 T 세포를 통한 Cytometric Bead Array법으로 분석하였으며, 백일

목적: 생쥐 동물모델 연구를 통한 국내에서 개발 중인 DTaP 백신의 체액 및 세포매개 면역원성 평가와 표준 균주와 국내 환자에서 분리된 임상 균주를 통한 방어력 평가와 안전성 평가

대상 및 방법: 생후 4주령인 BALB/c female 마우스를 대상으로 국내에서 개발된 3가 DTaP 백신의 PT, FHA, PRN 항원에 대한 체액 면역원성을 ELISA법으로 분석하였고, 개발 DTaP 백신의 Th1, Th2 세포매개 면역원성 평가를 비장 내 T 세포를 통한 Cytometric Bead Array법으로 분석하였으며, 백일해 표준 균주와 국내 환자에서 분리된 임상균주를 통한 Intranasal Challenge를 통해 방어력을 평가하였다. 안전성 평가는 백일해 백신의 잔류독성 평가 방법으로 pertussis toxin에 대한 toxicity 검증인 histamine sensitizing test 중 temperature reduction test를 실시하고, endotoxin toxicity 검증법 중 body weight gain test와 leukocytosis-promoting test를 실시하여 대조군과 비교하였다.

결과: DTaP 백신 접종 후 PT, FHA, PRN 항원에 대한 체액 면역원성이 의미 있게 상승하여 지속적으로 유지함을 확인하였고, 또한 세포매개 면역반응에 있어 Th1, Th2 면역이 상승된 결과를 보였다. 표준 균주와 임상 균주를 통한 intra nasal clearance 검사에서 접종 2일 후부터 방어력이 있었고 이런 방어력은 접종 6주, 12주, 18주에도 지속된 결과를 보였다. 또한 현재 국내에서 상용되고 있는 3가 DTaP 백신과의 비교에서도 동일한 결과를 보였다. 안전성 평가에서는 histamine sensitizing test, body weight gain test, leukocytosis-promoting test결과는 연구군에서 특이한 이상반응 결과를 보이지 않았으며 두 대조군간의 비교에서도 유의한 차이가 없는 결과를 보였다.

결 론: 이상의 결과로 새로이 국내에서 개발 중인 3가 DTaP 백신은 높은 면역원성과 방어력이 있음을 간접적으로 확인할 수 있었다. 안전성에서도 국내에서 개발 중인 DTaP 백신은 국내에서 사용되고 있는 기존 3가 DTaP 백신과 유사한 안전성을 보여 향후 국내 소아 임상연구에 유용한 기초자료로 활용이 기대된다.

Abstract ▼

Background: World widely, DTaP vaccines have been used since late 1990s. But, the efficacies and mechanisms of DTaP vaccines are not fully evaluated and different according to manufacturing processing qualities. In this aspect, the immunogenicity and safety animal model studies are essential, and sh

Background: World widely, DTaP vaccines have been used since late 1990s. But, the efficacies and mechanisms of DTaP vaccines are not fully evaluated and different according to manufacturing processing qualities. In this aspect, the immunogenicity and safety animal model studies are essential, and should be performed before human clinical trial studies with DTaP vaccines. This study was conducted to compare the immunogenicity and protection efficacy against Bordetella pertussis between a new 3 components DTaP vaccine and a commercially available DTaP vaccine in a murine model.

Primary purpose: To confirm the immunogenicities, cell mediated immunities and long term protective effectiveness of DTaP vaccine(3 components DTaP vaccine) which has been developing in our country.

Secondary purpose: To evaluate the safety of newly developing DTaP vaccine through mouse body weight gain test, leukocytosis promoting test(LPT), and histamine sensitization test(HIST).
Finally, we will design the standard animal study model of DTaP & DTaP combination vaccines which will be developed

Materials and Methods: BALB/c mice were immunized with two doses of diphtheria-tetanus-acellular pertussis(DTaP) vaccine. According to the type of DTaP vaccine, mice were divided into 3 groups: 3 components DTaP vaccine in group 1(study group), commercially available DTaP vaccine in group 2(positive control group) and saline in group 3(negative control group). Humoral and cell-mediated immune responses and protection efficacy using a murine intranasal challenge model after 2 times DTaP vaccinations were compared among the 3 groups at 6, 12, 18 weeks. And LPT, MWGT, HST were performed for safety evaluation.

Results: Study and positive control group showed significant increases in antibody titers against pertussis antigens such as pertussis toxin, filamentous hemagglutinin, and pertactin after priming vaccination. Spleen cells showed both Th1 and Th2 cell-mediated immune responses stimulated by pertussis antigens in group 1 and 2 without any significant difference. In the intranasal B. pertussis infection model, bacteria were eradicated in group 1 and 2 within five-seven days after challenge infection. There were no significant differences between study and control group in safety study.

Conclusion: This study results showed similar good immunogenicities, protection efficacies and safeties of the new 3 components DTaP vaccines compared to the commercially available DTaP vaccine. Long term follow up murine model may be effective to evaluate the effectiveness and safety of newly developed DTaP & DTaP combination vaccines.