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Kafe 바로가기주관연구기관 | 서울대학교 산학협력단 Seoul National University |
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연구책임자 | 채준석 |
참여연구자 | 강준구 , 채정병 , 조용선 , 조윤경 , 김정곤 , 오수민 , 한선우 , 정지호 , 오지원 , 신세한 , 이밝음 |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 | 한국어 |
발행년월 | 2017-05 |
과제시작연도 | 2017 |
주관부처 | 환경부 Ministry of Environment |
연구관리전문기관 | 국립환경과학원 National Institute of Environmental Research |
등록번호 | TRKO201700008015 |
과제고유번호 | 1485015135 |
사업명 | 국립환경과학원연구사업 |
DB 구축일자 | 2017-10-12 |
DOI | https://doi.org/10.23000/TRKO201700008015 |
Ⅳ. 연구 결과
1. 조사 지역에서 참진드기 채집 결과
2016년 4월부터 2017년 3월 사이(참진드기가 활동하지 않는 겨울철 기간 12, 1, 2월 제외) 강화도,석모도 지역 및 덕유산국립공원에서 총 11,755마리의 참진드기가 채집되었다. 지역 별로 석모도의 상주산, 해명산에서 5,590마리, 강화도의 고려저수지, 장흥저수지 주변에서 3,734마리, 덕유산국립공원에서 2,431마리가 채집되었다. 참진드기 종별 채집결과를 보면 작은소진드기(Haemaphysalis longicornis) 7,294마리, 개피참진드기(H
Ⅳ. 연구 결과
1. 조사 지역에서 참진드기 채집 결과
2016년 4월부터 2017년 3월 사이(참진드기가 활동하지 않는 겨울철 기간 12, 1, 2월 제외) 강화도,석모도 지역 및 덕유산국립공원에서 총 11,755마리의 참진드기가 채집되었다. 지역 별로 석모도의 상주산, 해명산에서 5,590마리, 강화도의 고려저수지, 장흥저수지 주변에서 3,734마리, 덕유산국립공원에서 2,431마리가 채집되었다. 참진드기 종별 채집결과를 보면 작은소진드기(Haemaphysalis longicornis) 7,294마리, 개피참진드기(H. flava) 598마리, 일본참진드기(Ixodes nipponensis) 74마리,사슴참진드기(I. ovatus) 1마리로 총 4종의 참진드기가 채집되었다. 성장단계별로 성충(adult)은 821마리, 약충(nymph)은 7,302마리가 채집되었으며, 유충(larva)은 총 3,632마리가 채집되었다. 월별 채집결과를 보면 2016년 4월 1,618마리, 5월 1,979마리, 6월 1,622마리, 7월 1,358마리, 8월 1,245마리, 9월 2,055마리, 10월 1,375마리, 11월 216마리 12월 1마리가 채집되었고, 2017년 3월에 286마리가 각각 채집되었다. 성충과 약충은 3월에서 11월 사이에 계속 채집이 이루어졌으며, 유충은 7월에 채집되기 시작하여 11월까지 채집되었다.
2. 참진드기로부터 SFTSV 검출 결과
연구기간동안 채집된 참진드기 중 2016년 9월까지 채집된 3,301마리에서 개체 별 One-step RT(reverse transcriptase)/Nested PCR 방법으로 SFTSV를 검출하였다. 2016년 4월에서 2017년 3월 사이에 채집되어 검출을 시도한 총 4,529마리의 참진드기의 성충과 약충 중 269마리에서 SFTS 바이러스가 검출되어 5.94%의 감염률(infection rate, IR)을 나타내었다. 성충(adult)에서는 640마리 중 33마리에서 SFTSV가 검출되어 5.16%의 감염률을 보였으며, 약충(nymph)은 3,889마리 중 236마리에서 검출되어 6.07%의 감염률을 나타내었다. 채집된 참진드기 중 작은소진드기 약충(H. longicornis, nymph)을 동정하여 일부는 풀링(pooling)해서 최소야외감염률(minimum field infection rate, MFIR)을 확인하였다. 연구기간 동안 채집된 3,889마리를 유충을 368개 샘플로 풀링하여 그 중 32개 풀에서 SFTSV가 검출되었으며, 0.89%의 최소야외감염률을 나타내었다. 참진드기에서 SFTSV감염률을 월별로 살펴보면, 참진드기의 활동이 시작되는 3월에서 번식을 시작하는 6월 사이에 최소 5% 이상의 높은 감염률을 나타내었다. 지역별로 보면 석모도에서 3,510마리의 참진드기 중 197마리에서 SFTSV가 검출되어 5.61%의 감염률을 확인하였으며, 강화도에서 채집된 2,176마리 중 50마리에서 검출되어 2.3%, 덕유산국립공원에서 채집된 2,431마리 중 114마리에서 검출되어 4.69%의 감염률을 나타내었다.
참진드기에서 SFTSV를 개체 별로 검출하였을 때와 풀링(pooling)하여 검출하였을 때의 차이를 알아보기 위해 석모도 및 강화도에서 채집한 1,388마리의 작은소진드기 약충에 대한 풀링 검출을 시도하였다. 석모도에서 959마리, 강화도에서 429마리의 채집된 1,388마리의 작은소진드기 약충을 채집사이트별, 날짜별 10마리씩 풀링하여 145개의 풀로 만들어 One-step RT/Nested-PCR 방법으로 SFTSV를 검출하였다. 검출결과 8개 풀에서 SFTSV유전자가 검출되어 0.58%의 최소야외감염률을 나타내었다. 같은 지역에서 1,799마리의 작은소진드기 약충(석모도 1,400마리, 강화도 399마리)에 대한 개체 별 SFTSV 검출 결과 128마리에서 바이러스가 검출되어 7.12%로 최소야외감염률과 비교하여 10배 이상의 개체별 감염률이 도출되었다. 또한 전 채집지역 별로 1,411마리의 참진드기(석모도 471마리, 강화도 470마리, 덕유산국립공원 470마리)에 대한 실시간유전자증폭(real-time PCR)을 통한 SFTSV검출을 실행하였다. Real-time PCR 방법 중 TaqMan real-time PCR 방법을 이용하였으며, 검출결과 1,411마리 중 28마리에서 SFTSV가 검출되어 1.98%의 감염률이 확인되었다. 같은 1,411마리의 샘플에서 One-step RT/Nested-PCR 방법으로 검출결과 111마리에서 SFTSV가 검출되어 7.87%의 감염률을 나타내었으며, 검출이 확인된 111마리 중 62마리에서 One-step RT/Nested-PCR과 real-time PCR에서 동시에 증폭이 확인되었다.
PCR을 통하여 얻어진 SFTSV의 양성샘플 중 채집지역, 참진드기 종, 성장상태, 채집날짜 별로 51마리의 참진드기에 대한 유전자염기서열분석을 하였으며, 분석결과 두 개의 계통(clade)으로 나뉘는 것을 확인하였다. 두 계통은 모두 국내에서 이미 알려진 SFTSV의 염기서열 및 일본에서 알려진 염기서열에 가까운 계통이었으며, 중국에서 유래한 계통과는 모두 거리가 있는 것으로 나타났다.
3. 감염예방유용물질 연구결과
실험실내 참진드기를 사육하기 위한 실험동물의 허가가 제한되어 참진드기 인공사육시스템을 이용한 사육 및 유지를 진행하였다. 참진드기의 인공사육으로 기피제 실험을 위한 참진드기를 유지하였으며, 성충에서 인공포혈을 통해 산란을 유도하였다. 인공사육장치에서 산란되어 깨어난 유충들은 이후 실험에 사용하기 위해 수거되어 살아있는 채로 보관되었다.
기피유용물질의 기피효과를 실험하기 위하여 ‘Tick climbing test’, ‘Petri dish assay’ 및 야외기피실험이 진행되었다. Tick climbing test 결과 상용기피제(DEET, Icaridin)의 실험실내 기피효과실험 결과 참진드기의 기피율이 100%로 나타났으며, 천연유용물질 중 thyme(2% 농도,기피율 93.33%), lemongrass(2% 농도, 기피율 83.88%), tea tree oil(2% 농도, 기피율 80.60%), kunzea(2% 농도, 기피율 72.80%)에서 높은 기피율이 측정되었다. 야외실험결과 상용되는 기피제를 포함한 모든 기피유용성분들에서 완전한 차단효과를 확인하지 못하였으며, 기피효과 지속시간이 4시간 이내로 확인되었다.
( 출처 : 요약문 7p )
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