초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
연구의 최종목표: 간성상세포에서 SIRT3-SDH-GPR91 signaling을 규명하여 향후 비알콜성 지방간질환의 약물 목표를 제시함
▶ 간성상세포 (HSC)및 SIRT3-SDH-succinate-GPR91 signaling 조절기전 규명
▶ MCDD 유발성 NASH모델에서 분리한 세포에서 SIRT3/SDH/GPR91의 발현을 규명
▶ GPR91 sh RNA를 이용하여 HSC activation 및 NASH동물모델에서의 기능 규명
▶ SIRT3를 조절하여 HSC의 기능 변화 규명

□ 연구의 목적 및 내용
연구의 최종목표: 간성상세포에서 SIRT3-SDH-GPR91 signaling을 규명하여 향후 비알콜성 지방간질환의 약물 목표를 제시함
▶ 간성상세포 (HSC)및 SIRT3-SDH-succinate-GPR91 signaling 조절기전 규명
▶ MCDD 유발성 NASH모델에서 분리한 세포에서 SIRT3/SDH/GPR91의 발현을 규명
▶ GPR91 sh RNA를 이용하여 HSC activation 및 NASH동물모델에서의 기능 규명
▶ SIRT3를 조절하여 HSC의 기능 변화 규명
▶ SIRT3를 활성화하기 위해 resveratrol, honokiol을 MCD diet mouse에 투여하여 SIRT3-GPR91 pathway를 통한 NASH 호전 규명

□ 연구결과
1. 간성상세포에서 succinate처치시 α-SMA 발현 및 GPR91 si RNA처리시 a-SMA의 발현이 증가함을 확인함.
2. 간성상세포에서 MCD media, palmitate, malonate 처리시 SDH 활성도는 감소하고, succinate의 농도는 증가하며, GPR91, a-SMA의 발현이 증가함.
3. 간성상세포에서 SIRT3 si RNA 처리시. SDH 활성도는 감소하고, succinate의 농도는 증가하며, GPR91, a-SMA의 발현이 증가하고, SIRT3 adenovirus를 처리시 SDH 활성도는 증가하며, Succinate의 농도는 감소하고, 간성상세포 활성화는 감소함.
4. 간성상세포에서 palimitic acid 및 MCDD media 처리시 SIRT3는 감소하고, GPR91, 그리고 α-SMA 발현은 증가함.
5. 간성상세포에 SIRT3 adenoviral overexpression후 palmitate 및 MCD medium을 처리시 SDH, Succinate, GPR91, ɑ-SMA의 변화가 호전됨
6. MCD diet fed mice에서의 AAV-GPR91 sh RNA를 투여시, GPR91 and α SMA 발현이 억제되고, 간섬유화가 호전됨
7. Succinate를 통한 간성상세포와 간세포간의 Cross-talk 연구시 간세포에서 분비된 succiante가 간성상세포를 활성화함.

□ 연구결과의 활용계획
▶ 학문발전에 기여 효과 비알코올성 지방간질환을 연구하는 연구자에게 SDH, succinate,GPR91에 대한 기초자료를 제공하고, 임상과 기초연구를 통합하는 전문의를 양성하는 효과를 제공함.
▶ 산업 발전에 미치는 경제 효과병의 원인을 밝혀 예방으로 인한 치료를 위한 사회비용의 절감하고 SDH, GPR91의 제어를 통한 비알콜성지방간질환의 치료제 개발을 위한 기반 기술을 제공하고, 이를 조절하는 생리 활성 물질을 발굴하여 국내 및 해외 특허의 출원으로 국내 생명과학 산업 발전에 기여하고, 국가 경쟁력에 도움을 줌.
(출처:요약문 5p)

Abstract ▼

□ Purpose& contents
Goal of this study: To suggest a drug target for liver fibrosis by clarifying the SIRT3-SDH-GPR91 signaling in Hepatic stellate cell activation.
▶ To evaluate the SIRT3-SDH-succinate-GPR91 signaling in HSC activation
▶ To examine the SIRT3-SDH-GPR91 pathway in MCD diet f

□ Purpose& contents
Goal of this study: To suggest a drug target for liver fibrosis by clarifying the SIRT3-SDH-GPR91 signaling in Hepatic stellate cell activation.
▶ To evaluate the SIRT3-SDH-succinate-GPR91 signaling in HSC activation
▶ To examine the SIRT3-SDH-GPR91 pathway in MCD diet fed mice model of NASH
▶ To evaluate the role of GPR91 sh RNA in HSC activation and MCD diet fed mice model of NASH
▶ To identify the function of SIRT3 in HSC activation
▶ To demonstrate the role of SIRT3 on the SDH-GPR91 pathway by adminstering resveratrol to MCD diet fed mice model of NASH

□ Result
1. LX2 cells treated with succinate for 24 h showed increased protein expression of GPR91, a-SMA, and TIMP-1 and LX2 cells transfected with GPR91 siRNA and incubated for 36 h showed decreased GPR91and a-SMA expression in HSCs.
2. LX2 cells cultured in MCD media or palmitate showed decreased SDH activity and increased succinate concentration in cell lysates and resulted in increased expression of GPR91 and a-SMA.
3. LX2 cells treated with SIRT3 siRNA demonstrated decreased SDH activity and increased succinate levels, increased protein expression of GPR91 and α-SMA. LX2 cells transfected with adenoviral SIRT3 overexpression showed increased SDH activity, decreased succinate levels and decreased GPR91 and α-SMA expression.
4. When LX2 cells were incubated with palmitate or MCD diet media this led to decreased protein expression of SIRT3 and increased expression of GPR91 and α-SMA.
5. SIRT3 Overexpression Attenuates Palmitate- and MCD Media-induced HSC Activation via SDH-GPR91 pathway.
6. GPR91 knockdown improved steatohepatitis and decreased HSC activation in MCD diet fed mice.
7. Conditioned medium from palmitate-treated hepatocytes decreased the protein expression of SIRT3 and increased expression of GPR91 and α-SMA proteins in LX2 cells

□ Expected Contribution
▶ Provide academic foundation for the role of succimate and GPR91 in Hepatic fibrogenesis..
▶ Provide a new therapeutic target for the NASH, NAFLD using GPR91 or sirtuin-3
(출처:Summary 6p)

목차 Contents

• 표지 ... 1목차 ... 3연구계획 요약문 ... 4연구결과 요약문 ... 5 한글요약문 ... 5 SUMMARY ... 6연구내용 및 결과 ... 7 1. 연구개발과제의 개요 ... 7 2. 국내외 기술개발 현황 ... 7 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 9 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 19 5. 연구결과의 활용계획 ... 19 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 20 7. 참고문헌 ... 20 8. 연구성과 ... 21 9. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설‧장비 현황 ... 24 10. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 24 11. 기타사항 ... 24끝페이지 ... 24