초록 ▼

요세관의 형성기전에서 MRN 복합체의 기전을 확인하기 위해 세포배양실험과 발생과정의 동물실험,저장성환경에서 조절기전 등으로 연구를 수행하였다.

1년차에 고장성환경에서 세포손상에 의한 MRN 복합체들의 세포내 이동을 측정하였으며, 이들의 발현과 H2AX의 위치변화를 비교 관찰하여 발생과정 중 요세관형성에서의 이동기전을 유추하여 비교자료로 활용하고, H2AX의 발현정도와 인산화 정도를 평가하여 고장성환경에서의 반응성을 관찰하였다. 등장성인 피질에서 Mre11은 사구체에서는 발현되지 않았으며 보우만 주머니와 근위세관은 핵에서

요세관의 형성기전에서 MRN 복합체의 기전을 확인하기 위해 세포배양실험과 발생과정의 동물실험,저장성환경에서 조절기전 등으로 연구를 수행하였다.

1년차에 고장성환경에서 세포손상에 의한 MRN 복합체들의 세포내 이동을 측정하였으며, 이들의 발현과 H2AX의 위치변화를 비교 관찰하여 발생과정 중 요세관형성에서의 이동기전을 유추하여 비교자료로 활용하고, H2AX의 발현정도와 인산화 정도를 평가하여 고장성환경에서의 반응성을 관찰하였다. 등장성인 피질에서 Mre11은 사구체에서는 발현되지 않았으며 보우만 주머니와 근위세관은 핵에서는 발현이 관찰되지 않고, 집합관과 원위세뇨관에서 중간정도의 발현이 관찰되었다. 수질에서는 강한 발현이 수질집합관에서 관찰되었다.

세포질 내에서의 Mre11, Nbs1이 존재함을 확인하였고, Mre11의 경우 고장성 환경에서 약간 증가함이 관찰되었다. 하지만 MRN 복합체 단백질은 주로 핵 fraction에서 관찰되었으며 이는 등장성과 고장성에서 차이를 나타내지 않았다.

2년차에는 발생중인 콩팥의 고장성환경형성에서 DNA 손상관련인자 발현변화와 발생중인 콩팥에서 Klotho의 발현변화, Cisplatin으로 유도된 급성신부전 세포손상에서 DNA 손상관련인자(ATM, H2AX, γ-H2AX, RPA2, Klotho) 와 Kotho의 발현변화 관찰하였다.

3년차에는 2년차의 결과를 바탕으로 정상콩팥의 발생중인 고장성 환경 및 Cisplatin으로 유도된 급성신부전 세포손상 모델에서 MRN 복합체의 발현과 관련된 DNA 손상관련인자(ATM, H2AX, γ-H2AX, RPA2, Klotho) 발현 기전 및 조절을 관찰하였다.

Cisplatin으로 유도된 급성신부전증에서의 5일군과 10일군에서 ATM, RPA2, Klotho 의 면역반응성은 Cisplatin이 병변으로 작용하는 proximal tubule 에서의 요세관 상피세포의 탈락 및 괴사된 부분에서 강하게 발현되었다. 이에 Cispatin 투여 후 5일군과 10일군에서는 DNA double streand break 가 일어나 apoptosis가 일어나고 이에 따라 ATM, RPA2, Klotho 의 면역반응성이 강하게 발현된 것을 확인 할 수 있었다.

4년차에는 1~3차년도 연구결과를 바탕으로 MRN 복합체의 발생고정 및 손상기전에서의 발현변화를 기반으로하여 세포의 스트레스 반응기전 및 항산화기전에서의 역할을 하는 NQO1의 활성 및 결핍 생쥐를 이용한 Cisplatin 유도 급성신부전 모델에서의 MRN 복합체의 발현 및 위치변화양상을 규명하고, NQO1의 결핍된 성체환경에서의 MRN 복합체의 요세관세포별 발현 위치를 동정하며 Cisplatin 및 손상기전에서의 MRN 복합체와 NQO1에 연관성을 확인 하였다.

Cisplatin 으로 유도된 급성신부전 동물모델에서 β-lapachone의 투여가 MRN 복합체 발현에 영향을 주고, NQO1(NADPH:quinone oxidoreductase 1)의 유무에 있어 MRN 복합체 발현에 영향을 주며, DNA 손상 복구 기전 및 DNA　손상 회복에 있어 관여한다는 사실을 확인 하였다.

5년차에는 1~4차년도 연구 결과를 바탕으로 MRN 복합체의 발생과정 및 손상기전에서 발현변화를 응용하여 세포의 스트레스 반응 기전 및 항산화 기전에서의 역할을 하는 NQO1의 활성 및 결핍 생쥐를 이용한 허혈성 유도 신부전 모델에서의 MRN 복합체의 발현 및 위치 변화 양상을 규명하고, NQO1의 결핍된 성체 환경에서의 MRN 복합체의 요세관 세포 별 발현 위치를 동정하며 허혈성 신장 손상기전에서의 MRN 복합체의 요세관 세포별 발현 위치를 확인하여 MRN 복합체와 NQO1 에 관한 역할을 확인 하였다.

(출처:연구결과 요약문 p.3)

목차 Contents

• 표지 ... 1목차 ... 2Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4 1. 연구과제의 개요 ... 4 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6 5. 연구결과의 활용계획 ... 6 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 6Ⅲ. 연구성과 ... 7끝페이지 ... 15