초록 ▼

연구 목표를 달성하기 위한 세부연구 내용을 성실히 수행하여 포르말린 대체제로 사용할 수 있는 P22 lysozyme-PMAP36 융합 단백질을 시판용 대장균에서 발현할 수 있는 대량 발현 시스템을 개발하여 Western blot 분석법으로 발현 여부를 확인하였다. 발현 정제한 이 융합 재조합 단백질을 이용하여 이유 자돈에서 주로 질병을 야기하는 F4+ 와 F18+ 두 대장균을 고스트 백신으로 제조하여 마우스에서 안전성 및 면역 유도 여부를 확인하였다. 동시에 이의 결과를 세계 양돈 수의사 학술대회에서 발표하였으며 현재 특허 출원을

연구 목표를 달성하기 위한 세부연구 내용을 성실히 수행하여 포르말린 대체제로 사용할 수 있는 P22 lysozyme-PMAP36 융합 단백질을 시판용 대장균에서 발현할 수 있는 대량 발현 시스템을 개발하여 Western blot 분석법으로 발현 여부를 확인하였다. 발현 정제한 이 융합 재조합 단백질을 이용하여 이유 자돈에서 주로 질병을 야기하는 F4+ 와 F18+ 두 대장균을 고스트 백신으로 제조하여 마우스에서 안전성 및 면역 유도 여부를 확인하였다. 동시에 이의 결과를 세계 양돈 수의사 학술대회에서 발표하였으며 현재 특허 출원을 준비 중에 있다. 더불어 최근 이유 자돈에서 발생이 증가하고 있는 부종병을 예방하기 위해 부종병과 밀접한 관련이 있는 독소인 Stx2e를 대량 발현할 수 있는 시스템을 개발하여 발현 정제한 재조합 단백질의 항원성 유지 여부에 대한 실험을 수행한데 이어 백신으로서의 효능을 평가하기 위해 현재 불활성에 대한 실험을 진행 중에 있다. 즉, F4와 F18 핌브리아를 발현하는 ETEC 균주는 P22 lysozyme-PMAP36 융합단백질에 의해 고스트화가 유도되었으며, 이렇게 유도된 세포는 ETEC 고스트 백신으로 효과가 평가되었다. 이 새로운 예방 백신 후보물질의 효능을 평가하기 위해 이 백신 후보물질을 포유 자돈에 근육접종하였고 이유 후에 대장균증에 대한 방어여부를 확인하였다. 즉, 그룹 B의 자돈은 생후 2주 째에 약 2 × 10⁹9 cells이 되도록 각각의 핌브리아 함유 고스트 백신을 근육으로 예방 접종되었고, 대조군인 그룹 A의 포유 자돈은 PBS로 근육 접종되었다. 그룹 B 자돈의 혈청 IgG의 역가는 그룹 A의 자돈의 항체 역가에 비해 유의있게 증가하였다. 그 후 야생형 ETEC의 도전감염이 있은 후, 그룹 B의 모든 자돈에서 설사 및 폐사가 관찰되지 않은 반면, 그룹 A의 자돈 70%에서 설사증상이 관찰 되었고 30%의 폐사율을 보였다. 이 결과는 새로 만든 백신을 포유 자돈에에 근육 접종했을 때 이유 후에 대장균 성사증을 효과적으로 방어할 수 있음을 확인할 수 있었다.
Stx2e를 대량 발현하기 위해 Stx2eA 유전자를 시판되고 있는 발현 벡터에 클로링한 후 국내 돼지에서 분리한 Stx2e 발현 F18+ 대장균을 형질전환시켜 Stx2e를 발현하도록 하였다. 이렇게 발현된 재조합 Stx2e의 독성을 마우스 및 돼지에서 확인하였고, 포르말린으로 불활화 후 마우스 및 토끼에서 안전성 시험을 수행하여 백신으로서의 가능성을 확인하였다.
(출처:요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1목차 ... 2Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4 1. 연구과제의 개요 ... 4 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 4 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6 5. 연구결과의 활용계획 ... 7 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7Ⅲ. 연구성과 ... 8끝페이지 ... 10