초록 ▼

- 혈관 관련 전사인자들의 선별 및 발현 양상을 확인하였고, 내피세포 및 평활근 세포의 마커 발현 양상을 WJ-MSC에 대해 HUVEC과 비교 조사하였음.
- lentiviral system을 통해 HEK293 세포와 WJ-MSC에서 전사인자 유전자 도입에 의한 발현 시스템을 구축하였음.
- WJ-MSC의 선별된 유전자 도입 후 도입된 유전자의 발현을 확인하였으며 분화배지에서 혈관 세포로의 분화 유도 후, 혈관관련 유전자 마커들의 발현 양상의 변화를 조사하였음.
- In vivo Matrigel plug assay를

- 혈관 관련 전사인자들의 선별 및 발현 양상을 확인하였고, 내피세포 및 평활근 세포의 마커 발현 양상을 WJ-MSC에 대해 HUVEC과 비교 조사하였음.
- lentiviral system을 통해 HEK293 세포와 WJ-MSC에서 전사인자 유전자 도입에 의한 발현 시스템을 구축하였음.
- WJ-MSC의 선별된 유전자 도입 후 도입된 유전자의 발현을 확인하였으며 분화배지에서 혈관 세포로의 분화 유도 후, 혈관관련 유전자 마커들의 발현 양상의 변화를 조사하였음.
- In vivo Matrigel plug assay를 구축하여, WJ-MSC의 혈관신생능을 확인하였음.
- 1단계 마무리 연구로서 두 가지 cytokine 조건 (STG, SFIb)을 비교 연구하여 혈관 신생 촉진 효능이 있는 EPC 비부착 증폭 조건을 성공적으로 제안하였음.
(출처: 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

In order to augment neovascularization, adhesive mesenchymal stem cell (MSC) is being used as well as non-adhesive circulating endothelial progenitor cells. In particular, MSCs are isolated with relative ease from umbilical cord blood, bone marrow, Wharton's jelly, placenta, adipose tissue and so on

In order to augment neovascularization, adhesive mesenchymal stem cell (MSC) is being used as well as non-adhesive circulating endothelial progenitor cells. In particular, MSCs are isolated with relative ease from umbilical cord blood, bone marrow, Wharton's jelly, placenta, adipose tissue and so on. MSCs with no modulation have already been shown to promote new vessel growth by several research groups. However, in vivo efficacy of MSCs has to be more improved. Implanted MSCs, indeed, differentiate at a very low rate into vascular cells, specially endothelial cells. Therefore, in this research, we tried to establish a method to increase differentiation into vascular cells by applying several partial reprogramming conditions, in an attempt to develop an efficient method for cell therapy of ischemic diseases. In order to achieve this, we searched an efficient condition by introducing certain transcription factor genes involved in vasculogenesis and iPS generation and then by culturing the cells in the endothelial induction medium. After obtaining the transfected/transduced cells, we examined their differentiation potentials. For the differentiated cells, we characterized the property of the cells and examined their functions. Finally, we tried to test the in vivo efficacy of the obtained cells using in vivo models. During this period, firstly, we selected transcription factors involved in vascular formation and compared their expression patterns between HUVECs and MSCs, together with endothelial and smooth cell markers. Secondly, we established lentivrial expression system for selected transcription factors in HEK293 and MSCs and examined expression levels of endothelial markers after incubation in induction media after introduction of selected transcription factors. Next, we established in vivo Matrigel plug assay and examined angiogenic effect of MSCs. In addition, we also successfully suggested an efficient non-adhesive ex vivo expansion method for cord blood EPCs, which are able to promote neovascularization, by comparing two cytokine combinations (STG, SFIb). Taken together, these results will contribute to improvement of cell therapy for ischemic diseases and to more understanding of EPCs and MSCs.
(출처: Summary 6p)

목차 Contents

• 표지 ... 1제 출 문 ... 2보고서 요약서 ... 3요 약 문 ... 4SUMMARY ... 6CONTENTS ... 7목차 ... 8제1장 연구개발과제의 개요 ... 9제2장 국내외 기술개발 현황 ... 10제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 12 1. MSC의 partial reprogramming을 위한 혈관 형성 관련 유전자 선별 ... 12 2. MSC에서의 선별 유전자 발현 양상 조사 ... 12 3. 발현 시스템 구축 및 유전자 조합 도입에 의한 혈관세포 형성 유도 ... 17 4. 분화 유도된 세포의 특성 조사 ... 21 4. 분화 전 wild type MSC의 혈관신생능 조사 ... 25제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 32제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 35제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 36제 7 장 참고문헌 ... 37끝페이지 ... 38