초록 ▼

(1) Simvastatin은 다양한 암의 화학적 치료제들의 효율을 개선하는 것으로 알려져 있다. 본 연구과제를 통하여 simvastatin에 의해 DU145 전립선암세포의 형태학적인 변화와 Oil Red O 염색 후 지질불균형의 변화를 광학현미경으로 확인하였고, 세포의 생존율이 억제됨을 CCK-8 assay로 증명하였으며, 또한 세포사멸이 유도됨을 trypan blue 염색으로 확인할 수 있었다. 이러한 simvastatin에 의한 효과들과 관련된 새로운 인자들을 DU145 전립선암세포에서 2D 프로테옴 분석 후 MALDI-TOF

(1) Simvastatin은 다양한 암의 화학적 치료제들의 효율을 개선하는 것으로 알려져 있다. 본 연구과제를 통하여 simvastatin에 의해 DU145 전립선암세포의 형태학적인 변화와 Oil Red O 염색 후 지질불균형의 변화를 광학현미경으로 확인하였고, 세포의 생존율이 억제됨을 CCK-8 assay로 증명하였으며, 또한 세포사멸이 유도됨을 trypan blue 염색으로 확인할 수 있었다. 이러한 simvastatin에 의한 효과들과 관련된 새로운 인자들을 DU145 전립선암세포에서 2D 프로테옴 분석 후 MALDI-TOF/TOF MS/MS 방법으로 동정한 결과 vimentin, hnRNP K, TXNDC5가 simvastatin에 의해 감소되는 단백질 spot들로 확인되었고, 반면 cHMGCS, NDRG1, RAB1B, IDI1이 simvastatin에 의해 증가되는 단백질 spot들로 확인되었다. 이 결과들은 2D gel로부터 spot들을 도려내어 Western blot으로 검증하였고, 2D sample과 whole cell extract에서도 simvastatin에 의한 변화들을 검증하였다. 또한 Western blot으로 simvastatin에 의한 세포사멸이 JNK signaling의 활성화와 관련됨을 보여주었고, docetaxel에 의한 JNK의 활성은 simvastatin에 의해 강화됨을 증명할 수 있었으며, 반면 이 과정에서 Akt 인산화와 ERK 인산화는 simvastatin에 의해 억제됨을 알 수 있었다. 이 연구결과들은 “Proteomic analysis of novel targets associated with simvastatin-induced cell death in DU145 human prostate cancer cells" 라는 제목으로 "Proteomics" 저널에 ”Submission“하였지만 "Rejection"되었고, 현재 simvastatin에 의해 조절되는 인자들의 siRNA 발현을 통한 역할규명에 대한 연구를 지속적으로 진행하고 있으며 이 연구 결과들을 첨부하여 다시 더 우수한 논문에 투고하기 위해 최선을 다하고 있다.

(2) NGF는 다양한 세포에서 세포내 환경에 의존하여 생존 및 사멸의 신호를 조절하는데 젒요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. TrkA를 Tet-On 시스템으로 유도발현 시킬 수 있는 SK-N-MC 신경아세포종에서 NGF에 의해 TrkA 단백질 양이 증가됨을 확인하였고, 이 과정에서 JNK signaling과 caspase-8 절단현상과 같은 apoptotic 신호전달과정이 활성화됨을 Western blot으로 증명하였다. 또한 NGF는 TrkA에 의해 유도되는 세포의 형태학적인 변화를 강화하였고, 이 효과는 JNK 저해제인 SP600125에 의해서는 상당히 억제되었지만 PI3K 저해제인 wortmannin에 의해서는 크게 영향을 받지 않았다. NGF에 의해 조절되는 TrkA-의존적 세포사멸과 관련된 인자들을 2D 프로테옴 분석으로 SK-N-MC 신경아세포종에서 MALDI-TOF/TOF MS/MS 방법으로 31개의 단백질 spot들을 동정하였다. 또한 NGF에 의해 조절되는 spot들에 대해 SP600125와 wortmannin에 의한 효과들을 조사하여 hnRNP K, lamin B1, TDP43을 포함하는 11개의 spot들이 SP600125에 의해서는 의미있는 변화를 보여준 반면 wortmanin에 의해서는 크게 변화하지 않음을 확인할 수 있었다. 특히 NGF에 의해 강화되는 TrkA-의존적 세포생존율의 억제가 hnRNP K에 대한 siRNA 발현에 의해 억제된다는 사실을 CCK-8 assay로 증명할 수 있었다. 이 연구결과들은 “Proteomic analysis of novel targets associated with the enhancement of TrkA-indced SK-N-MC cancer cell death caused by NGF"라는 제목으로 “Experimental and Molecular Medicine" 저널에 발표하였다 (Jung et al., 2016).
(출처 : Ⅰ. 연구결과 요약문 4P)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 9