초록 ▼

폐구균은 감염증의 주요 병원체이다. 다양한 폐렴구균백신이 개발되고 있고 이러한 백신의 면역원성을 평가하는 방법으로 opsonophagocytic killing assay (OPA)가 사용되어 왔다. 다양한 연구에서 13개 혈청형에 대한 multiplexed OPA (MOPA)가 사용되어 왔으나 최근 추가 혈청형에 대한 백신의 개발과 추가 혈청형의 임상적 중요성이 커지면서 이들 혈청형에 대한 MOPA법의 필요성이 증대되었다. 이번 연구를 통해 본 연구자들은 11개 추가 혈청형(2, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 15B, 17

폐구균은 감염증의 주요 병원체이다. 다양한 폐렴구균백신이 개발되고 있고 이러한 백신의 면역원성을 평가하는 방법으로 opsonophagocytic killing assay (OPA)가 사용되어 왔다. 다양한 연구에서 13개 혈청형에 대한 multiplexed OPA (MOPA)가 사용되어 왔으나 최근 추가 혈청형에 대한 백신의 개발과 추가 혈청형의 임상적 중요성이 커지면서 이들 혈청형에 대한 MOPA법의 필요성이 증대되었다. 이번 연구를 통해 본 연구자들은 11개 추가 혈청형(2, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 15B, 17F, 20B, 22F, 33F)과 6C, 6D 추가 혈청형에 대한 MOPA 시험법을 국내에 확립하고 밸리데이션한 후 노인의 23가 다당백신면역원성 연구에 적용해 보았다.

시험법에 사용되는 혈청, 균주, HL-60 세포주, 보체 등의 요소들을 최적화하였고 시험법에 대해 정밀도,특이도, 정확도를 검사하였다. 그 결과 총 13개 혈청형으로 확대된 MOPA시험법은 재료혈청, 균주, HL-60 세포주, 보체 등의 요소들에 대해 적합도 검사에서 통과하였고 13개 혈청형에 대해 특이성을 나타내었다 또한 singleplexed OPA법과 높은 상관관계를 나타내었다. 그리고 intraassay- 혹은 interassay-정밀도 검사에서 변동계수는 7~39%로 생물학적 검사인 MOPA를 고려할 때 적합한 범위 이내이었다. 이와 같이 설정된 assay 검사를 응용하여 2년차에는 인간 혈청을 적용하여 연구를 적용하였다. 우리나라 어르신 폐렴구균 예방접종 사업에서 얻어진 혈청을 이용하여 노인에서 23가 다당백신접종 전과 한달 후의 혈청에서 13가지 혈청형에 대한 기능적 면역반응을 측정하는데 이 MOPA법을 사용하였다. 모든 혈청형에 대해서 옵소닌 항체가의 기하평균은 접종 전에 비해 접종 한 달후 유의하게 증가하였고 4배 이상 증가 비율은 37~90%를 보여 주었다. 접종 후 옵소닌 항체가 8이상의 비율은 모든 혈청형에서 90% 이상이었다.

이러한 결과들을 바탕으로 11개 혈청형으로 확대된 MOPA는 향후 추가 혈청형이 포함된 새로운 단백결합 폐구균백신의 임상평가와 다양한 질환군이나 집단의 폐구균 면역원성 연구 및 기존 23가 폐구균 다당백신의 평가 등에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

( 출처 : 요약문 6p )

Abstract ▼

S. pneumoniae is a major cause of infectious disease. Various pneumococcal vaccines have been developed and evaluated for immunogenicity by opsonophagocytic assay (OPA). A multiplexed OPA (MOPA) for 13 pneumococcal serotypes was used in many studies with various populations. However, the creation of

S. pneumoniae is a major cause of infectious disease. Various pneumococcal vaccines have been developed and evaluated for immunogenicity by opsonophagocytic assay (OPA). A multiplexed OPA (MOPA) for 13 pneumococcal serotypes was used in many studies with various populations. However, the creation of new conjugate vaccines with increased valence and the implication of pneumococcal disease of additional serotypes has encouraged the establishment of expanded MOPA. In this study, we have established and validated MOPA for additional 11 serotypes (2, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 15B, 17F, 20B, 22F, and 33F). After validation of MOPA, we applied to immunogenicity of 23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine (PPSV23) in Korean elderly.

All materials—including serum, complement, bacterial master stocks, and HL-60 cells—were properly prepared and evaluated for assay optimization. Following optimization, the assay was validated for accuracy, specificity, and intra- and inter-assay precision with sera from adult donors using standard protocols. The expanded MOPA platform was specific for all serotypes.
Assay accuracy revealed a strong correlation with data obtained from single-serotype OPA.
Additionally, the coefficients of variation were 7–24% and 13–39% for intra- and inter-assay precision studies.

The functional immune response in Korean elderly was measured by MOPA for 11 serotypes before and 4 weeks after immunization with PPSV23. The geometric mean opsonization indices (OIs) to all 11 serotypes significantly increased after immunization compared to those before immunization. The proportions of participants with a ≥ 4-fold increase in OIs were ranged 37%~90% for the 11 serotypes. After vaccination, at least 90% of subjects reached the OIs ≥ 8 in 11 serotypes.

These results suggest that the expanded MOPA may be useful to evaluate the efficacy of PPV23 and future conjugate vaccine formulations.

( 출처 : SUMMARY 8p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 용역연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 제 출 문 ... 3
• 목차 ... 4
• Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 ... 6
• 국문 요약문 ... 6
• Summary ... 8
• Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 10
• 제1장 총괄연구개발과제의 연구목적 및 필요성 ... 10
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ... 33
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ... 93
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 117
• 제5장 총괄주요연구 변경사항 ... 123
• 제6장 총괄참고문헌 ... 124
• 제7장 총괄첨부서류 ... 129
• 끝페이지 ... 140