초록 ▼

본 연구에서는 화학물질의 in vitro 광독성 광과민 반응 유발 가능성을 평가하기 위한 동물대체시험법을 개발하는 것을 연구목표로 하여, 1) in vitro 광과민 시험법 개발 및 예측력 산출, 2) 임상조직 기반 광독성/백반증 생체지표 발굴 및 검증 이라는 두 가지 연구내용을 수행하였다. 기존 문헌 분석을 통하여 광과민 표준물질 42종을 도출하고, 표준화된 프로토콜을 수립하였다. in vitro 각질 세포계에서 기전 중심 바이오마커인 IL-8과 VEGF유리를 지표로 42종의 표준물질에 의한 광과민 반응 예측력을 평가하였다.

본 연구에서는 화학물질의 in vitro 광독성 광과민 반응 유발 가능성을 평가하기 위한 동물대체시험법을 개발하는 것을 연구목표로 하여, 1) in vitro 광과민 시험법 개발 및 예측력 산출, 2) 임상조직 기반 광독성/백반증 생체지표 발굴 및 검증 이라는 두 가지 연구내용을 수행하였다. 기존 문헌 분석을 통하여 광과민 표준물질 42종을 도출하고, 표준화된 프로토콜을 수립하였다. in vitro 각질 세포계에서 기전 중심 바이오마커인 IL-8과 VEGF유리를 지표로 42종의 표준물질에 의한 광과민 반응 예측력을 평가하였다.

또한, 2종의 불멸화 각질세포주를 확립하여 각질세포로서의 검증 및 염증반응성을 확인하여 향후 대체시험법 모델로의 활용 가능성을 제시하였다. 임상 근거 광독성/백반증 생체 지표 발굴 연구에서는 백반증 환자 임상 조직 및 광독성 유발 부위에서의 공통증가 혹은 감소 유전자를 발굴하였으며, 멜라닌세포/각질세포 공배양계에서 이들 지표의 유용성을 검증하였다. 신규 발굴된 KRT16은 공배양계 및 화학물질/UV동시노출 임상조직에서 발현 증가가 확인되어 향후 활용 가능성을 제시하였다. 본 연구를 통하여 국제적 공인 시험법이 제안된 바 없는 화학물질의 광과민 유발 가능성을 검토/예측할 수 있는 동물대체시험법을 제안하고자 하였으며, 국제 경쟁력을 제고에 기여할 수 있으리라 기대한다.

(출처 : 국문 요약문 6p)

Abstract ▼

In this study, we aimed to develop an alternative toxicity testing to evaluate the potential of chemicals inducing phototoxicity/photo-sensitization (photo-allergy). Our specific aims are 1) Development of in vitro test for photo-sensitizing potential of chemicals and 2) Identification a new biomark

In this study, we aimed to develop an alternative toxicity testing to evaluate the potential of chemicals inducing phototoxicity/photo-sensitization (photo-allergy). Our specific aims are 1) Development of in vitro test for photo-sensitizing potential of chemicals and 2) Identification a new biomarker for phototoxicity/vitiligo. Here we developed a standard operating protocol using HaCaT to measure the change of cytotoxicity and the release of IL-8 and VEGF induced by chemical exposure in the absence or presence of UV-irradiation. A list of forty two reference compounds was developed, and these compounds were tested in HaCaT according to the newly developed protocol. Sensitivity and specificity values were calculated based on the outcomes. Along with a new protocol to test photo-sensitization potential of compounds, we have established immortalized keratinocytes for future application for animal alternative test. In development of a clinical relevant biomarkers using skin tissues isolated from patients with phototoxicity or vitiligo, we found several biomarker candidates through microarray approach. Among them, KRT16, a simultaneously increased biomarker in patients with vitiligo and phototoxicity, was suggested as a potent candidate. The increase of KRT16 by UV irradiation or reference compounds was also observed in co-culture of melanocytes and keratinocytes. In summary, we have evaluated the potential of IL-8 and VEGF in HaCaT as biomarkers for photo-sensitizing reactions by reference compounds, and we have newly identified clinically-relevant biomarker of KRT16 for phototoxicity/vitiligo.

(출처 : Summary 8p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 용역연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 제 출 문 ... 3
• 목차 ... 4
• Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 ... 6
• 국문 요약문 ... 6
• Summary ... 8
• Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 10
• 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ... 10
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ... 78
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ... 81
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 139
• 제5장 총괄주요연구 변경사항 ... 141
• 제6장 총괄참고문헌 ... 142
• 제7장 총괄첨부서류 ... 149
• 끝페이지 ... 172