보고서 정보
주관연구기관 |
(주)다미화학 |
연구책임자 |
김광년
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참여연구자 |
심지영
,
손주현
,
김민석
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보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2011-11 |
주관부처 |
보건복지부 [Ministry of Health & Welfare(MW)(MW) |
등록번호 |
TRKO201800000380 |
DB 구축일자 |
2018-11-03
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키워드 |
엔에이에이디피.각질형성세포.분화.피부수분손실.트랜스글루타미네이즈.NAADP.Keratinocyte.Differentiation.TEWL.Transglutaminase.
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201800000380 |
초록
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본 연구개발의 목표는 NAADP(Nicotinic Acid Adenine Dinucleotide Phosphate)가 인간피부의 각질형성세포의 분화를 촉진하는 기능을 갖는 가를 검증하고, 피부학적 기능을 바탕으로 원료화의 기반을 구축하는 것임. NAADP는 췌장의 베타세포에서 인슐린의 생합성을 촉진하는 기능에 의해 알려진 물질이며, 인슐린이 생합성되는 세포 내 신호 중 칼슘이온의 상승을 유도한다는 사실이 각질형성세포가 분화되는 신호와 동일하기 때문에 NAADP가 각질형성세포에서도 칼슘이온 신호전달을 촉진하여 각질형성세 포의 분화를
본 연구개발의 목표는 NAADP(Nicotinic Acid Adenine Dinucleotide Phosphate)가 인간피부의 각질형성세포의 분화를 촉진하는 기능을 갖는 가를 검증하고, 피부학적 기능을 바탕으로 원료화의 기반을 구축하는 것임. NAADP는 췌장의 베타세포에서 인슐린의 생합성을 촉진하는 기능에 의해 알려진 물질이며, 인슐린이 생합성되는 세포 내 신호 중 칼슘이온의 상승을 유도한다는 사실이 각질형성세포가 분화되는 신호와 동일하기 때문에 NAADP가 각질형성세포에서도 칼슘이온 신호전달을 촉진하여 각질형성세 포의 분화를 촉진할 수 있다는 가설을 설정하고 연구를 진행하였음. 이를 증명하기 위하여 본 연구진은 각질형성세포에서 NAADP가 세포 내 칼슘이온의 농도를 상승시킬 수 있음을 확인하였고, 인간 각질 형성세포가 NAADP에 의해 분화되어 다양한 분화관련 표지인자를 발현하는지에 대해 검증하였음. 그 결과 NAADP의 농도에 따라 Keratin1, Keratin10, Involucrin, Loricrin, Filaggrin, Transglutaminase의 발현이 증가하는 것을 확인하여 NAADP가 각질형성세포의 분화를 촉진한다는 것을 세포학적으로 확인하였음. 이러한 세포학적인 결과에 근거하여 무모마우스의 피부에서 Keratin1/10 및 Loricrin과 Filagrin의 발현이 NAADP의 농도에 비례하여 증가하는 것을 확인하여, 세포학적 수준에서 나타나는 NAADP의 효능이 인간의 피부에서도 나타날 수 있다는 가능성을 확인하였음. 무모마우스의 피부에서 나타난 NAADP의 분화촉진 관련 결과에 근거하여 NAADP의 효능시험을 실시하였음. 먼저 인간 각질형성세포의 이동성시험(Migration assay)을 실시하여 인간 성장인자보다 우수한 효능을 확인하였고, 인간의 피부장벽을 테이프손상법(Tape-stripping)으로 손상시킨 후 피부장벽의 상처를 회복시키는 정도를 비교한 결과 단위시간 내에 피부의 수분손실(TEWL)을 급격히 억제할 수 있었고, 피부장벽의 재생속도도 대조군에 비하여 매우 빠름을 확인할 수 있었음. 또한 각질형성세포의 분화 시 천연보습인자 흑은 보습에 유용한 지질이 생산될 수 있다는 보고에 근거한 피부 보습력시험에서 정상적인 피부에서도 피부 보습력의 향상에 도움을 준다는 결과를 얻었으며, 자원자를 대상으로 4주동안 주름, 모공, 색소침착 포피린, 피지, 피부톤 등 6가지 항목에 대하여 실시한 안면피부시험에서도 주름, 색소침착, 포피린, 피부톤의 변화 등 4가지 항목에 대한 개선효과를 확인할 수 있었음. 이러한 NAADP의 피부효능을 극대화하기 위하여 리포좀으로 제재화하는 연구를 진행하였고, 효소학적 생산조건을 최적화하여 기존에 발표된 생산수율(약 63%)을 96%까지 향상시킬 수 있었으며, up-scale에 대한 확인시험을 진행하여 NAADP의 산업화 기반을 구축하고자 한 본 연구과제의 목표를 달성하였음.
(출처 : 보고서 요약서 5p)
Abstract
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The objecitve of this research was to investigate that NAADP can stimulate the differentiation of human keratinocytes and to build a foundation of the business based on the dermatological functions of NAADP.
NAADP can stimulate to increase Ca2+ for cell signaling which synthesizes insu
The objecitve of this research was to investigate that NAADP can stimulate the differentiation of human keratinocytes and to build a foundation of the business based on the dermatological functions of NAADP.
NAADP can stimulate to increase Ca2+ for cell signaling which synthesizes insulin from β-cell of pancreas, and now this signaling is very similar to the one for the differentiation of human keratinocytes. So we hypothesized that NAADP can stimulate the differentiation of human keratinocytes through cell signaling of Ca2+. To prove this hypothesis, we tested to increase Ca2+ and to express six kinds of differentiation marker in human keratinocytes by NAADP.
As a result, Keratin1/10, Involucrin, Loricrin, Filaggrin, and Transglutaminase showed to be increased in western blot assay dependent on the concentration of NAADP, and also Keratin1/10, Filaggrin, and Loricrin showed to be increased by NAADP in immuno-histochemistry by using hairless mice. Then we confirmed the function of NAADP for the differentiation of human keratinocytes. To investigate the efficacy of NAADP, Migration assay of human keratinocytes, repair assay of damaged human skin which induced by tape-stripping, moisturizing assay, facial skin test were carried out, and NAADP showed higher migration capacity than positive control group (growth factors), and excellent wound healing effect and moisturizing effect. And also NAADP could gave human skin the reduction effects of pigments and porphyrin and the improvement for brightness. When considered these results, we held a conviction for the business of NAADP, and wanted to build a foundation for this good substance, NAADP. So we have optimized the condition of NAADP production by enzyme reaction, and have done up-scale test for mass production. We concluded that NAADP can stimulate the differentiation of keratinocytes and give human skin the dermatological effects. If practice further studies of NAADP for signal transduction and genetic assay, we expect that NAADP will be valuable more and more.
(출처 : SUMMARY 7p)
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 목차 ... 2
- I. 총괄현황 ... 3
- 2. 제출문 ... 4
- 3. 보고서 요약서 ... 5
- 4. 요약문 (한글) ... 6
- 5. SUMMARY ... 7
- 6. 연구 성과 실적 및 향후 계획 ... 8
- 7. 참여연구원 현황표 ... 20
- II. 연구결과 ... 21
- 1. 연구개발과제의 배경 및 필요성 ... 22
- 2. 국내외 기술개발 현황 ... 28
- 3. 연구개발과제의 추진체계 ... 32
- 4. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 32
- 5. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 69
- 6. 향후 연구성과 추진 계획 ... 71
- 7. 연구개발결과의 파급효과 ... 71
- 8. 연구개발결과의 활용계획 ... 72
- 9. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 74
- 10. 참고문헌 ... 74
- III. 첨부서류 ... 77
- 1. 자체평가의견서 ... 79
- 2. 실적 증빙자료 ... 83
- 3. 기타 첨부서류 ... 92
- 끝페이지 ... 93
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