가지과 및 콩과 종자전염 검역세균 속감별을 위한 선택배지 개발 Development of selective medium for identifying genus of seed-transmissible plant pathogen of Solauaccac and Leguminosae원문보기
보고서 정보
주관연구기관
나래바이오테크
연구책임자
권찬호
참여연구자
오정균
,
이진성
,
양진권
,
이영우
,
기재준
보고서유형
최종보고서
발행국가
대한민국
언어
한국어
발행년월
2013-11
주관부처
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA)
등록번호
TRKO201800001343
DB 구축일자
2019-04-27
키워드
가지과.콩과.선택배지.종자전염 병원성 세균.solanaceae and Leguminosae.selective medium.seed-transmissible plant pathogen.
초록▼
식물 검역에서 중요한 가지과 및 콩과식물에 병을 일으키는 식물검역 대상 병원세균 11종(콩과 종자 검역대상 세균 6종,Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola, Pseudomonas syringae pv. pisi, Pseudomonas syringae pv. glydnea, Xanthommas campestris pv. glycines, Rhodococcus fascians, Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus, 가지과 종자 검역대상 세균 4종, Ralsto
식물 검역에서 중요한 가지과 및 콩과식물에 병을 일으키는 식물검역 대상 병원세균 11종(콩과 종자 검역대상 세균 6종,Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola, Pseudomonas syringae pv. pisi, Pseudomonas syringae pv. glydnea, Xanthommas campestris pv. glycines, Rhodococcus fascians, Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus, 가지과 종자 검역대상 세균 4종, Ralstonia solanacearum, Pseudomonas syringae pv. tomato, Xanthomonas campestris pv. vesicatoria, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis)에 대한 속감별 선택배지 를 개발하였다. 대상 병원세균 11종의 대표적인 균주를 수집하여 NCBI를 통해 이 균주들에 대한 DNA 염기서열을 찾아 분석하고 이 중 발색 기질 관련된 효소롤 검색하여 이에 해당하는 DNA의 보존염기서열(conserved sequence)로 판단되는 위치에서 각 헤당 primer를 제작하여 타겟 대사 효소 존재 여부를 PCR로 확인하여 각 균주의 검출을 위한 발색기질을 탐색하였다. 5속에 대해 영양 조성물, 저해제 조성물과 발색기질을 테스트하여 최종 5속 검출 발색 배지를 개발하고 이를 표준 균주를 이용하여 성능평가를 실시하였고 기존의 다른 선택배지와의 성능을 비교 평가하였다. 기존 배지에 비해 높은 선택도를 갖으며 발색 반응으로 쉽게 검출할 수 있는 5속 검출 발색배지를 개발하였다. 종자를 이용한 개발 배지의 민감도 테스트 및 현장 검출 테스트를 실시하여 검출 방법을 평가하였고 이를 통해 현장 적용을 위한 검출 매뉴얼로 개발하였다.
(출처 : 연구결과보고서 요약문 5p)
Abstract▼
Detection methods of the plant quarantine bacterial pathogens that cause disease on cconomically important Fabaceae and Solanaceae crops (Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola, Pseudomonas syringae pv. pisi, Pseudomonas syringae pv. g]ydnea, Xanthomonas campestris pv. glycines, Rhodococcus fascian
Detection methods of the plant quarantine bacterial pathogens that cause disease on cconomically important Fabaceae and Solanaceae crops (Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola, Pseudomonas syringae pv. pisi, Pseudomonas syringae pv. g]ydnea, Xanthomonas campestris pv. glycines, Rhodococcus fascians, Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus for Fabaceae crops; Ralstonia solanacearwii Pseudomonas syringae pv. tomato, Xanthomonas campestris pv. vesicatoria, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis for Solanaceae) were developed in this study. The strains representative of each bacterial species were collected and, the specific genes which coded chromogenic enzyme were screened by DNA base sequence analysis via NCBI site and confirmed by PCR method with primers, designed for conserved sequences of the pathogenic bacteria, respectively. New chromogenic selective media for bacterial pathogens were developed by compositing with nutrient sources, inhibitior factors and chromogenic substrates. The chromogenic selective media were tested compared with the earlier semi- or selective media for evaluation of sensitivity and selectivity. Through infected or infested seed test with the chromogenic media and bio- PCR, the new detection method and mannual for pathogenic bacteria would be proposed for stable plant quarantine.
(출처 : SUMMARY 6p)
목차 Contents
표지 ... 1
용역기술개발사업 연구결과보고서 ... 2
제출문 ... 3
목차 ... 4
연구결과보고서 요약문 ... 5
Summary ... 6
총괄연구개발과제의 연구결과 ... 7
제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 7
1.1. 총괄연구개발과제의 목표 ... 7
1.2. 총괄연구개발과제의 목표달성도 ... 13
1.3. 국내·외 기술개발 현황 ... 14
제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 16
2.1. 균주 수집 ... 16
2.2. 속감별을 위한 특이적 대사 효소 탐색 ... 16
2.3. 선정된 특이적 대사 효소에 대한 발색 기질 탐색 ... 16
2.4. 발색 기질의 표준 균주 반응 ... 16
2.5. 종자 전염 검역세균 5속의 속감별을 위한 배지 조성물 탐색 ... 17
2.6. 선택 배지 개발을 위한 조성물 테스트 ... 19
2.8 개발된 속감별 발색 배지의 현장 적용 메뉴얼 개발 ... 19
제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 21
3.1. 균주 수집 ... 21
3.2. 종자전염 검역세균 5속의 속감별을 위한 특이적 대사 효소 탐색 ... 24
3.3. 선정된 특이적 대사 효소에 대한 발색 기질 탐색 ... 30
3.4. 종자 전염 검역세균 5속의 속감별을 위한 배지 조성물 탐색 ... 31
3.5. 종자전염 검역세균 5속의 속감별을 위한 특이적 대사 효소에 따른 발색 반응 검사 ... 39
3.5. 선택 배지 개발을 위한 조성물 테스트 ... 41
3.6. 개발된 속감별 발색 배지의 현장 적용 매뉴얼 개발 ... 84
제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 98
제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 99
5.1. 활용성과 ... 99
5.2. 활용계획 ... 100
제6장 기타 중요변경사항 ... 100
제7장 참고문헌 ... 101
제8장 첨부서류 ... 105
총괄 연구과제 요약 ... 106
별첨 1. 본 연구에서 상용화한 종자 감염 세균 5속 감별을 위한 Lop™ plate 제품 ... 108
별첨 2. 본 연구에서 상용화한 종자 감염 세균 4속 감별을 위한 broth 제품 ... 109
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