초록 ▼

연구의 목적 및 내용
1) 요줄기세포 특성분석
· 환자 연령과 성별에 따른 분석
· 세포외기질 처리에 따른 분석
· 산소농도에 따른 분석
· 최적 세포외기질과 산소농도로 구성된 복합조건에 따른 분석

2) 목표세포인 근, 신경세포로의 분화법 확립
· 복합조건에서 근육세포와 신경세포로의 분화효율 비교(FACS)
· 줄기세포와 분화세포의 생체내 분포, 면역원성 및 종양원성 평가

3) 요실금 마우스 모델에서 임상적용을 위한 요실금 세포치료법 최적조건 확립
· 최적 세포수

연구의 목적 및 내용
1) 요줄기세포 특성분석
· 환자 연령과 성별에 따른 분석
· 세포외기질 처리에 따른 분석
· 산소농도에 따른 분석
· 최적 세포외기질과 산소농도로 구성된 복합조건에 따른 분석

2) 목표세포인 근, 신경세포로의 분화법 확립
· 복합조건에서 근육세포와 신경세포로의 분화효율 비교(FACS)
· 줄기세포와 분화세포의 생체내 분포, 면역원성 및 종양원성 평가

3) 요실금 마우스 모델에서 임상적용을 위한 요실금 세포치료법 최적조건 확립
· 최적 세포수 선정
· 최적 계대수 선정
· 최적 투여경로 선정
· 효과적인 보조제 선정
· 최적 투여횟수 선정
· 최적 투여간격 선정
· 요도괄약근의 조직학적/기능적 평가

연구결과
1) 요줄기세포 특성분석
· 환자의 연령이 낮을수록 줄기세포 특성이 우수, 남성이 여성보다 cell line구축 용이
· 제1형 콜라젠에서 세포증식, 줄기세포능 유지, 자발적 분화 저해가 유의적 차이 보임
· 저산소농도 (5%)가 정상농도 (20%)에 비해 증식율 높음
· 복합조건에서 배양시 세포증식율, 줄기세포 유전자 발현, 콜로니 형성율 높음

2) 목표세포인 근, 신경세포로의 분화법 확립
· 복합조건에서 근육세포와 신경세포로의 분화효율 증대
· 도입된 세포는 생체내에서 2주간 잔존, 투여자리에 분포하며 타장기로 이주하지 않음,비면역원성이며 6개월 추적시 종양원성 보이지 않음

3) 요실금 마우스 모델에서 임상적용을 위한 요실금 세포치료법 최적조건 확립
· 최적 세포수는 1x10^6임
· 최적 계대수는 5이하임
· 최적 투여경로는 요도괄약근이며, 정맥투여는 유의적으로 낮은 효율을 보임
· 세포 부유용 보조제는 임상적으로 허가된 수액으로 선정
· 최적 투여횟수는 2회 반복 투여임
· 최적 투여간격은 1차 투여 후 4주후 반복투여임
· 복합조건에서 배양된 요줄기세포는 요도괄약근의 조직학적 회복을 촉진하였고, 정상과 유사한 요누출압과 요도폐쇄압을 보임

연구결과의 활용계획
·자가세포를 이용하므로 면역억제제 사용없이 세포도입가능
·세포치료법 효과 입증으로 근본적 요실금 치료 가능
·생체내 안전성 확립으로 임상적용 시도
·요줄기세포를 타 난치성 질환에 적용범위 확대

( 출처 : 한글요약문 4p )

Abstract ▼

Purpose&contents
1) Stem cell characteristics according to
· Patient age and sex
· Extracellular matrix treatment
· Oxygen concentration
· Complex conditions with extracellular matrix and oxygen concentration

2) Establishment of differentiation into target cells and muscle cell

Purpose&contents
1) Stem cell characteristics according to
· Patient age and sex
· Extracellular matrix treatment
· Oxygen concentration
· Complex conditions with extracellular matrix and oxygen concentration

2) Establishment of differentiation into target cells and muscle cells
· Comparison of differentiation efficiency between muscle cells and neurons in complex conditions
· In vivo distribution of stem cells and differentiated cells, evaluation of immunogenicity and tumorigenicity

3) Establish optimal conditions for clinical application in incontinence mouse model
· Optimal cell number selection
· Selection of the optimum number of passages
· Optimal route of administration
· Selection of effective supplements
· Selection of optimal dosing frequency
· Optimal dosing interval selection
· Histologic / functional evaluation of urethral sphincter

Result
1) Stem cell characteristics
· The lower the patient's age, the better the stem cell characteristics.
· Cell proliferation, viability, and spontaneous differentiation inhibition showed in type 1 collagen
· Hypoxic concentration (5%) is better than the normal concentration (20%)
· Proliferation, stem cell gene expression, colony formation rate are higher in complex conditions

2) Differentiation into target cells and muscle cells
· Increase the efficiency of differentiation into muscle cells and neurons in complex conditions
· Introduced cells remain in vivo for 2 weeks, distributed at the site of administration, do not migrate to other organs, non-immunogenic, non-tumorigenicity at 6 months follow-up

3) Establish optimal conditions for clinical application in incontinence mouse model
· Optimal cell number is 1 × 10 ^ 6
· Optimum passages is less than 5
· Optimal route is urethral sphincter, intravenous administration showed lower efficiency
· Cellular adjuvant is selected as clinically approved saline
· Optimal administration is 2 repeated doses.
· Optimal dosing interval is 4 weeks after the first dose.
· Uterine stem cells cultured under combined conditions promoted histologic recovery of urethral sphincter muscle and showed similar urinary leakage and urethral closure pressure as a normal

Expected Contribution
· Using autologous cells, cells can be introduced without immunosuppressants
· Possible to treat incontinence by cell therapy
· Clinical application by establishment of in vivo safety
· Expanded application range of stem cells to other intractable diseases

( 출처 : SUMMARY 5p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• 연구계획 요약문 ... 3
• 연구결과 요약문 ... 4
• 한글요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 연구내용 및 결과 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 6
• 2. 연구수행 내용 및 결과 ... 7
• 3. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 19
• 4. 연구결과의 활용계획 ... 21
• 5. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 22
• 6. 참고문헌 ... 23
• 7. 연구성과 ... 24
• 8. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설‧장비 현황 ... 24
• 9. 기타사항 ... 24
• 별첨1 대 표 연 구 성 과 ... 25
• 별첨2 세부 목표 관련 증빙 ... 35
• 끝페이지 ... 47