초록 ▼

○ in vitro 상에서 카할세포에서의 다양한 구성 성분 한약제제에 의한 반응 및 작용기전 확인을 목표로 하여 진행하였음.

-먼저 카할세포의 최적 배양 조건을 확립하고자 다양한 방법을 통해서 배양 조건을 변경해 가면서 실험을 진행하였음. 배양 시간을 변경하기도 하였고, 첨가물의 농도도 바꾸어 가면서 실험을 진행하였음. 그 후에 가장 알맞은 배양 시간과 첨가물 농도를 알아 내었으며 거기에 따라서 실험을 진행 하였음.

-그후 다양한 한약제제의 효능을 확인하였는데 그 중에서도 보험용 한약제제 중 소화기 질환에

○ in vitro 상에서 카할세포에서의 다양한 구성 성분 한약제제에 의한 반응 및 작용기전 확인을 목표로 하여 진행하였음.

-먼저 카할세포의 최적 배양 조건을 확립하고자 다양한 방법을 통해서 배양 조건을 변경해 가면서 실험을 진행하였음. 배양 시간을 변경하기도 하였고, 첨가물의 농도도 바꾸어 가면서 실험을 진행하였음. 그 후에 가장 알맞은 배양 시간과 첨가물 농도를 알아 내었으며 거기에 따라서 실험을 진행 하였음.

-그후 다양한 한약제제의 효능을 확인하였는데 그 중에서도 보험용 한약제제 중 소화기 질환에 다양하게 이용되고 있는 반하사심탕 및 가미소요산에 초점을 맞추어서 실험을 진행 하였음.

-또한 위장관과 관련된 암 세포주에서 한약제제의 항암 효능도 연구 하였음.

○ HEK293 세포에 다양한 이온통로의 cDNA를 overexpression하는 시스템 구축
- HEK293 세포에 transfection reagent인 lipofectamine을 이용하여 이온통로 cDNA를 overexpression 시킴. 서울대학교 의과대학 생리학교실에서 TRPM7 cDNA를, 동국대학교 의과대학 생리학교실에서 Ca2+ activated Cl- (ANO1) cDNA를, 일본 Doshisha University Graduate School of Brain Science의 Hiroaki Misono 교수에게서 voltage gated potassium 채널 cDNA를 각각 받아서 발현시스템을 구축하였음.

○ 반하사심탕과 가미소요산을 중심으로 다양한 보험용 한약제제 및 한약재의 카할세포에서의 반응과 관련 기전에 대한 연구를 진행하였음.
- 배양한 카할세포에서 다양한 한약제제의 반응을 보았으며 그 기전을 확인하였음.

- 세포막에 존재하는 여러 수용체들 중에서 한약제제 반응과 관련된 수용체를 확인하였음.

- 활성화되는 이온통로의 특징 확인하였는데 이온통로 중에서는 TRP채널과 Chloride 채널중에서 ANO1 채널에 초점을 맞추어서 효능을 확인하였음.

- 신호전달 기전을 확인하였음.

- in vivo에서의 효능을 확인하기 위해서 정상 생쥐 및 위장관 운동 병태 생쥐모델에서 위장관 운동성 증진 효과를 확인하였음.

○ 다양한 한약제제의 구성성분으로 잘 알려진 naringenin의 효능 확인
- 위장관 카할세포에서의 효능을 알아보았으며 그 기전을 확인하였음.

- 또한 in vivo 실험을 통해서 naringenin의 마우스 위장관에서의 운동성 억제 효능을 확인할 수 있었음.

○ 또한 위장관 관련 암세포주에서 한약제제에 의한 세포사멸 효능을 확인할 수 있었음.
- 다양한 한약제제의 암세포 사멸 효과를 확인하기 위해서 MTT assay, Flow cytometry를 이용한 세포주기 분석, mitochondrial membrane depolarization 확인, Caspase 3 와 9를 통한 암세포 사멸 확인, 항암제와의 병용처치 효과, 세포사멸과 관련된 이온통로의 관련성등을 확인할 수 있었음.

(출처 : 연구결과 요약문 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 6
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 8
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 8
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 8
• Ⅲ. 연구성과 ... 9
• 끝페이지 ... 9