초록 ▼

전통적인 한약제조는 물추출을 기본으로 하기 때문에 고분자 다당류가 많이 함유되어 있음. 한약의 고분자 다당류는 분자구조가 복잡하고 분석이 어렵기 때문에 효능 연구에서 그 역할이 제외되었으며 대신 지용성 성분에 국한하여 한약의 효능을 검증하였음. 한약의 고분자 다당류 성분은 장에서 거의 분해되지 않으므로 세포 실험에 바로 적용하기는 어려움. 또한 한약내 지용성 성분도 배당체로 존재하기 때문에 장내 미생물에 의해 전환이 일어난 후 인체에 흡수됨. 따라서 한약의 효능 연구에는 한약 전체와 접촉하는 미생물에 대한 접근이 필요함.
본

전통적인 한약제조는 물추출을 기본으로 하기 때문에 고분자 다당류가 많이 함유되어 있음. 한약의 고분자 다당류는 분자구조가 복잡하고 분석이 어렵기 때문에 효능 연구에서 그 역할이 제외되었으며 대신 지용성 성분에 국한하여 한약의 효능을 검증하였음. 한약의 고분자 다당류 성분은 장에서 거의 분해되지 않으므로 세포 실험에 바로 적용하기는 어려움. 또한 한약내 지용성 성분도 배당체로 존재하기 때문에 장내 미생물에 의해 전환이 일어난 후 인체에 흡수됨. 따라서 한약의 효능 연구에는 한약 전체와 접촉하는 미생물에 대한 접근이 필요함.
본 과제에서는 이미 면역조절과 항염 효능이 검증된 계지물추출물을 선택하여 장내 미생물의 변화와 장상피조직의 면역과 대사관련 변화를 규명하고자 하였음.
1차년(2014년 11월∼ 2015년 4월)에는 계지물추출물의 지표분석을 통해 소재의 안정화를 확인하였고 계지물추출물과 다당류에 의해 변화하는 장내 미생물을 확인하기 위해 계지물추출물과 다당류를 제거한 분획층을 만들어 마우스에게 경구투여한 후 소장과 대장의 장점막과 분변의 DNA를 분리함. 이 DNA중 16s rRNA gene, Lactobacillus group, Lachnospiraceae-Ruminococcacea group, Enterococaceae group의 양적 변화를 보기 위해 qPCR을 수행하여 계지물추출물과 다당류 유무에 의한 변화를 확인함.
2차년 (2015년 5월 ∼ 2016년 4월)에는 계지물추출물을 마우스에게 경구 투여후 소장, 대장, 분변의 DNA를 분리하여 16s rRNA gene PCR 및 library를 구축한 후 차세대염기서열방식으로 sequencing을 수행함. OTU 변화, Chao 1 index, Shannon index, Simpson index에서 계지투여에 의한 변화를 확인했고 phylum 및 class, family, genus 수준에서도 일부 균의 변화를 확인했음. Principal coordinate analysis를 수행한 결과 전체 미생물총의 변화는 없었음.
3차년 (2016년 5월 ∼ 2017년 4월)에는 계지물추출물을 투여한 마우스의 복강 대식세포를 분리하여 대식세포의 스캐빈저 수용체의 변화, 탐식기능, LPS에 대한 마우스의 costimulator molecule의 변화, 염증성 사이토카인 및 효소의 변화를 확인함. 또한 계지물추출물을 투여한 마우스의 소장상피조직에서 면역과 대사에 관여하는 유전자의 변화 및 IgA를 분석함.
요컨대 본 과제를 통해 계지물추출물은 장상피조직의 면역기능과 대사기능을 개선하여 복강대식세포의 염증반응을 줄여줌을 확인하였고 또한 장내미생물총에 변화를 주었음. 향후 이러한 각각의 변화를 연결하는 표적기관을 확인하는 과정이 필요함.

(출처 : 연구결과 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 4
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 6
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 6
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 8