초록 ▼

고아핵수용체(orphan nuclear receptor)의 하나인 NR4A1은 췌장암을 비롯한 많은 종류의 종양 조직에서 과발현하고 있으며, 다양한 경로를 통해 암세포의 성장과 생존에 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 또한 NR4A1을 표적으로 하는 siRNA나 저해약물의 처리는 암세포의 세포자살사와 mTOR 신호전달체계의 저해를 유도함으로써 암세포의 성장을 억제하는 것으로 나타났다. 최근 NR4A1이 암세포의 전이(metastasis)를 조절하는 것으로 알려졌으나 그 기전은 명확하지 않고, 또한 NR4A1을 표적으로하여

고아핵수용체(orphan nuclear receptor)의 하나인 NR4A1은 췌장암을 비롯한 많은 종류의 종양 조직에서 과발현하고 있으며, 다양한 경로를 통해 암세포의 성장과 생존에 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 또한 NR4A1을 표적으로 하는 siRNA나 저해약물의 처리는 암세포의 세포자살사와 mTOR 신호전달체계의 저해를 유도함으로써 암세포의 성장을 억제하는 것으로 나타났다. 최근 NR4A1이 암세포의 전이(metastasis)를 조절하는 것으로 알려졌으나 그 기전은 명확하지 않고, 또한 NR4A1을 표적으로하여 암세포의 성장을 제어하는 연구도 아직 초기 단계에 있다. 따라서 본 연구를 통하여 췌장암세포의 전이에 있어 NR4A1의 기능에 대한 분자적 기전을 확인하고자 하였다. 또한 NR4A1을 표적으로 하는 천연물 유래의 항암제 또는 항암 보조제 개발을 위한 후보물질을 발굴하고 그 가능성을 도출하고자 하였으며, 최종적으로 본 연구과제 수행을 통해 얻은 결과들은 다음과 같다.

● 침윤성이 강한 췌장암 세포주들(Panc-1과 MiaPaCa-2)을 이용하여 NR4A1이 암세포의 이동, 침윤 및 부착을 β1-integrin 의존적으로 조절함을 확인함.

● NR4A1이 β1-integrin의 프로모터에 결합함으로써 전사를 촉진시키는 것으로 확인 되었으며, 이는 β1-integrin의 프로모터에 존재하는 두 GC-rich 부위 (-443 bp와 –417 bp)에 NR4A1/specificity protein (Sp)/p300 complex의 결합 유도를 통한 전사 활성화에 의해 조절되는 것을 추가적으로 확인함. 이와 같이 NR4A1에 의한 β1-integrin 발현 조절기전을 규명함으로써 췌장암 성장 및 전이를 제어할 수 있는 새로운 분자 표적으로서의 가능성을 확인함.

● 약 400여종의 천연물 단일물질 및 추출물을 대상으로 NR4A1 저해활성 스크리닝(Gal4-NR4A1 chimeras 및 3xNBRE-luciferase reporter constructs 활용)을 완료하였으며, NR4A1에 대한 저해활성이 특히 우수한 3종(fangchinoline, tetrandrine과 broussochalcone A)의 물질을 최종적으로 선발함.

● 선발된 저해물질 3종을 대상으로 인간유래 췌장암 세포주(Capan-2, MiaPaCa-2, Panc-1)에 대한 NR4A1 의존성 항암 효과 및 관련 기전을 확인함.

● 무흉선 누드마우스(nu/nu)를 이용한 췌장암 모델에서 4주간 tetrandrine (25 mg/kg/day)을 경구투여 한 동물의 경우 대조군 대비 유의적인 종양 성장 억제 효과가 관찰되었으며, 종양 조직을 이용한 단백질 발현 검사를 통해 NR4A1 의존성 항암 기전을 추가적으로 확인함. 하지만 동일 실험 조건에서 broussochalcon A (20mg/kg/day)는 종양 억제 효과를 보이지 않는 것으로 확인되었으며, 향후 처리 농도 또는 처리 기간 조절을 통한 추가적인 항암 활성 평가가 필요할 것으로 사료됨.

● 동일 췌장암 모델을 대상으로 혈액 생화학적 분석 및 병리조직학적 검사를 통한 tetrandrine의 안전성(일반 독성)을 평가한 결과, 무처리 대조군에 비해 특별한 독성소견을 발견하지 못함.

최종적으로 본 연구를 통해 NR4A1에 의한 β1-integrin 조절 기전을 규명함과 동시에 천연물 소재 라이브러리로부터 NR4A1 저해제를 발굴하여 췌장암에 대한 항암 활성(in vitro와 in vivo) 및 관련 기전을 확인하였다. 이와 같은 천연물 NR4A1 저해제는 본 연구를 통해 세계 최초로 발굴되었으며, 따라서 NR4A1을 표적으로 하는 천연물 항암제 개발과 관련 한발 앞선 경쟁력을 가질 수 있을 것으로 예상되며, 또한 새로운 항암 표적발굴에 관한 국내 연구의 활성화와 천연물 신약 산업의 발전에도 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

( 출처 : Ⅰ. 연구결과 요약문 3p

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 8
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 8
• Ⅲ. 연구성과 ... 9
• 끝페이지 ... 15