초록 ▼

1. 지능성 담체 제조 방법 확립
지능성 담체는 4단으로 제조하였으며, 알지네이트 비드를 지지체로 해서 가장 내부에는 생리활성 물질과 프로바이오틱스를 안정되게 탑재할 수 있는 다공성 실리콘을 탑재하였고, 다공성 실리콘은 키토산과 팩틴으로 캡슐화 하였다. 1단 담체는 담채 원액으로 구성되어 있으며 2단 (위 소화단계용), 3단 (소장 소화단계용) 및 4단 담체 (대장 소화단계용)를 모두 포함하고 있다. 2단 담체는 위 소화단계에서 분비되는 염산의 낮은 pH에 반응하여 지능성 담체에서 생리활성 물질이 분리될 수 있도록 낮은 pH(

1. 지능성 담체 제조 방법 확립
지능성 담체는 4단으로 제조하였으며, 알지네이트 비드를 지지체로 해서 가장 내부에는 생리활성 물질과 프로바이오틱스를 안정되게 탑재할 수 있는 다공성 실리콘을 탑재하였고, 다공성 실리콘은 키토산과 팩틴으로 캡슐화 하였다. 1단 담체는 담채 원액으로 구성되어 있으며 2단 (위 소화단계용), 3단 (소장 소화단계용) 및 4단 담체 (대장 소화단계용)를 모두 포함하고 있다. 2단 담체는 위 소화단계에서 분비되는 염산의 낮은 pH에 반응하여 지능성 담체에서 생리활성 물질이 분리될 수 있도록 낮은 pH(<2)에서 용해되는 키틴/키토산을 알지네이트 비드에 혼합하여 제조하였다. 3단 담체는 소장에서 지방분해 효소 lipase와 bile acid에 의해 담체가 분해되어 생리활성 물질을 배출할 수 있도록 지방 분해 효소에 분해되는 올리브유를 첨가하여 알지네이트 비드를 제조하였다. 4단 담체는 대장균과 유산균의 작용에 의해 지능성 담체에서 생리활성 물질이 배출될 수 있도록 구성하였으며, 대장균과 유산균이 성장하는 과정을 통해 알지네이트 비드가 분리될 수 있도록 LB broth와 MRS broth를 알지네이트 비드에 첨가하여 지능성 담체를 제조하였다
2. 장질환 유도 및 헬리코박터 파일로리 감염을 통한 한국형 장질환 동물 모델 개발
① 자유 급여하는 물에 5%의 DSS를 첨가하여 5일간 음용시키고 5일 후 항문을 관찰하여 장질환이 유도되었는지 확인함 ② 고체 배지에 배양된 H. Pylori를 loop를 이용하여 모은다. ③수집한 H. Pylori를 액체배지에 배양 한 후에 감염이 가능한 조건이 될 때까지 배양한다. ④ H. Pylori는 1*10⁶~1*10⁸ CFU/mL정도 배양이 되면 액체 배지에 배양된 H. Pylori (200 uL)를 존대를 이용하여 DSS로 장질환이 유도된 실험쥐에 3일간 3회씩 위장에 삽입하여 감염시킨다. CLO test를 통해 헬리코박터 파일로리 감염이 확인된 실험쥐에 DSS를 급여하여 장질환을 유도함으로써 한국형 장질환 동물모델을 개발하였다.
3. 지능형 담체 개발 및 in vitro 조건하에서 지능형 담체의 장질환 억제효능 검증
예비연구 등을 통하여 장질환 억제 효능 등이 검증된 물질을 23종을 추출하여 헬리코박터 파일로리 억제효능과 대장균 억제 효능을 검증하였다. 실험결과 감초, 헛개, 차수수, 구기자, 겨우살이, 흑태 및 계피에서 헬리코박터 파일로리 억제 효능이 큰 것으로 나타났다.
4. 발효 미생물 탐색 및 제조기법 확립
Probiotics는 예비실험 결과를 토대로 9종(Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus lactis, Bifidobacterium bifidum, Bacillus subtilis, Bacillus natto, Bacillus licheniformis 및 Bacillus brevis)을 선발하여 장 상피세포에서의 정착 능력과 in vitro 소화 후 각 소화 단계별 생존율을 측정하였다. 실험 결과 선발된 9종의 probiotics는 장상피 세포의 정착능이 있는 것으로 나타났다. 대부분의 probiotics 균은 소장 소화단계에서 생존율이 50% 수준까지 낮아지는 것으로 나타났다.
5. 지능형 담체의 장질환 억제 효능 검증
동물실험과 In vitro 조건 하에서 염증발현에 관여하는 cytokine 발현관련 연구결과 감초, 황기, 헛개, 겨우살이, 오미자, 녹차, 청국장, 하수오 및 계피 등을 함유한 지능성 담체가 IL-8의 발현에 영향을 주는 것으로 나타났다. 세포 생존률 측정결과 적두, 흑태, 오미자, 율무, 하수오 및 계피 등을 함유한 지능성 담체가 세포 생존률에 영향을 미치는 것으로 나타났고, 나머지 대부분은 세포 생존률을 증가시키는 것으로 나타났다. 뿐만 아니라 실험 동물의 장출혈과 소화기관 성상이 개선되는 것을 관찰하였다.
6. 지능형 담체의 동물체 안정성 측정
본 연구를 통해 개발된 소재를 실험쥐에게 1개월간 급여한 후 식이섭취량, 음수섭취량, 분변 생성량, 체중변화, 장기의 성상 및 간수치 (AST, ALT)가 대조구와의 차이가 나타나지 않아 안전한 것으로 판단된다.

(출처 : 연구결과 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 9
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 9
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 10
• Ⅲ. 연구성과 ... 10
• 끝페이지 ... 11