초록 ▼

● HSP27의 비정상적 이량체 형성을 유도하는 화합물 SW15, J2 및 유도체를 합성하였음.
● 구조적 분석 결과를 토대로 HSP27이량체의 cysteine 잔기(이 잔기 사이의 거리는 7 Å정도임)에 작용하여 비정상적인 공유결합을 한 안정한 HSP27 이량체 형성 (HSP-comp-HAP27)을 할 수 있을 것으로 간주되는 화합물을 설계ㆍ합성하여 이물질들의 HSP27 이량체 형성능을 cell free 및 cell에서 평가하였음. 그 결과 가장 효능이 좋았던 SW15를 기반으로 더 좋은 J2 화합물을 개발하였고 이를 바탕

● HSP27의 비정상적 이량체 형성을 유도하는 화합물 SW15, J2 및 유도체를 합성하였음.
● 구조적 분석 결과를 토대로 HSP27이량체의 cysteine 잔기(이 잔기 사이의 거리는 7 Å정도임)에 작용하여 비정상적인 공유결합을 한 안정한 HSP27 이량체 형성 (HSP-comp-HAP27)을 할 수 있을 것으로 간주되는 화합물을 설계ㆍ합성하여 이물질들의 HSP27 이량체 형성능을 cell free 및 cell에서 평가하였음. 그 결과 가장 효능이 좋았던 SW15를 기반으로 더 좋은 J2 화합물을 개발하였고 이를 바탕으로 경구투여가 가능한 HSP16 화합물을 합성하였음.
● SW15, J2 및 HSP16을 대상으로 인간 폐암세포 또는 유방암세포를 대상으로 세포독성항암제 (Cisplatin, Taxol), HSP90 저해제 (Radicicol 또는 17-AAG), 방사선, 또는 표적항암제 (Trastuzumab 또는 Gefitinib)등과 병용 처리함으로써 항암효과가 증가됨을 확인함.
● 이러한 항암효과는 HSP27 의존적이었고 HSP27-Cysteine 잔기 의존적임을 확인함.
● SW15 및 J2를 대상으로 WST를 이용한 HepG2를 비롯한 8개 세포주에 대한 cell viability 측정완료
● 생체시료 혈장에서의 선도물질 (J2)의 분석법 확립 및 검증 완료
● 랫트에서 J2의 약동학 조사 및 약동학 파라미터 도출
● 하지만 HSP27 비정상적 이량체 형성능이 가장 좋은 J2가 용해도 및 체내동태 실험 결과 흡수가 잘 되지 않아 용해도가 개선된 J2 유도체인 HSP-9 및 HSP-16의 혈장 중 분석법 확립 및 검증, 약동학 조사 및 약동학 파라미터 도출, 단회독성시험이 진행중에 있음.

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

● HSP (Heat Shock Proteins) promotes tumorigenesis and causes resistance during traditional chemotherapy and radiotherapy.
● Research on development of small molecular inhibitors against HSP70 and HSP90 is actively going on due to the presence of ATP binding domain in both HSP70 and HSP90 and eve

● HSP (Heat Shock Proteins) promotes tumorigenesis and causes resistance during traditional chemotherapy and radiotherapy.
● Research on development of small molecular inhibitors against HSP70 and HSP90 is actively going on due to the presence of ATP binding domain in both HSP70 and HSP90 and even small molecular drug candidates targeting HSP90 and HSP70 are under clinical study. However, HSP27 has no ATP binding domain and plays important roles in both tumorigenesis and drug resistance in ATP-independent manner, leading to the absence of high throughput screening (HTS) system.
● We established the HTS method to measure HSP27 activity, discovered the lead compounds (SW15 and J2 Derivative) as small molecular HSP27 inhibitors, and evaluated their in vitro /in vivo efficacy in reduction of the resistance induced during chemotherapy and radiotherapy.
● The biggest issue of HSP90 inhibitors under the clinical trails is the induction of resistance which is caused by HSF1 activation-mediated the overexpression of other HSPs. SW15, J2, and HSP-16 may help to overcome this disadvantage of traditional HSP90 inhibitors.

(출처 : SUMMARY 7p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요 약 문 ... 4
• SUMMARY ... 7
• 목차 ... 8
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 9
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 10
• o 새로운 패러다임에 의한 다양한 타겟에 대한 통합적 공략의 필요성 대두 ... 10
• o 샤페론단백질, 열충격단백질(HSP)의 임상 질환에서의 중요성 ... 11
• o HSP의 암에서의 역할 ... 12
• o 열충격단백질 27 (HSP27, HSBP1) 과발현에 의한 항암제 및 방사선 치료 효율저하 ... 14
• o HSP27을 타겟으로 하는 초고속검색 방법의 부재로 인한 HSP27 저해제 발굴 연구 미약 ... 16
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 22
• o 구조기반 HSP27 이량체 표적 화합물 설계를 위한 molecular modeling 연구 ... 22
• o HSP27 단백질을 이용한 비정상적 이량체 생성에 의한 HSP27 저해제 스크리닝 시스템 구축 ... 26
• o 기존의 ZER 보다 더 강력한 HSP27 비정상 dimer를 형성하는 SW15 및 J2 발굴 ... 26
• o 용해도가 개선된 HSP-16의 혈중 농도 분석법 확립 및 검증 ... 55
• o 실험동물(흰쥐)에서의 HSP-9 및 HSP-16의 체내동태 연구 ... 57
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 61
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 69
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 71
• 제8장 참고문헌 ... 79
• 끝페이지 ... 80