초록 ▼

다. 연구개발성과
본 과제의 연구를 통해 특허출원 7건 (목표 3건), SCI급 논문 13편 (목표 9건), 비SCI급 논문1편, 학술발표실적 20건과 언론홍보 3건, 인력양성 10명으로 기존 목표에 비교하여 우수한 성과를 보였다.

제1세부과제에서는 목적 병원체인 PED와 FMD 바이러스에 대한 아단위 항원 생산을 완료하였다. PED바이러스의 주요 당단백질인 spike protein의 일부분인 S1D와 COE 부분을 수용성단백질과 inclusion body의 재수용화 방법을 통해서 생산해냈다. FMD 바이러스는 m

다. 연구개발성과
본 과제의 연구를 통해 특허출원 7건 (목표 3건), SCI급 논문 13편 (목표 9건), 비SCI급 논문1편, 학술발표실적 20건과 언론홍보 3건, 인력양성 10명으로 기존 목표에 비교하여 우수한 성과를 보였다.

제1세부과제에서는 목적 병원체인 PED와 FMD 바이러스에 대한 아단위 항원 생산을 완료하였다. PED바이러스의 주요 당단백질인 spike protein의 일부분인 S1D와 COE 부분을 수용성단백질과 inclusion body의 재수용화 방법을 통해서 생산해냈다. FMD 바이러스는 multi-epitope라는 독창적인 기술을 통해 수용성 단백질을 개발하였다. 또한 cytokine 면역보강제를 개발하였다. RANKL은 유산균과 대장균에서 모두 생산이 가능하며 특히, RANKL 생산 유산균은 그 자체로 면역보강제로 같이 사용 가능한 결과를 보였다. 그리고 IL-2 생산 유산균을 개발하였다. 그 외에도 고효율 유산균 발현 벡터시스템을 개발하고 대장균 고농도 배양을 위한 최적화 기술 및 배양 배지를 개발하였다.

제2세부과제에서는 경구용 백신 담지체로 HPMCP와 CAP에 cysteine 아미노산을 이용하여 thiol 기를 도입하였다. Thiol기는 점막의 황이온과 이황화결합을 통해 점막에 결합하여 점막에서 백신담지체의 유지시간을 증가시켜주는 결과를 보였다. 이렇게 개발된 T-HPMCP와 T-CAP는 점막면역백신 보조제로 그 활용성을 입증하였다. 또한 비강용 백신 담지체로 T-HPMCP와 T-Eudragit에 mannan을 수식하여 점막점착성과 면역보강효과를 모두 증가시킨 결과를 도출하였다. mannan은 면역세포를 직접 활성화 시키는 면역보강기능효과를 보였다.

제1협동과제에서는 1,2세부에서 개발된 자원에 대해 목적동물에 실증실험을 하였고 그 결과 PED 백신은 GST-S1D 항원을 HPMCP에 담지하여 RANKL 생산 유산균과 조합하였을 때 공격접종에서 자돈의 생존률을 향상시켰으며, FMD 백신은 M5BT 항원과 돼지용 면역보강제인 IMS1313과 조합하여 주사하였을 때 상용백신에 준하는 중화항체 생성량을 확인하여 백신으로서 가능성을 확인하였다.

제2협동과제에서는 제1,2세부에서 개발된 자원의 대량생산을 위한 연구를 진행하였고 대장균에서 생산되는 항원의 대량생산을 위해 고농도 배양 기술 등과 최적화 작업을 진행하였다. 향 후 돼지 등 대상가축에 대한 공격접종에 대한 후속데이터 축적이 완료되면 ‘FMD 항원단백질 생산’ 특허를 기술이전 받아 ‘FMD 예방 경구백신’ 제품과 ‘FMD 치료 주사백신’ 제품을 개발하여 출시할 예정이다.

(출처 : 요약문 3p)

Abstract ▼

C. Results
The quantatative R&D product outcomes in this project were three patent applications and nine SCI research papers. In this project, we applied for seven patents and published thirteen SCI-level papers and one non-SCI paper. In addition, ten graduate students were educated on the resear

C. Results
The quantatative R&D product outcomes in this project were three patent applications and nine SCI research papers. In this project, we applied for seven patents and published thirteen SCI-level papers and one non-SCI paper. In addition, ten graduate students were educated on the research subject and twenty presentations meetings were held.

In Project I, the Subunit antigen of PED and FMD was successfully produced. The PED antigen was produced through expressing SID and COE, the part of spike protein of PED virus, as a soluble protein and re-solublizing the inclusion body. The FMD antigen was produced by constructing a multi-epitope antigen. In addition, this team developed a cytokine adjuvant. RANKL can be produced in both lactic acid bacteria and E.coli. In particular, RANKL producing lactic acid bacteria in and of itself showed the adjuvant effect. This research team also developed an IL-2 producing lactic acid bacteria and constructed a high-efficient lactic acid bacteria expression system.

In Project Ⅱ, thiolated HPMCP and CAP were developed as an oral vaccine delivery carrier. Thiol residues can increase the holding time of an encapsulated vaccine through making a disulfide bond between the sulfide ions of intestinal mucosa. Developed T-HPMCP and T-CAP showed vaccine adjuvant effects. Also, mannan decorated T-HPMCP and T-Eudragit were developed as a nasal vaccine delivery carrier. Mannan showed adjuvant features by directly activating immune cells.

In Cooperative project I, target animal experiments were performed using resources developed in Project I and Project Ⅱ. As a result, the PED antigen enhanced survival rates of piglets in challenge experiments when GST-S1D antigen was encapsulated in HPMCP with RANKL producing lactic acid bacteria. The FMD antigen induced neutralizing antibody production comparable to commercial vaccines when the M5BT antigen and IMS1313 adjuvant were injected.

In Cooperative project Ⅱ, mass production of developed resources were proceeded and the culture condition of PED and FMD antigen was optimized.

Commercial production for FMD preventing oral vaccine and FMD treating injection vaccine is scheduled for after completing challenge experiments against the target animal.

(출처 : SUMMARY 6p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 6
• CONTENTS ... 9
• 목차 ... 10
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 11
• 제1절 연구개발의 목표 ... 11
• 제2절 연구개발의 필요성 ... 12
• 제3절 연구개발 범위 ... 22
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 27
• 제1절 국내 기술개발 현황 ... 27
• 제2절 해외 기술개발 현황 ... 30
• 제3장 연구수행 내용 및 결과 ... 33
• 제1절 총괄 연구개발 추진전략 ... 33
• 제2절 1세부과제 : M세포 표적형 항원 및 면역보강 단백질 개발 및 생산 ... 35
• 제3절 2세부과제 : 점막면역백신의 체내 전달 효율 증진을 위한 가축백신 담지 고분자 전달체 개발 및 생산 ... 64
• 제4절 1협동과제 : 병원체 공격접종을 통한 표적형 점막면역 백신 효과 실증 연구 ... 87
• 제5절 1, 2세부 및 1협동 공동연구 ... 115
• 제6절 2협동과제 : 표적형 점막면역 백신 산업적 대량생산체계 확립 및 산업화 추진 ... 123
• 제7절 1세부 및 2협동 공동연구 ... 149
• 제8절 연구개발 성과 ... 160
• 제4장 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 170
• 제1절 연도별 목표달성도 ... 170
• 제2절 관련분야 기여도 ... 171
• 제5장 연구결과의 활용계획 ... 173
• 제6장 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 175
• 제1절 연구개발 과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 175
• 제7장 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 186
• 제8장 참고문헌 ... 187
• 끝페이지 ... 191