초록 ▼

개발 목적 및 필요성
- 인간의 활동에 의해 환경으로 유출되는 유해화학물질의 종류와 양이 비약적으로 증가되고 있음. 이에 기존 인지능의 한계를 뛰어넘는 BT 및 ET 기반의 첨단융합기술을 이용한 생태/환경 위해성 평가 도구 개발의 필요성이 대두됨

연구개발결과
1. 바다송사리 간 기원 전사체 정보 확보
- 454 GS FLX Sequencing을 통해 22,000여 전사체 정보 생산
- 유전자 pathway 분석 기반 확립

2. 전사체 정보 탑재한 Oligo-Array 개발
- Ol

개발 목적 및 필요성
- 인간의 활동에 의해 환경으로 유출되는 유해화학물질의 종류와 양이 비약적으로 증가되고 있음. 이에 기존 인지능의 한계를 뛰어넘는 BT 및 ET 기반의 첨단융합기술을 이용한 생태/환경 위해성 평가 도구 개발의 필요성이 대두됨

연구개발결과
1. 바다송사리 간 기원 전사체 정보 확보
- 454 GS FLX Sequencing을 통해 22,000여 전사체 정보 생산
- 유전자 pathway 분석 기반 확립

2. 전사체 정보 탑재한 Oligo-Array 개발
- Oligo-probe 디자인 및 이를 탑재한 44 K Marine medaka Oligo-Array EnviHaz Fish Array제작

3. 내분비계 장애물질 대응 유전자 지표 발굴
- Bisphenol A (BPA), 17β-estradiol (E2), Nonylphenol (NP), Perfluorooctane sulfonate (PFOS), Triclosan (TCS)등 5종을 대상 내분비계 장애물질로 선정
- 급성 노출에 대한 차등발현 유전자 프로파일링

4. 내분비계 장애물질 대응 Focused Array 개발 (EnviHaz-Fish EDCs Focused Array)
- 차등발현 유전자 pathway 분석
- 물질별 유전자 지표 선별 [BPA (118), E2 (1545), NP (170), PFOS (127),TCS (184)], 중복 유전자 제거 후, 총 1,784종 선별
- 15 K x 8 format EDCs Focused Array 제작
- 바다송사리, 송사리 및 제브라피쉬에 적용

5. 내분비계 장애물질 대응 qPCR Array Kit 개발 (EnviHaz-Fish EDCs qPCR Array Kit)
- Core 차등발현 유전자 지표 선별 [BPA (77), E2 (64), NP (96), PFOS (32),TCS (29)]
- PCR primer 디자인하고, 검증을 통해 최종 188 종의 유전자 선정
- EDCs qPCR Array Kit 제작
- 바다송사리, 송사리 및 제브라피쉬에 적용

성능사양 및 기술개발 수준
1. 성능사양
다섯 종의 내분비계 장애물질 (BPA, E2, NP, PFOS, TCS)의 소형어류 반치사농도(LC₅₀)의 1/50 내지 1/100 농도에 해당되는 μg/L (ppm) 수준 검출 가능

2. 기술개발 수준
유전자 생체지표를 활용하여, 마이크로어래이 기법 및 정량 PCR 기법을 적용한 첨단 기술을 구현함

활용계획
- 내분비계 장애물질 노출 여부 확인
- 내분비계 장애물질 노출에 따른 대사/생리 변화 위해성 예측
- 신규화학물질의 내분비계 장애유발 여부 확인 도구로 활용
- 수계의 내분비계 장애물질 신속 검출 키트로 활용

( 출처: 요약서 3p )

Abstract ▼

Ⅳ. Results
1. Development of EnviHaz-Fish Focused Array for EDCs exposure
- A set of 1,784 gene probes, which could be responded to five EDCs
(BPA, E2, NP, PFOS, and TCS) are loaded
- The prediction of eco/envirionmental risks at sublethal concentration of the EDCs which are equivalent t

Ⅳ. Results
1. Development of EnviHaz-Fish Focused Array for EDCs exposure
- A set of 1,784 gene probes, which could be responded to five EDCs
(BPA, E2, NP, PFOS, and TCS) are loaded
- The prediction of eco/envirionmental risks at sublethal concentration of the EDCs which are equivalent to about 1/50-1/100 of LC₅₀ could be possible

2. Development of EnviHaz-Fish qPCR Array Kit for EDCs exposure
- A set of PCR primers for 188 core gene biomakers are loaded
- Rapid prediction of endocrine disrupting effects of environmental pollutants by PCR method

( 출처: SUMMARY 10p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 요 약 서 ... 3
• 요 약 문 ... 6
• SUMMARY ... 9
• 목차 ... 11
• 표목차 ... 13
• 그림목차 ... 15
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 17
• 1-1. 연구개발 목적 ... 17
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 17
• 가. 수생태계의 중요성 및 위험극복 ... 17
• 나. 독성유전체 연구 결과의 활용 ... 19
• 다. 수생 생물을 이용한 수생태계 위해성 평가 시스템 개발의 중요성 ... 20
• 1-3. 연구개발 범위 ... 20
• 가. 바다(자바)송사리(Oryzias javanicus) ... 20
• 나. 내분비계 장애물질(Endocrine disrupting chemicals, EDCs) ... 22
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 24
• 2-1. 국내 기술개발 현황 ... 24
• 2-2. 국외 기술개발 현황 ... 25
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 27
• 3-1. 연구개발의 내용(범위) 및 최종목표 ... 27
• 가. 연구개발의 내용(범위) ... 27
• 나. 연구의 최종목표 ... 40
• 3-2. 연구개발 결과 및 토의 ... 41
• 가. 바다송사리를 이용한 생태/환경 위해성 분석 기반 확립 ... 41
• 나. EnviHaz-Fish Array의 개발 ... 45
• 다. 대상 내분비계 장애물질의 선정 ... 46
• 라. 내분비계 장애물질 대응 유전자 지표 발굴 ... 48
• 마. 내분비계 장애물질 대응 EnviHaz-Fish EDCs Focused Array 개발 ... 79
• 바. 내분비계 장애물질 대응 EnviHaz-Fish EDCs qPRC Array Kit 개발 ... 83
• 사. 시간별 노출실험에 의한 내분비계 장애물질 대응 유전자 발굴의 유의성 ... 103
• 3-3. 연구개발 결과 요약 ... 106
• 가. 바다송사리를 이용한 생태/환경 위해성 분석 기반 확립 ... 106
• 나. EnviHaz-Fish Array의 개발 ... 106
• 다. 대상 내분비계 장애물질의 선정 ... 107
• 라. 내분비계 장애물질 대응 유전자 지표 발굴 ... 107
• 마. 내분비계 장애물질 대응 Focused Array 개발 (EnviHaz-Fish EDCs Focused Array) ... 107
• 바. 내분비계 장애물질 대응 qPCR Array Kit 개발 (EnviHaz-Fish EDCs qPCR Array Kit) ... 108
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 109
• 4-1. 목표달성도 ... 109
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 110
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 111
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 112
• 7. 연구개발결과의 보안등급 ... 113
• 8. 국가과학기술종합정보시스템(NTIS)에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 114
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 115
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 116
• 11. 기타사항 ... 118
• 12. 참고문헌 ... 119
• 부 록 ... 120
• 부록 1 E2 노출에 의해 발현량이 변화된 유전자 목록 ... 120
• 부록 2 EnviHaz-Fish EDCs Focusrd Array에 탑재된 유전자 목록 ... 159
• 끝페이지 ... 204