초록 ▼

□ 연구개요
간암환자 유래의 B세포와 골수종 세포를 융합하여 만든 인간 하이브리도마로부터 간암 특이 항원 글리피칸-3 (GPC3)를 표적하는 인간 단클론항체 (human anti-GPC3 항체)를 분리‧정제하여 그 특성을 규명하고, anti-GPC3 항체의 항암효과를 기내 실험 (in vitro)과 체내 실험 (in vivo)을 통해 분석하여 간암치료제로 이용 가능한 인간 단클론 항체를 개발함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1차년도 목표: 4종의 anti-GPC3 항체의 특성 분석
1차년도 결과: anti

□ 연구개요
간암환자 유래의 B세포와 골수종 세포를 융합하여 만든 인간 하이브리도마로부터 간암 특이 항원 글리피칸-3 (GPC3)를 표적하는 인간 단클론항체 (human anti-GPC3 항체)를 분리‧정제하여 그 특성을 규명하고, anti-GPC3 항체의 항암효과를 기내 실험 (in vitro)과 체내 실험 (in vivo)을 통해 분석하여 간암치료제로 이용 가능한 인간 단클론 항체를 개발함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1차년도 목표: 4종의 anti-GPC3 항체의 특성 분석
1차년도 결과: anti-GPC3 항체 4종의 중쇄 및 경쇄의 아형을 분석한 결과, EF21-1, EF21-4, 그리고 EF34-5는 IgG1,ĸ로, EF21-2는 IgG4,λ로 규명됨. 항체 각각의 중쇄 및 경쇄 변위부위 (variable region) 서열을 규명하고 벡터에 클로닝 하였음. anti-GPC3 항체 4종의 항원에 대한 결합력을 실제 세포 표면에 발현된 GPC3에 대해서, 또 재조합 GPC3 단백질에 대해서 분석함. 세포 표면 GPC3에 대한 4가지 항체의 K_d 값은 수 nM (nano molar) 수준으로 관찰되었고, 재조합 GPC3에 대해서는 EF21-1과 EF21-2의 경우 10 pM (pico molar), EF21-4의 경우 0.69nM, EF34-5는 6.7nM 수준의 K_d 값이 관찰되었음.
2차년도 목표: anti-GPC3 항체의 in vitro 항암력 분석
2차년도 결과: 동물 실험에 앞서 4종 항체의 in vitro 항암력을 시험하고자 항체의존성 세포독성 활성 (antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC)을 측정하였고, GPC3를 발현하는 간암세포에 anti-GPC3 항체를 결합시켜 6주령 누드 생쥐 피하에 주입한 뒤, 자라는 종양의 크기를 대조군과 비교하였음. 그 결과 EF21-1과 EF21-4에서 높은 항체의존성 세포독성 활성 및 암세포 성장 억제 효과를 확인하였음. 또한, 항암력과 항원결정기 간의 상관관계를 규명하고자 4종 항체의 항원결정기를 동정하였는데, EF21-1과 EF21-2는 항원의 N-terminus에 결합하고, EF21-4와 EF34-5는 항원의 3차 구조에 민감한 항원결정기를 가짐을 밝힘.
3차년도 목표: Xenograft tumor model을 이용한 anti-GPC3 항체의 in vivo 항암능력 분석
3차년도 결과: 간암세포주 HepG2를 마리 당 5x10⁶ 개씩 누드 생쥐 피하에 주사하여 일정 시간에 일정 크기의 tumor mass가 형성되는 간암생쥐모델을 성공적으로 확립하였고, 이에 in vitro 항암능 평가에서 유효했던 항체 EF21-1 또는 EF21-4를 단독으로 주 3회 복강주사하며 종양의 크기 변화를 대조군과 대비하여 관찰한 결과, 두 종류의 항체 모두 암세포 성장 억제 효과가 있었고, EF21-4의 효과가 더 높음을 확인함.

□ 연구개발결과의 중요성
기존의 치료용 항체개발에 활용되는 방법에 비하여 부작용이나 거부반응이 적은 인간 하이브리도마 유래의 인간 단클론항체 생산 기술을 확립하여 질병 치료는 물론, 국내 항체 의약품 산업의 활성화에 이어 국내 생명공학 기술의 국제경쟁력을 높일 수 있음. 본 기술은 간암뿐 아니라 다른 종류의 암 및 병증에 응용이 가능하므로 해당 질병의 치료제 개발의 새로운 지표가 될 수 있으며 그로인한 경제적 파급효과가 클 것임.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 가) 연구개발의 필요성 ... 4
• 나) 보유기술 및 현황 ... 5
• 다) 목표 및 연구범위 ... 6
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 6
• 가) 연도별 세부 연구목표 ... 6
• 나) 연구 수행내용 및 결과 ... 7
• 다) 세부목표 별 연구결과 증빙 ... 8
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 16
• 4. 참고문헌 ... 16
• 대표적 연구실적 ... 17
• 끝페이지 ... 20