초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
◦ 제 1세부과제명 : BVDV 정량분석법 및 면역염색법 확립
- 정량분석법(Real-time RT-PCR) 개발: BVDV type 1과 type 2의 유전형(genotype)을 구별하며, 동시에 검출 가능한 진단법 개발
→ BVDV type 1a, 1b는 3 copy까지 검출하고, type 2는 30 copies의 검출 민감도 확인
→ 시판중인 Real-time RT-PCR과 비교시 A사의 경우 모든 유전형을 검출할 수 있으나 유전형 구분이 되지 않았으며, B사의 경우 2가지 유전형

5. 최종 연구결과 요약
◦ 제 1세부과제명 : BVDV 정량분석법 및 면역염색법 확립
- 정량분석법(Real-time RT-PCR) 개발: BVDV type 1과 type 2의 유전형(genotype)을 구별하며, 동시에 검출 가능한 진단법 개발
→ BVDV type 1a, 1b는 3 copy까지 검출하고, type 2는 30 copies의 검출 민감도 확인
→ 시판중인 Real-time RT-PCR과 비교시 A사의 경우 모든 유전형을 검출할 수 있으나 유전형 구분이 되지 않았으며, B사의 경우 2가지 유전형을 동시에 감별 가능하였음
→ 타회사 기기를 이용하여 재현성 여부를 확인한 결과 B회사 제품에서도 재현성있는 결과를 보임
- 시판중인 항원 ELISA 검사법과 유효성 평가시 민감도 96.0%, 특이도 100.0% 확인
- LAMP RT-PCR 적용을 위해 최종 primer 선정하고 유효성평가 진행함
- 면역염색법 확립: BVD 지속감염우 진단을 위해 귀조직 시료를 이용하여 면역염색을 실시하고, 모낭 및 진피층까지 바이러스 분포를 확인함

◦ 제 2세부과제명 : BVD 지속감염우 진단 효율 비교, 분석을 통한 검사법 확립
- BVDV 항원을 지속적으로 배출하는 지속감염우 시료를 확보하기 위해 1차 농가모니터링을 실시하고, 양성개체에 한해 3-4주후 재검을 실시하는 진단 시스템으로 최종 43두(국내 지속감염우 유병률은 한우 0.55%, 젖소는 1.35%로 나타남)를 확보
- 바이러스 유전형을 확인한 결과 국내에는 주로 type1b 타입이 분포하였으며, 1a, 2a 모두 존재함
- 연령별로는 1개월 미만의 허약자우 송아지부터 최대 40개월령까지 다양하게 분포함
- 성별의 경우 암컷이 대부분을 차지하고 있으나, 젖소 농가에서 수컷은 1개월령 이상이면 판매 하는 경우가 많아 성별에 따른 통계적 유의성은 없었음
- 지속감염우로 진단된 송아지를 대상으로 6개월 동안 주기적으로 시료를 채취하며 항원 검출 정도를 확인한 결과, 구강 및 비강시료의 경우 검출률이 낮아 지속감염우 진단용 시료로 적합 하지 않는 것으로 판단됨
- 시판중인 BVDV 백신을 용법 및 용량에 따라 2회 접종하고 항체가 형성여부를 확인한 결과, 2차 접종 1개월 후 부검전까지 항체는 형성되지 않았으며, 부검결과 장간막 림프절이 종대되어있는 것을 제외하고 실질장기의 특이소견은 관찰되지 않았음. 확립된 면역염색법으로 각 장기별 항원분포를 확인하였음
- 지속감염우의 다양한 검사시료(귀조직, 분변, 구강, 비강swab, 모근 등)를 이용하여 개발된 Real-time PCR에 적용한 결과 기존의 시료채취시 이용하고 있는 혈액, 귀조직 뿐만아니라 모근시료에서 평균 Ct=25로 바이러스를 검출할 수 있었음
- BVD 지속감염우 근절을 위한 효율적인 모니터링 방법으로 1차 진단시 대량 시료처리를 위해 귀조직을 이용한 항원 ELISA 방법을 적용하고, 1차 양성개체에 대해 2차 진단시 기존의 귀조직 뿐만 아니라 털(모근)을 이용하는 방법도 동등하게 검출되어 추가적인 모니터링 방법으로 제시하고자 함

(출처 : 5. 최종 연구결과 요약 1p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 5
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재 료 ... 5
• 2. 연구전략 및 방법 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 ... 6
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 15
• Ⅴ. 고 찰 ... 15
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 16
• Ⅶ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 16
• Ⅷ. 주요연구 변경사항 ... 17
• IX. 참고자료 ... 17
• 끝페이지 ... 17