초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
□ 제1, 제2 세부과제 결과
1) 토종닭 농가 및 전통시장으로부터 H9N2형 바이러스 분리 및 동정
◦ 2012년부터 2015년까지 전통시장 AI 상시예찰을 중심으로 AI 바이러스를 분리(개소수)
- 연도 : 2012년 20.5%, 2013년 19.6%, 2014년 13.6%, 2015년 25.0% 양성율
- 축종 : 주로 토종닭에서 분리되며, 토종닭과 동거사육되는 오리, 오골계 등에서 바이러스 분리
- 혈청형 : 지난 4년간 검출된 총 813건 AI 바이러스의 혈청형은 대

5. 최종 연구결과 요약
□ 제1, 제2 세부과제 결과
1) 토종닭 농가 및 전통시장으로부터 H9N2형 바이러스 분리 및 동정
◦ 2012년부터 2015년까지 전통시장 AI 상시예찰을 중심으로 AI 바이러스를 분리(개소수)
- 연도 : 2012년 20.5%, 2013년 19.6%, 2014년 13.6%, 2015년 25.0% 양성율
- 축종 : 주로 토종닭에서 분리되며, 토종닭과 동거사육되는 오리, 오골계 등에서 바이러스 분리
- 혈청형 : 지난 4년간 검출된 총 813건 AI 바이러스의 혈청형은 대부분이 H9형 (718건, 88.3%)이었으며, H6형 56건 (6.9%), H3형 18건 (2.2%), H5형 17건 (2.1%)로 나타났다
- 월별 : 전통시장에서 AI 바이러스는 계절에 관계없이 연중 지속적으로 검출
- 지역별 : 경기, 경남북, 충남북, 전남북에서 꾸준히 검출되며 2015년의 특징적인 점은 광주, 대구, 부산, 울산 등 대도시에서의 양성율이 높다는 점임

2) 국내 유행 H9N2형 바이러스의 유전자 변이에 대한 분석
- 최근 H9N2 분리주와 백신주(01310)와의 유전적 변이를 비교했을 때, HA 유전자의 경우 약 8-9% 유전적 차이를 나타내며, 특히 polymerase 유전자의 경우 9-14%의 유전적 차이를 보임
- 최근 유행 H9N2 바이러스의 계통학적 근연관계 분석결과 H9N2 바이러스 HA 유전자의 경우 우리나라 1996년 최초분리주가 point mutation을 통한 점진적인 변이가 일어나고 있는 것으로 나타났으며, 분리주 모두 Y439 바이러스에 속하는 것으로 나타남
- 반면, 대부분의 NA 유전자는 우리나라 야생조류의 H9N2 바이러스(2009-2011) 및 오리유래 H6N2 바이러스(2012-2013)와 유전적으로 재조합된 바이러스로 확인됨
- 내부유전자의 경우 NP 유전자는 우리나라 MS96 바이러스로부터 점진적인 변이가 일어나고 있는 것으로 나타난 반면, 나머지 PB2, PB1, PA, M, NS 내부유전자는 우리나라 야생조류 유래의 다양한 인플루엔자 바이러스(H1/H3/H4/H5/H6/H7/H9/H11)와 재조합된 바이러스로 확인됨

3) H9N2형 바이러스의 유전형 분석
- 최근 유행하고 있는 우리나라 H9N2 바이러스는 8개의 유전형(I-VIII)으로 유전적 다양성을 보였으며, 주요 유전형 I의 경우 HA, NP는 MS96, PB2, NA는 우리나라 오리유래 H6, 나머지 유전자는 야생조류유래 바이러스로 구성되어 있음

4) Cartography 분석방법에 의한 국내유행 H9N2 바이러스의 항원적 변이 분석
- 연도별로 28주의 바이러스에 대해 항혈청 생산을 하여 Cartography 분석방법에 의해 항원성을 분석한 결과 amino acid 근연관계 분석과 일치하여 백신주를 기준으로 크게 Group A, B, C로 대별되었으며, 최근분리주가 속하는 Group C의 경우 점차적인 항원적 차이를 보이고 있음

5) 최신 유행 H9N2 바이러스에 대한 SPF 닭에서의 현행백신에 대한 방어능 평가
- 최신 유행 H9N2 바이러스 4주를 선발하여 5주령 SPF 닭(그룹별 11수)에 commercial 백신군(01310), pilot 백신군(LBM175/) 및 비백신 대조군으로 구분하여 방어능평가를 실시하였다.
- 현행 commercial 백신군은 비백신 대조군에 비하여 맹장편도, 인후두 및 총배설강 바이러스 배출이 통계학적으로 유의성 있게 감소한 것으로 나타났으나 바이러스 배출을 완벽히 막지는 못하는 것으로 나타남
- 또한, 최근 유행하고 있는 바이러스 1주(LBM175/14)를 선발하여 pilot 백신으로 제조하여 방어능평가를 실시한 바, 현행백신(01310)에 비해 인후두 및 총배설강에서의 바이러스 배출을 현저히 감소시키는 것으로 나타남

6) 주요 H9N2 바이러스에 대한 마우스에서의 병원성 평가
- 백신주 01310 및 최신 유행 H9N2 바이러스 11주를 선발하여 마우스에서의 병원성을 평가한 바, 모든 그룹에서 특이 임상증상이나 체중감소는 관찰되지 않았으나, 유행주 11주중 8주(72.7%)의 폐에서 바이러스 증식성이 확인됨

(출처 : 5. 최종 연구결과 요약 1p)

Abstract ▼

Since 2007, Korea has used inactivated H9N2 low pathogenic avian influenza vaccine to control the disease. Despite the long-term vaccination programs, H9N2 avian influenza viruses (AIVs) continue to persist in chicken populations, mainly in Korean native chickens of unvaccinated flocks and live bird

Since 2007, Korea has used inactivated H9N2 low pathogenic avian influenza vaccine to control the disease. Despite the long-term vaccination programs, H9N2 avian influenza viruses (AIVs) continue to persist in chicken populations, mainly in Korean native chickens of unvaccinated flocks and live bird markets. To determine the genetic characterization of H9N2 viruses, we isolated the H9N2 viruses through surveillance programs and sequenced about all eight gene segments. In phylogenetic analysis, the HA genes belonged to Y439-linege, which was gradually evolved by point-mutation from MS96. In contrast, the NA genes related to H6N2 or H3N2 in Korean domestic duck or wild bird. In internal genes, the NP genes like the HA gene were belonged to the MS96, whereas the remaining genes, PB2, PB1, PA, M and NS were genetically reassortant from various subtype AIVs of wild bird and poultry in Korea.
In addtion, we evaluated the protective efficacy of a commercial vaccine (01310), pilot vaccine (LBM175/15), and unvaccinated group against recently circulating H9N2 AIVs in SPF chickens. Challenge experiments using four H9N2 isolates indicated a commercial vaccine did not prevent completely viral shedding in both oropharynx, cloaca and cecal tonsil although it covers the scope of vaccine efficacy against recently circulating H9N2 isolates. Unlike the other viruses, A/Korean native chicken/Kr/LBM211/2015(H9N2) replicated in cecal tonsils of one among eight chickens in commercial vaccine groups. Our study has demonstrated that the Korean H9N2 virus in live bird markets have circulated continually with genetic reassortment. Our findings emphasize the need to expand influenza surveillance in poultry, especially live bird market. In addtion, we should regularly evaluate the vaccine protection efficacy and consider updating the vaccine strains.

(출처 : X. 영문초록 26p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• Ⅰ. 연구개발 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표와 내용 ... 4
• II. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재료 ... 5
• 2. 연구방법 및 전략 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 및 고찰 (제1, 제2 세부과제) ... 6
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 21
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 23
• Ⅶ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 24
• Ⅷ. 주요연구 변경사항 ... 24
• IX. 참고자료 ... 24
• X. 영문초록 ... 26
• 끝페이지 ... 26