보고서 정보
주관연구기관 |
대전대학교 Daejeon University |
연구책임자 |
김승형
|
참여연구자 |
양원경
,
구현오
,
백동철
,
김민진
,
박예린
,
박예람
,
이희원
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2020-12 |
과제시작연도 |
2020 |
주관부처 |
과학기술정보통신부 Ministry of Science and ICT |
과제관리전문기관 |
한국생명공학연구원 Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology |
등록번호 |
TRKO202100000105 |
과제고유번호 |
1711125216 |
사업명 |
한국생명공학연구원연구운영비지원(R&D)(주요사업비) |
DB 구축일자 |
2021-05-22
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키워드 |
비만.고지방사료 비만 유도.실험동물.천연복합물.면역형광염색.Obesity.Diet-induced obesity.Animal model.natural products complex.Immune histology fluorescent.
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초록
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○ 연구의 목적 및 내용
○ 표준화된 천연물복합소재의 세포수준에서 검증된 항비만 효과에 대한 최적 임계점 함량비를 적용한 비만개선 천연복합소재에 대한 시너지효과를 확인하기 위해, 비만동물모델을 이용한 체지방 감소 효능을 평가하고자함.
○ 60% HFD로 C57bl/6J에 고지방 식이 비만 (DIO)유도 유발 동물모델
○ C57bl/6J 고지방 식이 비만 (DIO) 유발 생쥐의 체중 및 식이섭취량
○ 항비만 천연물소재의 복합물 및 매일 1회 12주간 경구투여
○ C57bl/6J 고지방 식이 비만 (DIO)
○ 연구의 목적 및 내용
○ 표준화된 천연물복합소재의 세포수준에서 검증된 항비만 효과에 대한 최적 임계점 함량비를 적용한 비만개선 천연복합소재에 대한 시너지효과를 확인하기 위해, 비만동물모델을 이용한 체지방 감소 효능을 평가하고자함.
○ 60% HFD로 C57bl/6J에 고지방 식이 비만 (DIO)유도 유발 동물모델
○ C57bl/6J 고지방 식이 비만 (DIO) 유발 생쥐의 체중 및 식이섭취량
○ 항비만 천연물소재의 복합물 및 매일 1회 12주간 경구투여
○ C57bl/6J 고지방 식이 비만 (DIO) 유발 생쥐의 ELISA kit 이용한 혈중 렙틴 (leptin), 인슐린 (insulin), 아디포넥틴 (Adiponectin) 측정
○ 측정: 체중, 식이량, VO2 또는 cold exposure-시간별 직장체온변화, 근력 평가
-장기적출, 무게 측정: liver, WAT 부위별, BAT, skeletal muscle
-혈액 생화학분석: AST, ALT, BUN, creatinine, TC, TG, LDL, HDL, glucose
-H&E 조직염색: WAT(epididymal, inguinal)
-Oil red O 염색: liver
-liver: TC, TG, HMG coA-reductase 활성(콜레스테콜 합성 주 인자)
○ 지방대사 관련 마커 분석
- 조직: inguinal WAT, epididymal WAT, liver
- realtime PCR: PPAR-g, CEBP/a, ap2,등 유전자 (liver: SREBP1c, ATGL 등)
- western blot 또는 IHC; p-AMPK, p-ACC, CPT1
○ WAT browning, 열발생 관련 마커 분석
- 조직: epididymal WAT, inguinal WAT
- IHC: UCP-1 또는 immunofluorescence UCP1, CPT1 (DPI, merge)
- realtime PCR: PPARg, UCP1, Pgc1a, Cpt1b, PRDM16, Sirt1, Cidea
- IHC: p-AMPK
○ 에너지소비, 열발생 관련 마커 분석
- 조직: BAT , IHC: UCP1
- realtime PCR: PGC1a, UCP1, PRDM16, CPT1b, cidea, CYTO-C, FATP1,
- western blot 또는 IHC: p-AMPK
○ 연구개발성과
○ DIO 마우스 모델에서 추출물(ES), 단일화합물 (NMRC-336), 천연복합물(GA+ES,GA+NMRC-336)에 대한 항비만 효능 확인.
○ 간에 침착된 TG지방함량에서는 단일 추출물 (GA) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+NMRC-336)에서 감소되는 시너지효과가 나타남.
○ 당부하검사(OGTT)를 위한 혈당측정에서는 단일 추출물 (GA) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+NMRC-336)에서 감소되는 시너지효과가 나타나 혈당조절에도 효능확인.
○ 혈청중 지질생화학적 (lipid profile)분석을 위한 지질생화학측정 결과에서는 단일 추출물 (GA & ES) 투여보다도 천연복합소재 (GA+ES)에서 감소되는 시너지효과가 나타남.
○ 혈청 내 에너지 대사 조절 바이오마커인 adiponectin 생산량 측정에서는 단일 추출물 (GA) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+NMRC-336)에서 증가되는 시너지효과가 나타남.
○ 지방세포 분화관련 유전자인 Leptin, PPAR-γ, FAS, SREBP1c/ADD1, 그리고 C/EBPαmRNA 유전자 발현을 분석에서는 단일 추출물 (GA, ES) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+ES, GA+NMRC-336)에서 감소되는 시너지효과가 나타남.
○ 지방산화관련 유전자인 PPAR-α, Adiponectin, 그리고 UCP-2 mRNA 유전자 발현을 분석에서는 단일 추출물 (GA, ES) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+ES, GA+NMRC-336)에서 중가되는 시너지효과가 나타남.
○ 사타구니 피하지방 (Inguinal subcutaneous fat)조직에서의 IHF면역형광염색을 통한 UCP-1와 PGC-1α, 그리고 p-AMPK/AMPK 단백질 발현질 발현 분석에서는 단일 추출물 (GA, ES) 및 단일화합물 (NMRC-336) 투여보다도 천연복합소재 (GA+ES, GA+NMRC-336)에서 증가되는 시너지효과가 나타남.
○ 연구개발성과의활용계획
○ 천연소재 발굴 탐색을 구축함으로써 항비만 의약품개발 연구의 활성화에 기여.
○ 분자기전에 기초한 표적분자 발굴 시험을 통한 항비만질환을 예방하거나 억제할 수 있는 의약품 소재개발에 관련 기술을 응용하여 치료제 개발에 근거자료 활용.
○ 본 연구를 통해 얻어진 항비만질환 개선제 탐색 및 기전연구로 우수한 약효를 갖는 천연 물질을 발굴하여 산업화에 기여.
(출처 : 요약서(초록) 3p)
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 제출문 ... 2
- 보고서 요약서 ... 3
- 요약문 ... 5
- 목차 ... 10
- 1. 연구개발 과제의 개요 ... 11
- 가. 연구개발의 필요성 ... 11
- 나. 연구개발의 목표 및 내용 ... 12
- 2. 연구수행내용 및 성과 ... 14
- 가. 연구 개발의 추진전략․방법 및 추진체계 ... 14
- 나. 연구 결과 ... 25
- 3. 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 ... 58
- 3-1. 목표 ... 58
- 3-2. 목표 달성여부 ... 58
- 3-3. 목표 미달성 시 원인(사유) 및 차후대책(후속연구의 필요성 등) ... 58
- 4. 연구개발성과의 활용 계획 등 ... 58
- 붙임. 참고문헌 ... 59
- 끝페이지 ... 61
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