초록 ▼

이 연구에서는 패류 중 아자스필산 3종에 대한 LC-MS/MS 시험법을 마련하고 실태조사를 수행하였다. 전처리 방법과 질량분석 조건의 검토 및 최적화를 통해 패류 중 아자스필산 시험법을 확립하였다. 100% 메탄올로 시료를 추출하고, Strata-X SPE 카트리지를 사용하여 정제하였으며,C18 컬럼(150 mm × 2.1 mm, 3 μm)을 사용하여 LC-MS/MS로 분석하였다. 유효성 검증은 AOAC 가이드라인에 따라 검량선의 선형성 및 회수율 실험을 통해 정확성 및 정밀성 등을 검증하였다. 검량선의 상관계수(R²

이 연구에서는 패류 중 아자스필산 3종에 대한 LC-MS/MS 시험법을 마련하고 실태조사를 수행하였다. 전처리 방법과 질량분석 조건의 검토 및 최적화를 통해 패류 중 아자스필산 시험법을 확립하였다. 100% 메탄올로 시료를 추출하고, Strata-X SPE 카트리지를 사용하여 정제하였으며,C18 컬럼(150 mm × 2.1 mm, 3 μm)을 사용하여 LC-MS/MS로 분석하였다. 유효성 검증은 AOAC 가이드라인에 따라 검량선의 선형성 및 회수율 실험을 통해 정확성 및 정밀성 등을 검증하였다. 검량선의 상관계수(R²)는 0.99 이상으로 나타나 직선성이 양호한 것으로 확인되었다. 회수율은 전체적으로는 71.5∼92.0%로 나타났고, AZA1의 회수율은 76.1∼86.4% 였으며, AZA2는 83.3∼92.0% 였으며, AZA3은 71.5∼81.8% 으로 나타났다. 또한, 일간 정밀도(RSDr)는 AZA1은 0.98∼3.85%, AZA2는 6.05∼8.86%, AZA3은 2.46∼2.77%로 나타나 유효성 검증 결과 AOAC 가이드라인을 충족하였다. 시료 중 AZA1의 검출한계와 정량한계는 각각 0.18 및 0.57 μg/kg, AZA2는 각각 0.15 및 0.48 μg/kg, AZA3은 각각 0.16 및 0.52 μg/kg이었다. 본 연구에서 개발한 패류 중 아자스필산 시험법은 분석기준에 적합함을 확인할 수 있었다. 개발된 시험법으로 총 14품목 237건의 국내 유통 패류에 대한 아자스필산오염도를 조사 하였다. 이 중 5품목 7건에서 검출되어 2.9%의 검출률을 보였다. 검출독소는 모두 AZA2로 검출량은 0.563∼0.997 μg/kg이었으며 이를 AZA1 eqpuivalents로 환산하면 1.01∼1.79 μg/kg의 수준으로 확인되었다. 수산물(이매패류) 중 아자스필산 오염도 조사결과와 국민건강영양조사자료(6-7기)의 극단(95th) 섭취량 자료를 참고로 급성노출량에 대한 위해도를 결정하였다. 또한, EFSA에서 제시한 아자스필산의 급성독성참고치 0.2 AZA1 equivalents μg/kg b.w/day를 근거로 인체노출안전기준으로 활용하였다. 검출이 가장 높은 굴의 경우 전체 연령의 급성노출량은 1.63×10^-4 μg/kg b.w/day 이였으며, 위해도는 0.0813%이였다. 현재의 아자스필산의 위해도는 인체노출안전기준 대비 인체위해 우려 수준은 없다.

(출처 : 국문 요약문 3p)

Abstract ▼

An analytical method using liquid chromatography-tandem mass spectrometry has been developed for the determination of azaspiracids in shellfish. In this study, we have developed an accurate and sensitive LC-MS/MS method for the analysis of the azaspiracids, including AZA1, AZA2 and AZA3, in shellfis

An analytical method using liquid chromatography-tandem mass spectrometry has been developed for the determination of azaspiracids in shellfish. In this study, we have developed an accurate and sensitive LC-MS/MS method for the analysis of the azaspiracids, including AZA1, AZA2 and AZA3, in shellfish. The developed method was validated according to the requirements of AOAC guideline.
The correlation coefficients (R²) of calibration curves were determined to over 0.99 The repeatability and accuracy of analytical methods were determined to 71.5∼92%, 0.98∼8.86%. The values of LOD and LOQ for AZA1, were respectively 0.18, 0.57 μg/kg, for AZA2 0.15, 0.48 μg/kg, for AZA3 0.16, 0.52 μg/kg. These results were satisfied with AOAC guideline and proposed method was sucessfully applied to the determination of azaspiracids in shellfish.
A total of 237 samples were analysed for azaspiracids(AZA) detection, comprising 14 food categories. AZAs from 7 samples comprising 5 food categories were finally detected as follows : oyster(2), cockle(1), clam(1), penshell(1), mussel(2).
AZA acute exposure assessment via intake of shellfish were calculated using 95^th food consumption data for Korean population(KNHANES 6-7) and the measurements of AZAs in shellfish. Risk likelihood were performed as a way to characterize risk by compared with Acute Reference Dose(ARfD), 0.2 AZA1 equivalents μg/kg b.w/day by the European Food Safety Authority(EFSA). The AZA acute exposures of oyster through usual intake were 1.63×10^-4μg/kg b.w/day ans the risk likelihood(%) for general population were 0.0813%. These results from this study suggest no concern of harm to human body through intake.

(출처 : Summary 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목차 ... 5
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 7
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 8
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 9
• 제1절 연구현황 ... 9
• 1. 해양생물독소의 종류와 특성 ... 9
• 2. 아자스필산(Azaspiracid) 개요 ... 12
• 3. 아자스필산 시험법 ... 24
• 제2절 국내·외 아자스필산 관리 동향 ... 31
• 1. 국가별 관리현황 ... 31
• 2. 기후변화에 따른 해양생물독소 안전관리 ... 33
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 35
• 제1절 아자스필산 시험법 개발 및 확립 ... 35
• 1. 시험법 개발 ... 35
• 2. 시험법 확립 ... 44
• 3. 수산물(이매패류) 중 아자스필산 시험법 유효성 검증 ... 52
• 제2절 아자스필산 오염도 조사 ... 61
• 1. 대표 품목 선정 ... 61
• 2. 검체 수거 ... 62
• 3. 유통 수산물(이매패류) 중 아자스필산 오염도 결과 ... 64
• 제3절 유통 수산물(이매패류) 중 아자스필산 위해평가 ... 73
• 1. 섭취량 산출 ... 73
• 2. 노출량 평가 ... 74
• 3. 위해도 결정 ... 76
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 77
• 제1절 LC-MS/MS를 이용한 아자스필산 시험법 확립 및 유효성 검증 ... 77
• 제2절 유통 수산물 중 아자스필산 위해수준 평가 ... 77
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 79
• 제1절 목표 달성도 ... 79
• 제2절 관련분야에의 기여도 ... 80
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 81
• 제1절 연구성과 및 활용계획 ... 81
• 제7장 참고문헌 ... 82
• 제8장 첨부서류 ... 92
• 끝페이지 ... 93