초록 ▼

□연구개요
- 폐암의 재발 및 전이에 영향을 미치는 종양 미세환경 (Tumor microenvironment) 에서 상피-중배엽세포 전이 (EMT; Epithelial-Mesenchymal Transition)는 상피세포가 전이 및 침윤 능력을 가지는 세포로 변화는 과정으로, 이러한 EMT 는 척추동물과 무척추동물의 배아 발생 기간외에 성인의 상처 치유 과정 및 암의 생성 및 진행과정에서도 밀접하게 관련되어 있음이 알려져 있다. 특히 암세포의 약 90% 정도가 EMT와 관련되어 있으며, EMT는 세포의 형태학적 변형을 통해 주

□연구개요
- 폐암의 재발 및 전이에 영향을 미치는 종양 미세환경 (Tumor microenvironment) 에서 상피-중배엽세포 전이 (EMT; Epithelial-Mesenchymal Transition)는 상피세포가 전이 및 침윤 능력을 가지는 세포로 변화는 과정으로, 이러한 EMT 는 척추동물과 무척추동물의 배아 발생 기간외에 성인의 상처 치유 과정 및 암의 생성 및 진행과정에서도 밀접하게 관련되어 있음이 알려져 있다. 특히 암세포의 약 90% 정도가 EMT와 관련되어 있으며, EMT는 세포의 형태학적 변형을 통해 주변조직으로의 전이 및 침윤 능력 증가, 세포사멸에 대한 저항성, extracellular matrix (ECM) 의 생성 증가 등을 야기하여 암세포의 생존능력을 향상시키는 원인 중의 하나로 확인되었다.
- 본 연구에서는 사망률 및 재발률이 높은 비소세포성 폐선암종의 생장, 타 기관으로의 전이 및 침윤과 연관되어 있는 종양 미세환경에서의 상피-중배엽세포 전이 (EMT)를 억제할 수 있는 치료 후보물질의 발굴, 특히 Traf2- (TNF receptor associated factor 2) and Nck-interacting kinase (TNIK) (이하 TNIK)를 신규 항암 표적으로 한 화합물의 발굴을 통해 폐선암종의 전이 및 침윤을 억제하여 폐암의 재발과 치료 부작용을 최소화 하고 기존 폐암 치료제와의 병용투여가 가능하도록 하는 것을 목표로 한다.

□연구 목표대비 연구결과
(1) 1차년도(2017-2018) : 비소세포성폐선암종세포 에서 TNIK 발현 확인 및 Target Validation
♦ 비소세포성폐선암종의 TNIK 발현 및 TGF-beta1-유도 EMT 모델을 폐암 세포주A549 를 통해 확립 및 Reference 화합물인 TNIK inhibitor (KY-05009)및 siRNA 등을 이용한 Target validation 결과 TNIK의 expression 억제에 따른 비소세포성 폐선암종세포의 사멸 및 EMT 억제와 연관성이 있음을 확인 완료
(2) 2차년도(2018-2019) : Drug repositioning을 통한 최적 TNIK저해제의 도출 및 폐선암종의 EMT 억제 확인
♦ TGF-β1 유도 상피-중배엽세포 전이 (EMT) 억제 효과를 나타내는 TNIK inhibitor를 선별하기 위해 소분자 화합물 (Tyrosine kinase inhibitors), 천연물 유래 소분자 화합물, 펩타이드 등을 96-well plate format을 통해 in vitro TNIK kinase activity screening 완료
♦ TNIK kinase activity 의 억제 효과를 보이는 소분자화합물 및 펩타이드 등을 선별하여 A549 세포 생장억제효과 및 EMT 억제 효과여부 확인 완료
(3) 3차년도(2019-2020) : 선별된 화합물의 폐선암종세포의 전이 및 침윤 억제효과 검증, 병용투여 효과 확인
♦ TGF-β1-유도 EMT 를 억제하는 소분자 화합물 (sunitinib) 을 drug repositioning 을 활용하여 선별하였고, 펩타이드인 cRGDfK 를 선별하여 병용투여시 EMT 억제효과를 상승시키는것을 확인하였음.

□연구개발결과의 중요성
본 연구는 TNIK 발현 억제와 비소세포성폐암의 전이 및 EMT 와의 관계를 분석하여 향후 적합한 치료제 탐색기술 개발 및 진단용 Screening kit 개발에 유용한 정보의 제공이 가능하다.
또한, 치료제 발굴에 소요되는 비용 및 시간을 “신약재창출” 기술을 활용함으로써 절약할 수 있어 경제적, 산업적으로 적합한 새로운 신약개발과정의 개발이 가능할 것으로 생각된다.
아직까지 사망율이 높은 폐암으로 인한 의료분야 사회적 비용 절감 및 전이 억제를 통한 치료 가능성의 확대를 기대할 수 있다.
본 연구결과를 바탕으로 펩타이드를 활용한 폐암 전이 치료제에 대한 개발 및 이에 대한 관심이 증가할 것으로 생각된다.

(출처 : 요 약 문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1-1. 연구의 목표 ... 4
• 1-2. 연구의 필요성 ... 4
• 1-3. 항암표적으로서의 TNIK ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 5
• 1) 비소세포성 폐선암종 세포주 선정 및 target validation ... 5
• 2) TNIK 발현 억제를 통한 TGF-β1 유도 상피-중배엽세포 전이 (EMT) 억제 효과 검증 ... 6
• 3) Drug repositioning 에 활용가능한 화합물 선별을 위한 TNIK kinase assay screening ... 7
• 4) TNIK Kinase activity 억제효과를 보이는 소분자 화합물의 A549 세포생장 억제 효과 ... 7
• 5) 비소세포성 폐선암종 (NSCLC) 환자 검체 및 세포주에서의 TNIK 발현 여부 확인 ... 8
• 6) 선별된 화합물의 TNIK kinase activity 억제 및 NSCLC 세포주의 생장 억제 확인 ... 8
• 8) TNIK kinase inhibitor (sunitinib) 와 Integrin antagonist cyclic peptide 의 EMT 억제 효과 ... 9
• 9) NSCLC 세포주에서의 sunitinib 및 cRGDfK의 병용투여를 통한 EMT억제 상승효과 확인 ... 10
• 10) Sunitinib 및 cRGDfK의 병용투여를 통한 세포침윤 (invasion) 억제 상승 효과 확인 ... 10
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 11
• 4. 참고문헌 ... 11
• 5. 연구성과 ... 13
• 끝페이지 ... 15