초록 ▼

□ 연구개요
암 치료기술의 발전에도 불구하고 여전히 치료 효과를 얻지 못 하는 난치성 암 환자들이 많이 있음. 특정 치료법에 대해 저항성을 나타내는 난치성 암 환자를 위한 신개념 아데노 연관바이러스파이지 (adeno-associated virus phage, AAVP) 치료제 개발을 궁극적 목표로 하여, 본 연구에서는 “생체 내 암 조직을 표적하는 펩타이드를 가진 M13 phage”와 “해당 암 세포에 대해 살생 능력을 나타내는 shRNA를 발현하는 아데노연관바이러스 (adeno-associated virus, AAV)”를 융

□ 연구개요
암 치료기술의 발전에도 불구하고 여전히 치료 효과를 얻지 못 하는 난치성 암 환자들이 많이 있음. 특정 치료법에 대해 저항성을 나타내는 난치성 암 환자를 위한 신개념 아데노 연관바이러스파이지 (adeno-associated virus phage, AAVP) 치료제 개발을 궁극적 목표로 하여, 본 연구에서는 “생체 내 암 조직을 표적하는 펩타이드를 가진 M13 phage”와 “해당 암 세포에 대해 살생 능력을 나타내는 shRNA를 발현하는 아데노연관바이러스 (adeno-associated virus, AAV)”를 융합한 “AAVP 치료제 제조 및 개발 기술기반을 구축” 하고자 하였음. 본 연구의 성공적인 수행으로 “생체 내 종양을 능동적으로 인식하고 표적하여, 방사선치료 효과 증진용 shRNA를 암 조직에 전달하는 AAVP"를 제조하였으며, in vitro, in vivo 효능 평가 실험들을 통하여 방사선치료 효능 증진 효능을 확인하였음. 본 연구를 통하여 능동적 유전자전달체로서 AAVP 제조 기법 완성 및 유전자 치료제 개발 기반을 구축하였으며, 확보된 기술과 노하우는 향후 난치성 암 환자 개인맞춤형 AAVP 치료제 개발에 활용될 수 있음.

□ 연구 목표대비 연구결과
■ 1차년도 : 난치성 암 극복용 AAVP 제조 기술 및 표적지향 M13 phage 확보
1. 표적지향형 AAVP 제조 기술 확보
- A549 표적 M13 phage (선행연구 성과물) DNA 추출 및 조작
- shLuciferase 발현 AAV 벡터 제조 및 조작
- A549 표적 M13 phage와 shLuciferase 발현 AAV 융합
2. 방사선치료 내성 암 치료용 AAVP 제조 위한 표적 펩타이드 선정
- 방사선치료 내성환자 암조직에 결합하는 펩타이드 표지 M13 phage(선행연구 성과물)제조
- 펩타이드 표지 M13 phage 상대결합단백질 규명
- 병원 임상정보, 임상시료 활용한 결합상대단백질의 저항성 관련성 검증

■ 2차년도 : 난치암 극복용 AAVP 선도물질 확보
1. 방사선치료 내성 극복 shRNA 선정
- 방사선치료 내성 환자의 암세포 1차배양
- 방사선치료 내성 극복 shRNA screening
- 발굴 shRNA의 방사선치료 내성 극복 효능 검증
2. 방사선치료 내성 극복용 AAVP 제조
- 방사선치료 내성 극복 shRNA 발현 AAV 벡터 제조
- 방사선치료 내성암조직 표적 M13 phage와 내성 극복 표적 shRNA 발현 AAV 융합
- 제조된 AAVP의 물리화학적 특성 분석
3. 방사선치료 내성 극복용 AAVP의 in vitro 효능 확보
- 환자 암조직 1차배양 세포에서 내성 극복용 AAVP의 내성암 표적 발현 억제능 확인
- Luciferase 발현 A549 세포에서 A549 표적 AAVP-shLuciferase 효능 확인

■ 3차년도 : 난치암 극복용 AAVP 후보물질 유효성 확보
1. 방사선치료 내성 극복용 AAVP의 in vivo 효능 확보
- 방사선치료 내성 PDX 모델에서 AAVP의 in vivo 효능 평가
- 방사선치료 내성 PDX 모델에서 AAVP의 in vivo distribution 확인
- Luciferase 발현 A549 모델에서 A549 표적 AAVP-shLuciferase in vivo 효능 평가
2 예비독성 평가
- 누드마우스에서 방사선치료 내성 극복용 AAVP 투여 후 예비독성 평가
- 면역 정상 마우스에서 방사선치료 내성 극복용 AAVP 투여 후 immunogenecity 평가
- 약물투여 용량 및 용법 최적화

□ 연구개발결과의 중요성
- 지속적으로 활용 가능한 난치성 암 극복형 AAVP 치료제 개발 기술기반 확보
- 임상적용 개발단계로 즉시 진입할 수 있는 방사선치료 내성극복형 후보물질 도출
- 미충족의료수요 환자들의 완전 개인 맞춤형 치료기술 적용 패러다임 제안
- 면역항암제, 근접방사선치료제, theranostics 등으로 폭 넓은 응용 확대
- 난치성 암 완치율 상승 및 학문적 기술적 국제적 경쟁력 확보

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 가. 연구의 목표 ... 3
• 나. 연구의 필요성 ... 3
• 다. 연차별 연구 목표 및 내용 ... 5
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 6
• 가. 저항성 암 표적 지향형 AAVP 제조 기술 확보 (대조물질 AAVP 제조 포함) ... 6
• 나. 방사선치료 저항성 암 표적 AAVP 제조 위한 표적 펩타이드 선정 ... 8
• 다. 방사선치료 저항성 암 극복용 AAVP 선도물질 제조용 저항성 극복 shRNA 선정 ... 9
• 라. 방사선치료 저항성 극복용 AAVP 제조 ... 11
• 마. 방사선치료 저항성 암 극복용 AAVP 선도물질의 in vitro 효능 확보 ... 12
• 바. 방사선치료 저항성 극복용 AAVP의 in vivo 효능 평가 및 예비안전성 예측 ... 13
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 16
• 4. 참고문헌 ... 17
• 5. 연구성과 ... 17
• 끝페이지 ... 18