초록 ▼

□ 연구개요
- 패혈증(sepsis)은 감염을 통해 주로 발병하는 질병으로 중환자실(intensive care unit) 사망의 1위를 차지한다. 미국 통계에 따르면 매년 75만 명이 발병하고, 그 중 21만 명이 사망하는, 한 해 사망 원인 중 10위(전체 사망자의 6%)에 해당하며, 현재까지 특이적(specific) 치료제가 없음.
- 대식세포의 면역반응이나 활성화 조절은 패혈증 동물모델의 생존율에 큰 영향을 끼치는 매우 중요한 역할을 함.
- SPMs은 다가불포화지방산(polyunsaturated fatty a

□ 연구개요
- 패혈증(sepsis)은 감염을 통해 주로 발병하는 질병으로 중환자실(intensive care unit) 사망의 1위를 차지한다. 미국 통계에 따르면 매년 75만 명이 발병하고, 그 중 21만 명이 사망하는, 한 해 사망 원인 중 10위(전체 사망자의 6%)에 해당하며, 현재까지 특이적(specific) 치료제가 없음.
- 대식세포의 면역반응이나 활성화 조절은 패혈증 동물모델의 생존율에 큰 영향을 끼치는 매우 중요한 역할을 함.
- SPMs은 다가불포화지방산(polyunsaturated fatty acids)으로부터 생성되는, 생체 시료에서 발견된 성분으로 최근에 다양한 질병의 치료에 시도되고 있음. 뿐만 아니라 대식세포를 포함한 다양한 면역세포의 조절에 관여하는 것으로 알려져 있음.
- 본 연구에서는 대식세포(macrophages)의 활성화와 자가포식작용(autophagy)에 대한 specialized pro-resolving mediators(SPMs)의 역할을 조사하고, 이를 통해 염증성 질환을 치료 또는 제어하기 위한 새로운 기전 및 물질에 대하여 연구하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
- WT에서는 SPMs에 의하여 phagocytosis가 증가하였으나 A2b KO mouse에서는 phagocytosis에 변화가 없는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, SPMs가 GPCR인 A2b와 연관성이 있음을 추측할 수 있다.
- GPCR인 G2A와 A2b가 연관되어 있을 것이라 예상하고, Kupffer cells을 이용하여 두 receptor간 상호작용이 있음을 확인하였다. 즉, lipopolysaccharide (LPS)로 자극된 G2A KO의 대식세포에서 A2b agonist (BAY 60-6583)에 의한 세포내 cAMP농도 증가가 보이지 않았으며, 이는 BAY 60-6583의 작용에 있어서 이들 두 receptor가 밀접하게 상호 관련됨을 시사하고 있다. 또한, LPS로 자극된 A2b KO의 대식세포에서 G2A에 대한 자극제인 lysophosphatidylcholine (LPC)에 의해 농도 의존적으로 세포내 cAMP농도가 감소하고 있음을 볼 수 있다. 이는 G2A 신호전달에 있어서도, A2b가 영향을 미침을 보여준다.
- Raw cell에서는 PDX를 제외하고는 다른 SPMs에서 LC3에 대한 큰 변화를 관찰할 수 없었다. p62는 LPS 없는 조건에서 MaR 2와 PDX가 증가하는 것을 볼 수 있었으며, LPS 조건하에서는 MaR 1이 감소시키는 것을 확인할 수 있었다. 하지만 이러한 결과는 primary macrophage인 BMDM에서는 LPS가 없는 조건에서 PDX 100 nM이 p62를 증가시키는 것 외에 다른 현상을 관찰할 수 없었다. 이것은 본 실험에서 사용한 SPMs(MaR 1, MaR 2, PDX) 이 본 실험실의 조건 하에 LC3 및 p62에 크게 관여하지 않는 것으로 결론 내릴 수 있다.

□ 연구개발결과의 중요성
- HEK293 과발현 조건에서 밝힌 A2b 수용체에 대한 MaR 1, MaR 2, PDX의 작용은 이들의 SPMs의 수용체를 규명하는데 있어서 매우 중요한 단서가 될 것이며, 향후 이를 기반으로한 새로운 염증성 질환치료제 개발에 있어서 큰 기여를 할 수 있으리라 기대됨.
- 대표적인 대식세포인 Kupffer cells에서 G2A와 A2b가 세포내 cAMP 신호전달회로에 있어서 연관됨을 밝힌 것은, 패혈증의 병태생리학에 대한 이해와 더불어 치료제 개발에 있어서 매우 중요한 지견이 될 수 있다고 사료됨.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 3
• 1) SPMs의 대식세포 활성화 작용연구 ... 3
• 2) SPMs를 LPS와 병용처리한 대식세포에서의 ROS(reactive oxygen species) 조절관련성 연구 ... 4
• 3) 1차년도에서 선별된 SPMs에 대한 대식세포 활성화와 자가포식작용 조절에 관한 연구 ... 5
• 4) SPMs와 GPCR의 관계 여부에 대한 연구 ... 5
• 5) Adenosine receptor 2b와 SPMs의 자가포식작용 조절에 대한 관계를 연구 ... 7
• 6) 패혈증 모델에서 LPC 처리에 의한 혈장 및 peritoneal fluid에서의 SPMs 측정 ... 9
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 11
• 4. 참고문헌 ... 11
• 5. 연구성과 ... 11
• 끝페이지 ... 13