초록

본 연구에서는 진세노사이드 전구체 및 유도체를 생산하는 맞춤형 효모개발을 위하여, 진세노사이드 및 전구체 생합성 대사회로 전체 유전자 발현 모듈을 구축 및 효모에 도입하였으며, 대사활성 최적화를 위해 세포 내소기관 중 하나인 퍼록시좀의 조절을 통해 진세노사이드 및 아이소프레노이드 물질의 생산성 증대가 가능한 효모를 개발하였음.

(출처 : 요약서 3p)

Abstract ▼

Purpose & Contents
The purpose of this study is to redesign and reconstruct biosynthetic pathways for ginsenosides which have mitochondria-booting activity in yeast through construction of plasmid-free and specific organelle targeting systems and commercialize anti-aging, anti-diabetic functional

Purpose & Contents
The purpose of this study is to redesign and reconstruct biosynthetic pathways for ginsenosides which have mitochondria-booting activity in yeast through construction of plasmid-free and specific organelle targeting systems and commercialize anti-aging, anti-diabetic functional food using mitochondria activating ginsenosides.
The following specific topics will be carried out to fulfill the objective of this study
○ Construction of ginsenoside pathway gene expression modules and plasmid-free expression system.
· Establishment of ginsenosides pathway module with a constitutive strong promoter and construction of plasmid-free expression system.
· Quantification of ginsenosides intermediates in yeast strains with GC/MS and HPLC/MS.
○ Construction of systems of targeting ginsenosides biosynthesis enzymes into the specific organelles.
· Construction of targeting system based on peroxisome targeting signal peptide, which send ginsenosides enzymes to peroxisomes.
· Integration of modules expressing ginsenoside enzymes fused to peroxisome targeting signal (PTS1) into yeast genome.
· Peroxisome isolation and quantative analysis of ginsenosides by GC/MS and HPLC/MS.

Results
Construction of ginsenosides intermediates over-producing yeast and process.

Expected Contribution
Ginsenosides intermediate-producing microorganisms can be used as an alternative process for a existing Korean ginseng-dependent extraction process.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• Contents ... 6
• 목차 ... 7
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 8
• 1. 연구개발 목적 ... 8
• 2. 연구개발의 필요성 ... 8
• 3. 연구개발 범위 ... 9
• 제2장 연구수행내용 및 성과 ... 10
• 1. 효모내 진세노사이드 대사회로 구축 및 진세노사이드 생합성 전구체 대사회로 모듈 고도화 ... 10
• 2. 진세노사이드 생합성 유전자 및 PTS1 퓨전 유전자 모듈의 발현에 따른 중간 대사체 변화 비교 분석 ... 11
• 3. PTS1 유전자의 적용에 따른 인위적 표적화 확인 ... 13
• 4. 세포 소기관의 개체 수 증가와 PTS1에 의한 targeting 확인 ... 14
• 5. 세포 소기관의 개체 수 증가에 따른 진세노사이드 대사회로 효소들의 발현과 표적화 ... 15
• 6. 세포 소기관 대사 조절을 통한 세포 소기관 개체 수 및 크기 조절 ... 16
• 7. 세포 소기관 대사 조절을 통한 진세노사이드 중간 대사체 수율 증가 ... 17
• 8. 세포소기관 조절 효모의 성장 속도 회복 인자 확인 및 검증 ... 18
• 9. 세포 소기관 대사 조절을 통한 진세노사이드 최종 전구체 생산 변화 ... 22
• 10. 추가 세포 소기관 조절 기술의 접목에 따른 진세노사이드 전구체 생산량 변화 ... 25
• 11. 세포소기관 조절 기술이 접목된 진세노사이드 전구체 생산 효모 제작 ... 25
• 12. 세포소기관 조절 효모의 발효능 분석 및 안정성 확인 ... 28
• 13. 세포소기관 조절 효모의 시스템 수준 발현 분석 ... 35
• 14. Compound K(CK) 생산 발효 조건 확립 (사업단 추가요청) ... 48
• 15. Ginsenoside F1 생산 효모 MS-C7의 검증 ... 52
• 제3장 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 ... 60
• 1. 목표 ... 60
• 2. 목표 달성여부 ... 60
• 3. 관련분야 기여도 ... 62
• 4. 목표 미달성 시 원인(사유) 및 차후대책(후속연구의 필요성 등) ... 62
• 제4장 연구개발성과의 활용 계획 등 ... 63
• 1. 당해 연도 활용계획 ... 63
• 2. 활용방법 ... 63
• 3. 차년도 이후 활용계획 ... 63
• 제5장 연구개발성과의 보안등급 ... 64
• 제6장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 65
• 제7장 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 ... 66
• 1. 기술적 위험 요소 분석 ... 66
• 2. 안전 관리 대책 ... 66
• 제8장 연구개발과제의 대표 연구 실적 ... 69
• 제9장 기타 사항 ... 73
• 제10장 참고문헌 ... 74
• 끝페이지 ... 75