초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
CRISPR-Cas9으로 대표되는 유전자교정 기술을 이용하여 종양을 포함하는 유전질환 환자에게서 발견되는 다양한 유전자 변이의 기능을 검증 할 수 있는 시스템을 구축하고 그 유전자의 환자 유래 변이의 기능을 확인하고자 함. 이를 통해 질병의 원인을 파악하고 치료 타겟을 제시하고자 함.

○ 전체 내용
연구진은 지난 1년간 수행한 선행연구를 바탕으로 몇가지 선행연구의 한계를 확인하였음. 1) CBE로 표적할 수 있는 모호변이(VUS)의 개수가 매우 제한적임 (전체의

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
CRISPR-Cas9으로 대표되는 유전자교정 기술을 이용하여 종양을 포함하는 유전질환 환자에게서 발견되는 다양한 유전자 변이의 기능을 검증 할 수 있는 시스템을 구축하고 그 유전자의 환자 유래 변이의 기능을 확인하고자 함. 이를 통해 질병의 원인을 파악하고 치료 타겟을 제시하고자 함.

○ 전체 내용
연구진은 지난 1년간 수행한 선행연구를 바탕으로 몇가지 선행연구의 한계를 확인하였음. 1) CBE로 표적할 수 있는 모호변이(VUS)의 개수가 매우 제한적임 (전체의 약 30% 수준). 2) spCas9의 PAM인식서열인 5’-NGG-‘3의 제한으로 인해 실제 표적가능한 위치에도 한계가 있음. (CBE의 표적 중 약 30%, 전체기준 약 10%미만). 이러한 문제들을 극복하고 환자유래 변이의 기능연구를 확장하기 위해 아래와 같은 연구 추진전략을 계획함.
1) ABE을 확보하고 이를 이용한 환자유래 변이에 대한 기능 연구법을 확립함
2) 다양한 PAM을 인식하는 변이체를 이용한 CBE, ABE를 제작하고 이를 이용한 환자유래 변이에 대한 기능연구법을 확립함.
연구기간동안 상기 두 기술을 활용하여 pathogenic mutation과 benign mutation 간의 기능연구를 비교할 수 있는 근거를 확립하고, 이를 조합하여 환자유래 변이의 표적범위를 확장하는 것을 목표로 함

□ 연구개발성과
본 과제 수행을 통하여 기존의 CBE외에 ABE를 이용한 환자유래 변이에 대한 기능분석이 가능함을 확인하였으며, 다양한 PAM인식 변이체를 활용하여 표적가능한 환자유래 변이의 수를 극대화 하였음. 또한 환자유래 변이의 기능분석을 위한 분석기간, 약물에 대한 감수성, 초기 변이 효율 등에 대한 근거를 마련하여 추후 환자유래 변이분석를 효율적으로 진행할 수 있도록 하는 근거를 마련하였음.
또한 본 연구에 가장 큰 제약이었던 낮은 염기교정 효율일 극본하는 방안으로 HDAC inhibitor 처리법을 고안하였으며 최신 기술인 프라임교정기술과 이를 기반한 향상된 프라임교정기술을 개발하여 다양한 환자유래변이를 효율적으로 도입할 수 있도록 하는 근거를 마련하였음.

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
본 연구의 성과를 기반으로 환자유래 변이에 대한 맞춤형 기능 분석이 가능할 것으로 보이며 국내 의료기관에서 보고되는 다양한 환자유래 변이에 대해서 기능 분석 연구를 수행할 계획임. 또한 개발된 프라임 교정기술을 적용하여 더 다양한 변이에 대한 기능 분석이 가능함을 보이고 이를 통해 환자 맞춤형 치료법을 제안할 수 있도록 돕고자 함.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요 약 문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 5
• 1) 환자유래 변이 기능분석에 사용되는 유전자교정기술의 확장 ... 5
• 2) 염기교정기술을 이용한 BRCA1 기능 분석 근거 마련 연구 ... 5
• 3) 유전자교정기술의 효율 및 한계 극복 연구 ... 6
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 6
• 1) 연구수행 결과 ... 6
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 10
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 11
• 6. 참고문헌 ... 11
• 끝페이지 ... 12