초록 ▼

□ 연구개요
• 전신 홍반성 루푸스 (SLE) 질환은 자가면역성 T 세포의 활성을 통한 B 세포 활성과 자가항체 생산이 전신 면역조직 파괴 및 연쇄적인 질병 가속화로 이어지는 문제가 있어 이들 T/B세포의 제어 메카니즘 규명이 질환에서 매우 중요함.
• 본 연구에서는 이러한 루푸스 병적 T세포와 B세포를 동시에 타깃팅하기 위해 STAT3 억제를 이용한 병인 조절 효과를 규명하고자 함. PIAS3 는 생체 분자로서 STAT3 전사인자의 활성을 억제하는것이 알려져 있음. 따라서 루푸스 동물모델과 세포수준에서 PIAS3 를 이

□ 연구개요
• 전신 홍반성 루푸스 (SLE) 질환은 자가면역성 T 세포의 활성을 통한 B 세포 활성과 자가항체 생산이 전신 면역조직 파괴 및 연쇄적인 질병 가속화로 이어지는 문제가 있어 이들 T/B세포의 제어 메카니즘 규명이 질환에서 매우 중요함.
• 본 연구에서는 이러한 루푸스 병적 T세포와 B세포를 동시에 타깃팅하기 위해 STAT3 억제를 이용한 병인 조절 효과를 규명하고자 함. PIAS3 는 생체 분자로서 STAT3 전사인자의 활성을 억제하는것이 알려져 있음. 따라서 루푸스 동물모델과 세포수준에서 PIAS3 를 이용한 질환 제어 효력과 그 분자적 메커니즘을 규명하고자함. 또한 PIAS3에 의해서 활성 조절되는 병인-조절 세포의 동시 조절을 통한 세포 항상성이 조절되는지에 대한 연구를 진행하고자함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1년차: PIAS3의 타깃 분자 스크리닝 및 루푸스 병인 T, B 세포의 활성 제어 메커니즘 조사
▪ PIAS3 과발현 벡터 제작 및 이를 이용한 루푸스 질환 (Roquin^san/san) 동물 모델의 면역 세포 내 의한 Th17 세포 활성 제어 및 Treg 세포 활성 변화 확인
▪ PIAS3에 의한 Th17 세포 활성 인자 Ahr, Runx1 및 세포 이동 인자 CCR6 발현저해 관찰
▪ P1-112-128:QPVHPDVTMKPLPFYEV, P2-123-139:LPFYEVYGELIRPTTLA, P3-134-150:RPTTLASTSSQRFEEA, P4-145-160:RFEEAHFTFALTPQ 제작
▪ PIAS3 PINIT domain mutant peptide P3 의 루푸스 면역 B 세포 내 IL-6 염증성 사이토카인 발현제어 및 IL-17 프로모터 활성 저해 확인

2년차: 루푸스 동물 모델에서 PIAS3의 질병제어 효력 조사(in vivo)
▪ MRL-lpr/lpr 루푸스 모델의 확립
▪ MRL-lpr/lpr 루푸스 동물 내 PIAS3 peptide 2 및 3에 신장내의 Lupus nephritis수 ,크기 감소, 크레아틴, 알부민 감소 확인 및 신장 조직 내 IL-17, IL-6, pSTAT3 727 활성 제어 확인. SMAD3 활성 변화는 보이지 않음
▪ Roquin^san/san 루푸스 동물 모델 내 PIAS3 과 발현을 통한 GC 및 plasma B 세포, mature B 세포 및 Th17 세포 활성 제어 확인
▪ 비장 조직 내 Tfh, pSTAT3 발현 저하 및 IL-17을 발현하는 B 세포 활성 제어 확인
▪ Roquin^san/san IL-17 DKO 마우스 모델 구축과 Roquin^san/san 모델에서 IL-17 활성 제어에 따른 조절기능 Treg, Breg 세포 활성 루푸스 질환 제어 확인

3년차: 루푸스 환자에서 PIAS3의 타깃 분자 검증 및 루푸스 질병 T, B 세포의 병인 활성 제어 조사
▪ 정상 PBMC 내 PIAS3에 의한 병인-조절 세포 활성 변화
▪ PIAS3 siRNA를 이용한 PIAS3 차단에 의해서 사람 면역 세포 내 IL-17의 발현이 증가됨을 확인함.
▪ 환자의 면역 세포내 Th17 세포의 활성 조건하 PIAS3 단백질이 Th17 세포 활성을 억제하고 Treg 세포의 활성 을 유도할 수 있는지 관찰

□ 연구개발결과의 중요성
▪ 본 연구를 통해서 MRL/lpr 및 Roquin^san/san 마우스 PIAS3 peptide 질환 제어 효력 및 타깃 신장 조직 내 염증 인자 및 pSTAT3 727 제어 가능성을 확인하였으며, Tfh 세포 및 plasma B 세포 과 발현루푸스 동물 모델 내 STAT3 활성 및 IL-17의 직접적인 병인 반응임을 규명함.
▪ 또한 루푸스 모델 내 Breg 및 IL-17 발현 B 세포가 존재하며, 이들의 면역 발란스 조절이 필요함을 제시하였으며, PIAS3를 이용한 질환 및 병인 세포 활성 조절에서, SAMD3 및 SUMO 단백질 조절 보다는 STAT3 인산화 형태를 차단함으로써 STAT3 활성 매개 Th17 및 B17 세포를 제어 할 수 있음을 제시.
▪ 따라서 루푸스 질환에서 PIAS3는 병인-조절 세포의 면역 발란스의 조절이 질환 활성을 조절 할 수 있으며, 세포 면역 항상성을 조절한 면역 조절개념의 루푸스 치료제 개발에 발판이 될 수 있음.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1-1. 연구개발 배경 및 목표 ... 4
• 1-2. 연구개발 개요 요약 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 5
• 2-1.연구 결과 요약 ... 5
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 19
• 4. 참고문헌 ... 19
• 5. 연구성과 ... 20
• 대표적 연구실적 ... 24
• 끝페이지 ... 39