초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
SFTS(중증열성혈소판감소증) 항체 기반 신속∙진단 진단제 개발을 위한 특이 진단 바이러스 항원 발굴∙유용성 검증 및 ELISA 기반의 SFTS 혈청학적 진단제 개발(시제품 제작 1건) 및 SFTS 임상 검체를 이용한 효능 평가(공인시험 인증기관인 한국기계전기전자시험연구원에 시험의뢰(시험 성적서))

□ 연구개발성과
○ SFTS 혈청학적 진단제 개발 및 효능 평가(시제품 제작 1건)
- SFTS 특이 진단 바이러스 항원(바이오 마커) 발굴 및 유용성 검증 및 효능평가
- 효능

□ 연구의 목적 및 내용
SFTS(중증열성혈소판감소증) 항체 기반 신속∙진단 진단제 개발을 위한 특이 진단 바이러스 항원 발굴∙유용성 검증 및 ELISA 기반의 SFTS 혈청학적 진단제 개발(시제품 제작 1건) 및 SFTS 임상 검체를 이용한 효능 평가(공인시험 인증기관인 한국기계전기전자시험연구원에 시험의뢰(시험 성적서))

□ 연구개발성과
○ SFTS 혈청학적 진단제 개발 및 효능 평가(시제품 제작 1건)
- SFTS 특이 진단 바이러스 항원(바이오 마커) 발굴 및 유용성 검증 및 효능평가
- 효능 검증이 확인된 특이 진단 바이러스 항원을 이용 SFTS 혈청학적 진단제 개발 및 시제품 제작(1건)
○ 면역단백체학기술을 이용하여 환자의 혈액에서 특이 항원 발굴 및 유효성 검증
- SFTS 감염 환자의 혈액에서 항체(IgM, IgG)와 결합하는 SFTS 바이러스 항원 단백질을 면역 단백체 기법으로 동정∙발굴(체액성 면역 항원)
- SFTS 감염 환자의 혈액의 PBMC(항원제시세포)에 의해 processe되어 MHC Class I에 제시된 SFTS 바이러스 항원(펩타이드)을 면역 단백체 기법으로 동정∙발굴(세포성 면역 항원)
- 체액성 면역과 세포성 면역으로 발굴된 항원 중 진단으로 우수한 최종 항원 선별
- 선별된 항원의 SFTS 환자검체를 이용 임상적 유용성을 검증
○ 바이러스 항원 검출을 위한 진단 플랫폼 개발
- 발굴된 항원을 활용하여 진단 플랫폼으로 개발(항체 개발이 어려운 경우, MS 기반의 MRM kit 형식으로 개발)
○ 제작한 시제품에 대한 임상적 유용성 평가 실시(공인시험 인증기관인 한국기계전기전자시험연구원에 시험의뢰 및 시험성적서)
○ SFTS 임상경과에 따른 항체(IgM, IgG) 및 바이러스 역가 분석을 통한 개발 혈청학적 진단제 사용 가능 시점 확인
- 항체는 감염 후 증상 발생 2-3주 지나야지 양성으로 확인(IgM의 초기 양성률이 다른 바이러스 감염병에 비해서 낮음)
- 따라서 항체 탐지 혈청학적 진단제는 발병 초기보다 증상 발현 후 10-14일이 지난 시점에 사용이 적합(10-14일 이후는 RT-PCR이 음성이 나올 수 있어 개발 혈청학적 진단제를 이용한 진단이 유리함)

□ 연구개발성과의 활용계획 (기대효과)
○ SFTS 환자 항체 진단에서 기존의 면역형광법(IFA) 대체 가능: 고위험 병원체인 SFTS 바이러스를 직접 사용하지 않고 또한 형광현미경 장비가 필요하지 않은 진단법으로 항체 진단의 편의성이 증가 되었음
○ 많은 환자 검체에 대해서 동시 진단 가능: 특이적인 진단 재조합 항원이 코팅되어 있는 하나의 플레이트를 사용하여 한번에 44개의 환자 검체에 대하여 항체(IgM, IgG)를 진단 할 수 있음(감염 후 생성된 항체에 대한 신속∙정확한 진단이 가능)
○ 원재료 국산화와 원가절감: 매년 증가하고 있는 SFTS 환자에 대해서 항체(IgM, IgG)를 진단할 수 있는 ELISA 진단키트의 원재료 국산화가 가능함(3세부 주관 기관인 ㈜보레다바이오텍: 체외진단시약 원료인 항체, 항원 및 시약을 연구개발 생산하는 체외진단 원료 전문업체로, 현재까지 50여종과 4000 이상의 단일클론 항체 세포주 및 재조합 단백질을 기개발 및 대량 정제 시스템기 구축)

(출처 : 요약문 14p)

Abstract ▼

□ Purpose & Contents
○ Development of SFTS serological diagnostic agent(prototyping).
- Discovery of specific SFTS viral antigens for the development of SFTS serological diagnostics, development of SFTS serological diagnosticagent(prototyping), and efficacy evaluation of prototyping kit.

□ Purpose & Contents
○ Development of SFTS serological diagnostic agent(prototyping).
- Discovery of specific SFTS viral antigens for the development of SFTS serological diagnostics, development of SFTS serological diagnosticagent(prototyping), and efficacy evaluation of prototyping kit.

□ Results
○ Discovery of specific SFTS viral antigens for the development of rapid diagnosis kit and development of SFTS serological diagnostics(prototyping).
- Validation of development of SFTS serological diagnostics(prototyping) using serum of SFTS patients.
- Conducted clinical usefulness evaluation of the manufactured prototype.
○ Identification and validation of specific antigens in the serim of SFTS patients using immunoproteomics technology.
- Develop a diagnostic platform for virus antigen detection(MS-based MRM kit format).
○ The study of kinetics of Serological Response in Patients with SFTS for confirming the time when the developed SFTS serological diagnostics prototyping kit is available.

□ Expected Contribution
○ Development of SFTS serological diagnostics(prototyping) and secure the original technology to enter the rapid antigen-based diagnostics market.
○ The developed prototype could replace IFA(immunofluorescence antibody assay).

(source : SUMMARY 15p)