초록 ▼

□ 연구개요
● 최종목표: 난치성 폐암 환자에서 EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경의 엑소좀 기능 규명 및 재발 진단용 내성 마커 발굴
● 세부목표 :
1) 폐암환자의 혈장/흉수에서 엑소좀 분리 후, EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경 엑소좀 내 타겟을 멀티오믹스 분석을 통해 유효한 내성마커 발굴하고,
2) EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경의 엑소좀의 mRNA, miRNA, protein 마커들의 기능규명을 통해 임상적 진단마커로서 가능성을 평가 하고자 함.
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□ 연구개요
● 최종목표: 난치성 폐암 환자에서 EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경의 엑소좀 기능 규명 및 재발 진단용 내성 마커 발굴
● 세부목표 :
1) 폐암환자의 혈장/흉수에서 엑소좀 분리 후, EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경 엑소좀 내 타겟을 멀티오믹스 분석을 통해 유효한 내성마커 발굴하고,
2) EGFR 억제제 내성 발현에 관여하는 종양미세환경의 엑소좀의 mRNA, miRNA, protein 마커들의 기능규명을 통해 임상적 진단마커로서 가능성을 평가 하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
▶ 1차 연도 목표 : EGFR 억제제에 내성을 갖는 세포주와 환자유래 세포주를 대상으로 암관련 섬유아세포와 공배양시 분비되는 엑소좀 EGFR 억제제 내성인자 발굴함
● EGFR 억제제 내성 세포주와 암관련섬유아세포와의 공배양 후, 회수한 엑소좀의 mRNA, miRNA, protein 내성관련 마커스크리닝함
● EGFR 억제제에 대한 내성 환자유래 세포주 대상 내성마커확인
● mRNA, miRNA, proteomic 데이터분석-->최종3개 내성마커선정
▶ 2차 연도 목표 :① 선별된 엑소좀 내성 마커들의 기능규명을 위해 EGFR 억제제에 대한 내성을 보인 폐암 세포주에서 EGFR 억제제에 대한 내성 마커 검증
● 1차년 선정된 엑소좀 내 EGFR 억제제에 대한 내성 관련 마커 3개를 대상으로 EGFR 내성 세포주 폐암 세포주와 환자유래 세포주를 대상으로 qPCR, western blot, ICC 방법으로 타겟검증 및 분자적 특성평가
● 1차년 선정된 내성마커 후보를 렌티바이러스 시스템으로 과발현/발현저하 세포주를 구축한 후, 이를 탑재한 세포를 누드마우스에 이종이식실험 진행 -->내성 효과를 검증
● ‘마커발굴 환자 그룹 (n=20)'을 대상으로, EGFR 억제제 내성을 가진 환자 혈장/흉수 엑소좀의 mRMA, miRNA, 단백질을 추출 멀티오믹스를 이용한 내성관련 마커 분석
▶ 3차 연도 목표 : 1, 2 차년도 연구결과를 종합하여 EGFR T790M 억제제 내성 관련 마커를 5개로 최종 선정하여 확보한 검증 환자 그룹 (n=30)의 혈장, 흉수액 엑소좀에서 qPCR/western blot으로 최종 선정된 마커 검증.
● 1, 2 차년도 연구결과를 종합, 다양한 종양미세환경이 보존된 환자 혈액 엑소좀 내 miRNA 등의 EGFR 억제제 내성 마커를 5개로 최종 선정
● 1, 2차년도에 확보한 검증 환자 그룹 (n=30) 의 혈액 및 흉수액에서 분리한 엑소좀을 대상으로 qPCR 및 western blot으로 최종 선정된 마커 검증
● 환자 혈액 및 흉수액에서 분리한 엑소좀을 대상으로 최종 선정된 EGFR 억제제에 대한 내성 마커의 분자적 기능규명
● 1,2 차년도 확보한 “검증군 폐암환자”조직에서 IHC, ISH를 통해 선정된 EGFR 억제제 내성마커 확인 진단마커로서의 환자에 임상적용 가능성 평가

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
가) 학문적 파급효과
● 표적 항암제 내성에 대한 multi-target pathway 연구의 가능성 제시
● Tumor heterogenity를 설명할 수 있는 종양 미세 환경 연구의 중요성 제시
나) 기술적 파급효과
● 표적 치료제에 대한　내성 규명 및 새로운 신약의 타겟으로 기술이전을 도모
● 새로운 획득 내성 조절 인자를 발굴로 차세대 EGFR 표적 치료제 개발 발판마련
● 비소세포폐암의 비침습적 시료에서 엑소좀 내성마커/재발 조기진단 가능해짐
다) 기대효과
● 기술적 측면 : 현재까지 EGFR억제제 내성마커는 없음. 본 연구를 통해 비침습적 시료에서 엑소좀을 분리하여 비교적 환자에게 부담없이 또한 억제제 처리 중간에도 내성마커 확인으로 새로운 폐암 치료에 획기적인 기술적 진보로 볼 수 있음.
● 경제적․산업적 측면 : 폐암화자의 암조직 채취는 상당이 소량이며 쉽지않은 과정으로, 환자의 복지측면이나 경제적인 측면에서 본 기술의 개발은 환자의 혈장이나 흉수에서 억제제의 내성마커를 적시에 진단이 가능하게 할 것으로 사료되며, 이는 환자의 경제적 부담을 감소시킬 것임.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1-1. 폐암의 발생 현황 및 새로운 치료법 개발의 필요성 ... 4
• 1-2. 폐암표적치료제로서 상피세포 성장인자 수용체 (EGFR) 억제제 개발 현황 ... 4
• 1-3. 폐암의 대표적인 표적 치료제로서 EGFR 억제제의 효과· 전망·한계점 ... 4
• 1-4. 항암제 내성에 연관된 종양 미세환경 변화 연구와 내성기전 조절인자로서의 엑소좀 가능성 ... 5
• 1-5. 종양 이질성을 고려한 종양미세환경과 EGFR 억제제에 대한 내성기전 조절자 엑소좀의 가능성 ... 5
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 6
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 9
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 9
• 3) 목표 달성 수준 ... 23
• 4) 목표 미달 시 원인 분석 ... 23
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 24
• 가) 학문적 파급효과 ... 24
• 나) 기술적 파급효과 ... 24
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 24
• 6. 참고문헌 ... 24
• 붙임1. 세부 정량적 연구개발성과 ... 25
• 붙임2. 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 27
• 끝페이지 ... 27