초록 ▼

연구개발 목표 및 내용
최종 목표
세포질 단백질을 미토콘드라 세포막에 고정 시킨 뒤, in situ Cryo-ET 이미징을 통해 구조 분석.
전체 내용
in situ Cryo-ET는 세포를 직접 전자현미경 tilt-series 이미징을 하여 세포안의 단백질 구조를 분석하는 기법이다. 현재 in situ Cryo-ET를 통해 구조가 밝혀진 단백질은 모두 세포의 특정위치에 고정 되어 있는 단백질 이거나 세포질에 매우 많은 수로 존재 하는 리보솜이다. 따라서 목표하는 단백질이 세포질 단백질인 경우 구조 분석이 거의

연구개발 목표 및 내용
최종 목표
세포질 단백질을 미토콘드라 세포막에 고정 시킨 뒤, in situ Cryo-ET 이미징을 통해 구조 분석.
전체 내용
in situ Cryo-ET는 세포를 직접 전자현미경 tilt-series 이미징을 하여 세포안의 단백질 구조를 분석하는 기법이다. 현재 in situ Cryo-ET를 통해 구조가 밝혀진 단백질은 모두 세포의 특정위치에 고정 되어 있는 단백질 이거나 세포질에 매우 많은 수로 존재 하는 리보솜이다. 따라서 목표하는 단백질이 세포질 단백질인 경우 구조 분석이 거의 불가능 한 것으로 알려져 있다. 본 연구 그룹은 목표하는 단백질을 미토콘드리아 표면에서 발현시켜 세포질 단백질의 위치를 tomogram 상에서 특정할 수 있는 기술을 개발하고자 하였다.

연구개발성과
일반적인 Cryo-FIB – Cryo-ET를 통해 많은 수의 Mitochondria tomogram을 얻을 수 있었으나 목표하는 타깃단백질인 beta-galactosidase 구조를 얻을 수 없었음. Lift-out 기술을 활용하여 매우 얇은 lamella를 만들 수 있었고, 미토콘드리아를 쉽게 찾을 수 있었으나, lamella 말단에 분포하여 cryo-ET 이미징을 할 수 없었음.

연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
타깃 단백질에 대한 sub-tomogram을 찾는 것에는 실패하였으나 본교 중앙분석센터에서의 cryo-ET 분석 기법에 대한 노하우를 얻을 수 있었음.

(출처 : 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 최종보고서 ... 2
• 요 약 문 ... 3
• 목차 ... 4
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 5
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 5
• 1) 타깃 단백질의 인간 세포 미토콘드리아 표면 발현 확인 ... 5
• 2) cryo-ET 이미징을 통한 타깃 단백질 구조 분석 시도 ... 6
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 7
• 1) 연구수행 결과 ... 7
• 2) 목표 달성 수준 ... 14
• 4. 목표 미달 시 원인분석 ... 14
• 1) 목표 미달 원인(사유) 자체분석 내용 ... 14
• 2) 자체 보완활동 ... 14
• 3) 연구개발 과정의 성실성 ... 14
• 5. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 15
• 6. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 15
• 끝페이지 ... 16