초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
◼ 최종 목표
단백질 나노입자에 세포부착 신호를 도입하여 비부착성 세포를 부유배양하는 새로운 방법을 목표로 한다.

◼ 전체 내용
부착의존성 동물세포의 대량배양은 일반적으로 부착면적 제약이라는 한계에 봉착한다. 따라서 마이크로캐리어 같은 지지체를 이용하지만 여러 가지 단점이 존재한다. 따라서 본 연구에서는 비부착성 세포의 부유배양을 가능하게 하는 부착신호를 단백질 나노입자의 표면에 도입하여 분산형 지지체로 사용하여 부유배양 방법을 개발하고자 하며, 분산형지지체를 사용하는 부유배양

□ 연구개발 목표 및 내용
◼ 최종 목표
단백질 나노입자에 세포부착 신호를 도입하여 비부착성 세포를 부유배양하는 새로운 방법을 목표로 한다.

◼ 전체 내용
부착의존성 동물세포의 대량배양은 일반적으로 부착면적 제약이라는 한계에 봉착한다. 따라서 마이크로캐리어 같은 지지체를 이용하지만 여러 가지 단점이 존재한다. 따라서 본 연구에서는 비부착성 세포의 부유배양을 가능하게 하는 부착신호를 단백질 나노입자의 표면에 도입하여 분산형 지지체로 사용하여 부유배양 방법을 개발하고자 하며, 분산형지지체를 사용하는 부유배양에서 얻은 3차원 세포 집합체의 특성을 분석하여 부착의존적 동물세포의 부유배양이 산업적인 적용 가능성을 조사한다.

◼ 1단계
❏ 목표
세포의 부착신호인 아미노산 서열 RGD를 포함하는 펩타이드 피브로인 미세구의 표면에 부착시켜 비부착성 세포의 부유 배양법을 개발하는 것을 목표로 한다.
❏ 내용
본 연구에서는 실크 단백질 나노입자를 이용하여 부착성 동물세포의 배양에 면적제약이 없는 새로운 부유배양 방법을 개발한다. 이를 위하여 세포의 부착신호와 관련된 RGD 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드를 피브로인 나노입자의 표면에 도입하여 서스펜션 스캐폴드를 만들고, 비부착 배양접시에서 부착성 세포를 배양하는 실험을 통하여 부유배양이 가능함을 보이고자 한다. 이 과정에서 비부착성 세포의 부유배양의 조건을 탐색하고 부유배양으로 얻어지는 세포 집합체의 특성을 분석한다. 아울러 부유배양에 효율적인 RGD서열을 포함하는 펩타이드를 설계하고 이들 부착한 RGD-피브로인 파이브로스피어(fibrosphere)를 개발한다.

□ 연구개발성과
본 연구를 통하여 RGD-피브로인 나노구를 첨가하여 비부착성 세포인 3T3의 부유배양이 비부착성 배양접시에서도 가능하다는 것을 증명하였다. 동시에 RGD펩타이드를 효소적인 방법으로 피브로인 입자의 표면에 도입하는 방법을 개발하였으며, 표면부착 효율이 높은 RGD펩타이드의 c-말단 서열은 NH2-RGD---KAF-COOH임을 확인하였다. 따라서 RGD 서열 펩타이드라 표면에 도입된 단백질 나노입자를 첨가하여 부착성 동물세포의 부유배양이 가능성을 제시하였다.

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
따라서 본 연구에서 제시한 RGD펩타이드 서열과, 효소적 수식방법, 단백질 나노입자를 첨가하는 방법은 부착의존성 동물세포 배양의 면적제약을 극복할 수 있는 새로운 부유배양 방법을 제시하여, 부착성 세포의 대량 증식을 CSTR이나 배양백 같은 생물 반응기에서 시도할 수 있는 근거 및 기본 자료를 제공하게 될 것으로 기대한다.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요 약 문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 1) 필요성 ... 3
• 2) 최종목표 ... 4
• 3) 연구범위 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 6
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 12
• 1) 정성적 연구개발성과 ... 12
• 2) 정량적 연구개발성과 ... 13
• 3) 최종 연구개발 목표 대비 달성내용과 달성도(%) ... 16
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 17
• ① 부착세포의 부유배양 및 생산 기술 관련 ... 17
• ② 단백질 표면 수식 기술 관련 ... 17
• ③ 부유배양을 이용한 오가노이드 제조 가능성 ... 18
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 18
• 6. 참고문헌 ... 19
• 끝페이지 ... 20