초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
본 연구는 최적화된 정제 엑소좀 (exosome) 프로토콜 기술을 바탕으로 (i) 갑상선안병증 환자군을 선별하여 눈물에서 엑소좀을 분리 및 분석 (ii) 눈물의 엑소좀을 오믹스(omics) 기술을 이용하여 바이오마커 포스포단백질 (phosphoprotein) 규명; (iii) in vitro 모델 구축을 위해 연구진에서 확립한 환자로부터 orbital 섬유모세포(fibroblasts)에 갑상선호르몬의 신호전달 체계의 연관성을 밝혀 갑상선 안병증의 조기진단 및 치료에 기여하고자 한다

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
본 연구는 최적화된 정제 엑소좀 (exosome) 프로토콜 기술을 바탕으로 (i) 갑상선안병증 환자군을 선별하여 눈물에서 엑소좀을 분리 및 분석 (ii) 눈물의 엑소좀을 오믹스(omics) 기술을 이용하여 바이오마커 포스포단백질 (phosphoprotein) 규명; (iii) in vitro 모델 구축을 위해 연구진에서 확립한 환자로부터 orbital 섬유모세포(fibroblasts)에 갑상선호르몬의 신호전달 체계의 연관성을 밝혀 갑상선 안병증의 조기진단 및 치료에 기여하고자 한다.

○ 전체 내용
본 연구는 갑상선-안병증 질환의 새로운 바이오 마커를 찾기 위해 환자 눈물에서 엑소좀 수집을 하고 최적화된 정제 프로토콜을 이용하여 갑상선-안병증진단 시스템 구축하고자 한다. 연구실에서 갑상선안병증 환자에서 얻은 조직샘플에서 orbital fibroblasts 100% 회수율 배양조건을 확립한 상태이며 섬유모세포는 MSC의 특징을 가지고 있다고 보고되어 안와 섬유모세포에서의 엑소좀도 분리고자 한다. 즉, 갑상선-안병증 환자에서 1)채취한 눈물과 2)수술 후 얻게 된 일차 섬유아세포 3)혈액샘플 각각 엑소좀을 분리하여 오믹스 분석을 할 것이며 최근 논문에서 밝혀진 갑상선-안병증 눈물에서 엑소좀 샘플이 아닌 단백질 바이오마커로 보고된 S100A4와 PIP를 1) RT-PCR 및western blotting 기법을 통해서 샘플 엑소좀과의 연관성을 확인하고 환자임상정보와 엑소좀 데이터를 연계 분석하여 예후 예측에 유용한지에 대한 유의성 분석을 진행하면서 엑소좀 바이오마커 프로파일을 구축한다면 갑상선안병증 진단의 예후 예측 관련된 전반적인 치료에 도움을 줄 수 있는 치료제 개발까지도 가능성을 보여줄 수 있다고 사료된다.

□ 연구개발성과
갑상선 안병증 환자에서 채취한 눈물에서 엑소좀 단백질 마커인 후보 단백질을 확인하였다.

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
사람의 눈물은 350 lipids, 90 metabolites, 3000 proteins을 가지고 있으며 건강 사람의 눈물에서도 초고속 원심분리를 사용하여 엑소좀 (83%)과 미소낭포(17%) 분리에 성공하였다고 보고되고 있어 갑상선 안병증 진단에 있어 적은 양의 샘플로부터 실험실에서 구축된 엑소좀 분리방법을 사용하여 엑소좀 프로단백질을 밝힌다면 향후 임상적으로 적용할 수 있는 단서를 제공할 것으로 사료된다.그래서 갑상선-안병증환자로부터 얻은 눈물의 엑소좀에서 아직까지 치료법이 없는 갑상선안병증의 진단 및 치료법에 근접할 수 있는 바이오마커 (phosphoproteins) 발굴 및 기능규명과 다양한 갑상선 호르몬의 신호전달 체계의 연관성을 밝힘으로써 갑상선 안병증의 예후와 임상적 치료표적 개발에 기여하고자 하며 이후 본 연구를 기반으로 갑산성-안병증 치료도 엑소좀 투여에 의한 치료방법도 구상해 불 수 있다고 본다.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 1-1 연구개발의 필요성 및 가설 ... 3
• 1-2 연구개발의 중요성 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 내용 및 결과 ... 4
• 2-1 갑상선-안병증 환자 비침습성 샘플들 (tear, serum)에서 엑소좀 분리 및 분석 ... 4
• 2-2 갑상선-안병증 환자에서 얻은 안와섬유모세포에서의 엑소좀 분리 및 분석 ... 6
• 2-3 인체유래별 엑소좀 바이오마커 프로파일 구축 ... 8
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 9
• 4. 목표 달성 수준 및 기여정도 ... 9
• 5. 연구개발성과 및 활용 계획 ... 9
• 1) 연구성과 ... 9
• 2) 연구성과 활용계획 ... 10
• 6. 참고문헌 ... 10
• 끝페이지 ... 10