초록 ▼

□ 연구개요
조혈줄기세포 운명결정인자 WIP1의 조절을 통한 NK 세포 분화 및 항암 효능 증진을 최종 목표로 1) 인간 제대혈 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석, 2) 마우스 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석, 3) 조혈줄기세포 및 NK 세포에서의 WIP1의 분자 기전을 규명하고자 하였음.

□ 연구 목표대비 연구결과
인간 제대혈 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석을 위하여 WIP1 knockout 용 guid

□ 연구개요
조혈줄기세포 운명결정인자 WIP1의 조절을 통한 NK 세포 분화 및 항암 효능 증진을 최종 목표로 1) 인간 제대혈 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석, 2) 마우스 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석, 3) 조혈줄기세포 및 NK 세포에서의 WIP1의 분자 기전을 규명하고자 하였음.

□ 연구 목표대비 연구결과
인간 제대혈 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석을 위하여 WIP1 knockout 용 guide RNA 제작, 제대혈 유래 조혈줄기세포 분리, 조혈줄기세포의 WIP1 knockout 효율 분석을 하였으며 조혈줄기세포의 in vitro NK 세포 분화를 통하여 WIP1의 발현 감소가 NK 세포 분화 효율을 증가 시킴을 확인하였다. 또한 WIP1 inhibitor를 활용하여 NK 세포의 분화를 촉진 시킬 수 있음을 확인하였다. 마우스 유래 조혈줄기세포에서 WIP1의 NK 세포 분화 및 활성 조절 분석을 위하여는 WIP1 knockout 마우스 확보하여 NK 세포의 분화가 증가되어 있음을 확인하였고 HPC (LK) 세포를 분리하여 in vitro 분화를 통해 KO LK 세포가 NK 세포로의 분화가 촉진됨을 확인하였다. 또한 LK 세포의 면역결핍 마우스로의 골수이식을 통해 KO 유래 세포의 NK 세포 분화가 촉진됨을 확인하였고 KO에서 항암 활성이 증가되어 있음을 확인하였다. WT와 KO 마우스의 NK 세포 분리 후 항암 활성을 확인하였을 경우는 활성의 차이를 보이지 않아 WIP1이 주로 분화에 영향을 주고 있음을 알 수 있었다. 마지막으로 조혈줄기세포 및 NK 세포에서의 WIP1의 분자기전을 규명하기 위하여 WIP1이 AKT 인산화효소와 상호작용을 하고 있음과 AKT의 PH 도메인에 결합하여 AKT의 활성을 조절할 수 있음을 확인하였고 재조합 단백질을 활용하여 직접적인 결합을 확인하였다. 또한 이러한 결합작용은 IL-15처리에 의해 증가됨을 확인하였다. NK 세포 분화 과정에서 NK 세포의 대표적인 분화 마커들이 KO 세포에서 증가되어 있음을 확인하였으며 RNA-seq 분석을 통하여 WT와 KO에서 선택적으로 발현이 조절되는 유전자와 주요 신호전달경로를 확인함으로써 WIP1에 의한 NK 세포 분화 조절 기전을 확인하였다. 계획된 목표에 대한 연구 결과를 모두 완성하였음. 해당 연구 기간 동안 연구 관련 SCI 논문은 총 9편을 게재하였으며 한빛사 논문 1편을 포함하여 교신저자 8편, 공동저자 1편을 사사하였음.

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
본 과제를 통하여 새로운 NK 세포분화 조절인자를 발굴하고 작용 기전을 규명하였다. 암은 전 세계적인 증가 추세이며 이러한 질병은 가정을 넘어 사회의 문제, 나아가 국가의 중요 한 문제로 대두되고 있어 고품질, 대량생산이 가능한 면역세포치료제 개발은 국민의 삶의 질을 향상시키고 사회적 비용을 절감할 수 있는 중요한 연구 분야로 개인적 및 사회적 건강에 기여할 것으로 기대된다. 본 연구 결과는 최근에 T세포 보다 안전한 세포치료제로 주목 받고 있는 NK 세포의 생산을 위하여 WIP1을 타겟으로 하는 저해제 개발 및 기존의 개발된 약물을 통하여 NK 세포를 좀 더 효율적으로 생산할 수 있는 방법을 제시함으로써 난치성 암치료용 세포치료제 생산 기술 확보가 가능할 것으로 생각된다. 이러한 기반 기술은 선진국과의 보건 의료 기술 격차를 줄이고 원천기술을 확보함으로써 면역세포치료제의 상용화를 통한 세계 시장 진출에 기여할 것이며 또한 줄기세포 유래 세포치료제 개발이나 세포치료 기술 효율성 증대를 위한 기술 개발에 기여할 것이다.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• (1) 연구개발의 목적 ... 4
• (2) 연구개발의 필요성 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 5
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 6
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 6
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 15
• 3) 목표 달성 수준 ... 16
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 16
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 17
• 6. 자체점검표 ... 17
• 7. 참고문헌 ... 18
• 끝페이지 ... 41