L-929 세포를 이용한 콘택트렌즈 용액 내 여러 가지 계면활성제의 세포독성과 단백질 제거 효과 비교 Comparison of Protein Removal effects and Cytotoxicity in the L-929 Cell Line by Various Surfactants원문보기
콘택트렌즈 다목적 용액 내에는 보존제, 소독제, 세척제, 윤활제 등이 포함되어 있으며 콘택트렌즈 표면에 침착하는 단백질을 제거하는 목적으로 물질의 계면에 흡착되어 그 표면 장력을 현저하게 저하시키고 수액 내에 일정 농도이상으로 존재할 때 미셀구조를 형성하여 정상적으로 용해되지 않는 물질을 미셀구조내에서 용해시키는 특성을 갖는 계면활성제를 사용한다. 본 연구는 계면활성제의 세척 효과와 세포독성 관계를 연구하고자 소프트 콘택트렌즈의 세척용으로 사용되는 여러 가지 계면활성제 (Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine, Poloxamer407)가 생쥐의 섬유모세포인 L-929 cell line에 미치는 저해 효과를 알아보았다. 계면활성제를 농도별 (0.001 - 10%, w/w)로 처리한 후 시간별(24h, 48h)로 ...
콘택트렌즈 다목적 용액 내에는 보존제, 소독제, 세척제, 윤활제 등이 포함되어 있으며 콘택트렌즈 표면에 침착하는 단백질을 제거하는 목적으로 물질의 계면에 흡착되어 그 표면 장력을 현저하게 저하시키고 수액 내에 일정 농도이상으로 존재할 때 미셀구조를 형성하여 정상적으로 용해되지 않는 물질을 미셀구조내에서 용해시키는 특성을 갖는 계면활성제를 사용한다. 본 연구는 계면활성제의 세척 효과와 세포독성 관계를 연구하고자 소프트 콘택트렌즈의 세척용으로 사용되는 여러 가지 계면활성제 (Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine, Poloxamer407)가 생쥐의 섬유모세포인 L-929 cell line에 미치는 저해 효과를 알아보았다. 계면활성제를 농도별 (0.001 - 10%, w/w)로 처리한 후 시간별(24h, 48h)로 MTT 와 LDH 분석 방법을 사용하여 측정하였고, 도립 위상차 현미경으로 세포형태를 관찰하였다. 단백질 제거효과는 친수성 콘택트렌즈 FDA공인 A그룹의 렌즈 etafilcon A (함수율 58%)를 인공누액에 65시간 담근 후 꺼내어 계면활성제의 농도와 처리시간 (12, 24h)에 따라 단백질 제거효과를 조사하였는데 단백질이 침착 된 친수성 콘택트렌즈가 각각의 계면활성제에 의해 제거된 단백질 량의 정량은 Bradford 정량 방법을 이용하여 측정하였다. 세포증식 저해효과는 24시간 처리결과 Poloxamine의 경우 0.1%이하에서 Poloxamer407은 5%이하에서 Tyloxapol은 0.1%이하에서 Tromethamine은 1%이하의 농도에서는 세포독성을 나타내지 않았으나, Poloxamine의 경우 1%에서 poloxamer407은 7%에서 Tyloxapol은 1%에서 Tromethamine은 1.5%에서 세포독성을 나타내었다. 세포소기관을 중심으로 평가된 MTT 분석 방법은 LDH 유리 분석 방법보다 민감하게 나타났다. 계면활성제의 세포독성이 없는 농도에서 단백질 제거효과는 Tyloxapol > Poloxamer407 > Tromethamine > Poloxamine 순으로 콘택트렌즈에 침착된 단백질 제거량이 높았으며, 농도 의존적으로 효과가 높은 것으로 조사되었다. 이러한 결과를 통해 미래의 계면활성제는 세포독성이 낮고 세척효과가 뛰어나야 할 것으로 사료된다.
콘택트렌즈 다목적 용액 내에는 보존제, 소독제, 세척제, 윤활제 등이 포함되어 있으며 콘택트렌즈 표면에 침착하는 단백질을 제거하는 목적으로 물질의 계면에 흡착되어 그 표면 장력을 현저하게 저하시키고 수액 내에 일정 농도이상으로 존재할 때 미셀구조를 형성하여 정상적으로 용해되지 않는 물질을 미셀구조내에서 용해시키는 특성을 갖는 계면활성제를 사용한다. 본 연구는 계면활성제의 세척 효과와 세포독성 관계를 연구하고자 소프트 콘택트렌즈의 세척용으로 사용되는 여러 가지 계면활성제 (Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine, Poloxamer407)가 생쥐의 섬유모세포인 L-929 cell line에 미치는 저해 효과를 알아보았다. 계면활성제를 농도별 (0.001 - 10%, w/w)로 처리한 후 시간별(24h, 48h)로 MTT 와 LDH 분석 방법을 사용하여 측정하였고, 도립 위상차 현미경으로 세포형태를 관찰하였다. 단백질 제거효과는 친수성 콘택트렌즈 FDA공인 A그룹의 렌즈 etafilcon A (함수율 58%)를 인공누액에 65시간 담근 후 꺼내어 계면활성제의 농도와 처리시간 (12, 24h)에 따라 단백질 제거효과를 조사하였는데 단백질이 침착 된 친수성 콘택트렌즈가 각각의 계면활성제에 의해 제거된 단백질 량의 정량은 Bradford 정량 방법을 이용하여 측정하였다. 세포증식 저해효과는 24시간 처리결과 Poloxamine의 경우 0.1%이하에서 Poloxamer407은 5%이하에서 Tyloxapol은 0.1%이하에서 Tromethamine은 1%이하의 농도에서는 세포독성을 나타내지 않았으나, Poloxamine의 경우 1%에서 poloxamer407은 7%에서 Tyloxapol은 1%에서 Tromethamine은 1.5%에서 세포독성을 나타내었다. 세포소기관을 중심으로 평가된 MTT 분석 방법은 LDH 유리 분석 방법보다 민감하게 나타났다. 계면활성제의 세포독성이 없는 농도에서 단백질 제거효과는 Tyloxapol > Poloxamer407 > Tromethamine > Poloxamine 순으로 콘택트렌즈에 침착된 단백질 제거량이 높았으며, 농도 의존적으로 효과가 높은 것으로 조사되었다. 이러한 결과를 통해 미래의 계면활성제는 세포독성이 낮고 세척효과가 뛰어나야 할 것으로 사료된다.
Surfactants are the major components of cleansing products, cosmetics and medical materials. It is well known that many surfactants cause irritation. The Draize test has been widely used to predict chemical irritation. However, this test has been criticized for lack of reproducibility, the subjectiv...
Surfactants are the major components of cleansing products, cosmetics and medical materials. It is well known that many surfactants cause irritation. The Draize test has been widely used to predict chemical irritation. However, this test has been criticized for lack of reproducibility, the subjective nature of scoring and evaluating the response, long assay duration, relatively high cost and particularly the use of animals. So, a large number of in vitro systems have been investigated as possible alternatives for the Draize test. The purpose of this study was performed to be comparative of protein removal effects and cytotoxicity in the L-929 cell Line by Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407. To investigate the inhibitory effect of cell growth by four surfactants, L-929 cells were cultured and treated with Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407. The cytotoxicity was measured by MTT assay and LDH leakage assay. In MTT assay, the inhibitory effect of cell growth by Tyloxapol and Poloxamine was significantly higher than by Tromethamine and Poloxamer407. MTT assay was more sensitive than LDH leakage assay in this study. To investigate the cleaning efficacy of these surfactants, UV spectrometer was used for measuring protein deposit. The cleaning efficacy by Tyloxapol was significantly higher than by Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407.
Surfactants are the major components of cleansing products, cosmetics and medical materials. It is well known that many surfactants cause irritation. The Draize test has been widely used to predict chemical irritation. However, this test has been criticized for lack of reproducibility, the subjective nature of scoring and evaluating the response, long assay duration, relatively high cost and particularly the use of animals. So, a large number of in vitro systems have been investigated as possible alternatives for the Draize test. The purpose of this study was performed to be comparative of protein removal effects and cytotoxicity in the L-929 cell Line by Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407. To investigate the inhibitory effect of cell growth by four surfactants, L-929 cells were cultured and treated with Tyloxapol, Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407. The cytotoxicity was measured by MTT assay and LDH leakage assay. In MTT assay, the inhibitory effect of cell growth by Tyloxapol and Poloxamine was significantly higher than by Tromethamine and Poloxamer407. MTT assay was more sensitive than LDH leakage assay in this study. To investigate the cleaning efficacy of these surfactants, UV spectrometer was used for measuring protein deposit. The cleaning efficacy by Tyloxapol was significantly higher than by Tromethamine, Poloxamine or Poloxamer407.
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