다세포 생물은 다양한 외부 환경적 변화에 대하여 민감하고 적절한 반응 체계를 가지고 있다. 특히 이온화 방사선(IR)에 의한 생체내의 반응은 활성 산소의 생성과 DNA 이중 나선 손상에 의한 ...
다세포 생물은 다양한 외부 환경적 변화에 대하여 민감하고 적절한 반응 체계를 가지고 있다. 특히 이온화 방사선(IR)에 의한 생체내의 반응은 활성 산소의 생성과 DNA 이중 나선 손상에 의한 세포 주기 변화, 세포 사멸, 전사, DNA 복구 등의 총체적인 변화가 나타난다. 이번 연구에서는 단백질체 분석 기술을 이용하여 다양한 포유동물 조직에 이온화 방사선을 조사 했을 때, 시간에 따른 단백질의 변화를 분석하였다. 먼저 쥐의 간 조직에 이온화 방사선 조사 후(28일까지의 장기간 분석과 8시간 까지의 단기간 분석) 단백질을 추출하고, 이를 다양한 방법의 이차원전기영동을 이용하여 분리 시켰다. 분리된 단백질 지도상에서의 단백질의 변화를 이미지 분석 기술을 통해 정량분석 하였다. 이를 통해 얻게 된 후보 단백질은 trypsin digestion을 거쳐 MALDI-TOF 질량 분석기와 tandem 질량 분석기를 통해서 peptide mass fingerprinting을 수행하였고, database에서의 검색을 통해 동정하였다. 이러한 단백질체 분석을 통해 밝혀진 단백질은 생체내의 다양한 대사에 관련된 이온화 방사선에 의해 유도된 생리적 영향물질로 추정되며, 그 중에서 활성 산소 종의 대사와 관련된 단백질의 변화는 이온화 방사선에 의한 단백질변화에 대해서 단백질 연구기법을 이용한 최초의 검증을 하였다. 또한 밝혀진 단백질들의 대부분이 이온화 방사선에 의한 변화인지에 대해서 현재까지 유전체 또는 단백질체 수준에서 그 기능이 명백하지 않은 대상 단백질이므로, 이들은 이온화 방사선에 의한 신호 전달 체계를 이해하는 데 기여할 것이다.
다세포 생물은 다양한 외부 환경적 변화에 대하여 민감하고 적절한 반응 체계를 가지고 있다. 특히 이온화 방사선(IR)에 의한 생체내의 반응은 활성 산소의 생성과 DNA 이중 나선 손상에 의한 세포 주기 변화, 세포 사멸, 전사, DNA 복구 등의 총체적인 변화가 나타난다. 이번 연구에서는 단백질체 분석 기술을 이용하여 다양한 포유동물 조직에 이온화 방사선을 조사 했을 때, 시간에 따른 단백질의 변화를 분석하였다. 먼저 쥐의 간 조직에 이온화 방사선 조사 후(28일까지의 장기간 분석과 8시간 까지의 단기간 분석) 단백질을 추출하고, 이를 다양한 방법의 이차원전기영동을 이용하여 분리 시켰다. 분리된 단백질 지도상에서의 단백질의 변화를 이미지 분석 기술을 통해 정량분석 하였다. 이를 통해 얻게 된 후보 단백질은 trypsin digestion을 거쳐 MALDI-TOF 질량 분석기와 tandem 질량 분석기를 통해서 peptide mass fingerprinting을 수행하였고, database에서의 검색을 통해 동정하였다. 이러한 단백질체 분석을 통해 밝혀진 단백질은 생체내의 다양한 대사에 관련된 이온화 방사선에 의해 유도된 생리적 영향물질로 추정되며, 그 중에서 활성 산소 종의 대사와 관련된 단백질의 변화는 이온화 방사선에 의한 단백질변화에 대해서 단백질 연구기법을 이용한 최초의 검증을 하였다. 또한 밝혀진 단백질들의 대부분이 이온화 방사선에 의한 변화인지에 대해서 현재까지 유전체 또는 단백질체 수준에서 그 기능이 명백하지 않은 대상 단백질이므로, 이들은 이온화 방사선에 의한 신호 전달 체계를 이해하는 데 기여할 것이다.
To investigate the proteomic changes induced by irradiation in the mammalian tissues, global proteomics approach were performed by using 2-D gel electrophoresis and mass spectrometry. Approximately 2,000 spots were detected by SYPRO Ruby staining. In response to irradiation , 88 protein spots that w...
To investigate the proteomic changes induced by irradiation in the mammalian tissues, global proteomics approach were performed by using 2-D gel electrophoresis and mass spectrometry. Approximately 2,000 spots were detected by SYPRO Ruby staining. In response to irradiation , 88 protein spots that were regulated differentially, of which 45 spots were up-regulated proteins such as Prx -III, Serpins, IL-10, MRP-8, 32 spots were down-regulated proteins such as SMP-30, ferritin, ERp60, and 11 spots were newly induced. The altered proteins were characterized by MALDI-TOF-MS, and ESI MS/MS. In this study, the identified proteins are known to change in expression in ROS metabolism, signal transduction, inflammation, apoptosis, proteolysis and protein folding. Especially, the Prx (peroxiredoxin)-III appeared to be significantly increased after exposure to irradiation. In addtion, peroxiredoxins were validated by western blot analysis. These results suggest that, Prx enzymes likely play an important role in eliminating peroxides induced by irradiation. Also, down-regulation of SMP-30 and in livers of rats and mouse treated with high doses of irradiation could result in deregulation of calcium signaling and in cellular stress. Consequently, identification of the repertoire of proteins associated with cellular responses induced by irradiation will likely provide insights into the fundamental mechanisms of cellular control and new signaling targets.
To investigate the proteomic changes induced by irradiation in the mammalian tissues, global proteomics approach were performed by using 2-D gel electrophoresis and mass spectrometry. Approximately 2,000 spots were detected by SYPRO Ruby staining. In response to irradiation , 88 protein spots that were regulated differentially, of which 45 spots were up-regulated proteins such as Prx -III, Serpins, IL-10, MRP-8, 32 spots were down-regulated proteins such as SMP-30, ferritin, ERp60, and 11 spots were newly induced. The altered proteins were characterized by MALDI-TOF-MS, and ESI MS/MS. In this study, the identified proteins are known to change in expression in ROS metabolism, signal transduction, inflammation, apoptosis, proteolysis and protein folding. Especially, the Prx (peroxiredoxin)-III appeared to be significantly increased after exposure to irradiation. In addtion, peroxiredoxins were validated by western blot analysis. These results suggest that, Prx enzymes likely play an important role in eliminating peroxides induced by irradiation. Also, down-regulation of SMP-30 and in livers of rats and mouse treated with high doses of irradiation could result in deregulation of calcium signaling and in cellular stress. Consequently, identification of the repertoire of proteins associated with cellular responses induced by irradiation will likely provide insights into the fundamental mechanisms of cellular control and new signaling targets.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.