2002년 2월 - 2004년 5월사이에 가야산, 고창선운사, 남해금산, 내장산, 백운산, 변산반도, 소백산, 소록도, 오대산, 월출산, 조계산, 주흘산, 청량산, 태백산, 한라산등 16지역의 산과 2지역의 섬을 1~3회에 걸쳐 채집하였다. 채집된 시료는 총 1,325점 이었으며, 실험에 사용된 시료는 총 362점 중 Ascomycetes로 2 목, 20과, 47 속, 125 종이었다. ...
2002년 2월 - 2004년 5월사이에 가야산, 고창선운사, 남해금산, 내장산, 백운산, 변산반도, 소백산, 소록도, 오대산, 월출산, 조계산, 주흘산, 청량산, 태백산, 한라산등 16지역의 산과 2지역의 섬을 1~3회에 걸쳐 채집하였다. 채집된 시료는 총 1,325점 이었으며, 실험에 사용된 시료는 총 362점 중 Ascomycetes로 2 목, 20과, 47 속, 125 종이었다. 지의류 형성 곰팡이분리는 지의체 조직 분리법과 자낭반을 이용한 분리법을 변형하여 이용하였으며, 실험에 사용된 362점의 시료 중 119점의 시료에서 지의류 형성 곰팡이(LFF)가 분리되었다. 지의류 형성 곰팡이는 자낭반을 이용한 분리법에 의해 총 115점의 시료 중 51점이 분리되었고, 지의체 조직 분리법에 의해 총 247점의 시료 중 68점의 시료가 분리되었다. 전체 47 속 125 종 중 30 속 47종이 분리된 것이다. 시료를 기준으로 자낭반을 이용한 분리법의 성공율은 44％였고, 지의체 조직을 이용한 분리법의 성공률은 28％로 전체 38％ 지의류 형성 곰팡이의 분리 성공률을 보였다. Collema sp., Myelochroa sp., Parmelia sp., Ramalina sp.속의 경우에는 지의체 조직을 이용한 분리법과 자낭반을 이용한 분리법 어떠한 방법을 사용하여 지의류 형성 곰팡이를 분리하더라도 50％이상의 분리를 성공적으로 할 수 있으며, Anzia sp., Pannaria sp., Peltigera sp., Physcia sp., Pyxine sp., Stereocaulon sp., Sticta sp.속의 경우에는 지의체 조직을 이용한 분리법을 이용하는 것보다 자낭반을 이용한 분리법을 이용하여 지의류 형성 곰팡이를 분리하는 것이 최소 20％에서 최고 70％까지의 분리 성공률을 높일 수 있다. Dermatocarpon sp., Dirinaria sp., Heterodermia sp., Lecanora sp., Leptogium sp., Lobaria sp., Menegazzia sp., Neocatapyrenium sp., Parmelinopsis sp., Phaeophyscia sp., Phylliscum sp.속 들은 두 방법 모두에서 분리율이 저조함으로 이들 속에 대한 지의류 형성 곰팡이분리 방법을 보완할 필요가 있다. 그러나 이 외의 자낭반을 형성하지 않는 지의류의 지의체 조직을 이용한 분리법에 의한 분리는 실험과정 중의 오염문제만을 해결한다면 분리 방법에는 문제가 없는 것으로 보인다. 그리고 지의류를 채집한 시기에 따른 지의류 형성 곰팡이의 분리율을 살펴보면 지의체 조직을 이용한 분리법에 이용되는 시료는 -20℃의 저온에서 보관하여야만하고, 자낭반을 이용한 분리법의 시료는 한 겨울 보다는 봄에 채집하여 지의류 형성 곰팡이를 분리한다면 분리효율을 높일 수 있다. 이 연구에서 분리된 지의류 형성 곰팡이들 중 항균작용이 매우 우수한 천연물질인 usnic acid를 생산해냄으로서 유용생물자원으로서의 활용 가치가 있다고 판단되는 R. conduplicans에서 분리된 지의류 형성 곰광이(JRC0301)의 ITS rDNA 분석(99.6％) 결과 지의체를 형성하고 있는 지의류 형성 곰팡이임을 확인할 수 있었다. 그리고 또한 JRC0301지의류 형성 곰팡이의 유용생리활성물질 생산유무를 확인한 결과 B. coicis, R. solani에 대해서 항균 활성이 있었다. JRC0301의 질소원으로는 peptone을 처리한 배지에서 생장이 가장 높았으며, 배양 pH로는 4.0과 4.5에서 가장 생장이 양호한 것으로 나타났다. 특히, pH4.0에서 peptone을 처리한 배지에서 가장 높은 균사 생장을 보였다. 탄소원으로는 ribitol을 처리한 배지에서 생장이 가장 높았으며, 배양 pH로는 4.0에서 가장 생장이 양호한 것으로 나타났다. R. conduplicans지의류의 지의류 형성 곰팡이는 식품유해세균 S. mutans와 S. anterotidis에 대하여 pH4.0의 peptone을 처리한 배양액에서 두 세균 모두에 항균활성이 가장 우수한 것으로 조사되었다. 현재 한국산 지의류 채집을 계속하고 있으며, 더 많은 지의류 형성 곰팡이균주 확보를 위해 자낭반을 이용한 분리법을 중심으로 지의류 형성 곰팡이분리를 하고 동시에 분리된 지의류 형성 곰팡이들은 분자생물학적 방법인 ITS rDNA 염기서열분석을 이용하여 지의류 형성 곰팡이임을 확인 후 확보된 지의류 형성 곰팡이들은 대량배양을 하고 있다. 또한 지의류 형성 곰팡이의 항균활성을 대치배양을 통해 조사하고, 최적생장 조건 구명 및 항균활성 조사를 하고 있다.
2002년 2월 - 2004년 5월사이에 가야산, 고창선운사, 남해금산, 내장산, 백운산, 변산반도, 소백산, 소록도, 오대산, 월출산, 조계산, 주흘산, 청량산, 태백산, 한라산등 16지역의 산과 2지역의 섬을 1~3회에 걸쳐 채집하였다. 채집된 시료는 총 1,325점 이었으며, 실험에 사용된 시료는 총 362점 중 Ascomycetes로 2 목, 20과, 47 속, 125 종이었다. 지의류 형성 곰팡이분리는 지의체 조직 분리법과 자낭반을 이용한 분리법을 변형하여 이용하였으며, 실험에 사용된 362점의 시료 중 119점의 시료에서 지의류 형성 곰팡이(LFF)가 분리되었다. 지의류 형성 곰팡이는 자낭반을 이용한 분리법에 의해 총 115점의 시료 중 51점이 분리되었고, 지의체 조직 분리법에 의해 총 247점의 시료 중 68점의 시료가 분리되었다. 전체 47 속 125 종 중 30 속 47종이 분리된 것이다. 시료를 기준으로 자낭반을 이용한 분리법의 성공율은 44％였고, 지의체 조직을 이용한 분리법의 성공률은 28％로 전체 38％ 지의류 형성 곰팡이의 분리 성공률을 보였다. Collema sp., Myelochroa sp., Parmelia sp., Ramalina sp.속의 경우에는 지의체 조직을 이용한 분리법과 자낭반을 이용한 분리법 어떠한 방법을 사용하여 지의류 형성 곰팡이를 분리하더라도 50％이상의 분리를 성공적으로 할 수 있으며, Anzia sp., Pannaria sp., Peltigera sp., Physcia sp., Pyxine sp., Stereocaulon sp., Sticta sp.속의 경우에는 지의체 조직을 이용한 분리법을 이용하는 것보다 자낭반을 이용한 분리법을 이용하여 지의류 형성 곰팡이를 분리하는 것이 최소 20％에서 최고 70％까지의 분리 성공률을 높일 수 있다. Dermatocarpon sp., Dirinaria sp., Heterodermia sp., Lecanora sp., Leptogium sp., Lobaria sp., Menegazzia sp., Neocatapyrenium sp., Parmelinopsis sp., Phaeophyscia sp., Phylliscum sp.속 들은 두 방법 모두에서 분리율이 저조함으로 이들 속에 대한 지의류 형성 곰팡이분리 방법을 보완할 필요가 있다. 그러나 이 외의 자낭반을 형성하지 않는 지의류의 지의체 조직을 이용한 분리법에 의한 분리는 실험과정 중의 오염문제만을 해결한다면 분리 방법에는 문제가 없는 것으로 보인다. 그리고 지의류를 채집한 시기에 따른 지의류 형성 곰팡이의 분리율을 살펴보면 지의체 조직을 이용한 분리법에 이용되는 시료는 -20℃의 저온에서 보관하여야만하고, 자낭반을 이용한 분리법의 시료는 한 겨울 보다는 봄에 채집하여 지의류 형성 곰팡이를 분리한다면 분리효율을 높일 수 있다. 이 연구에서 분리된 지의류 형성 곰팡이들 중 항균작용이 매우 우수한 천연물질인 usnic acid를 생산해냄으로서 유용생물자원으로서의 활용 가치가 있다고 판단되는 R. conduplicans에서 분리된 지의류 형성 곰광이(JRC0301)의 ITS rDNA 분석(99.6％) 결과 지의체를 형성하고 있는 지의류 형성 곰팡이임을 확인할 수 있었다. 그리고 또한 JRC0301지의류 형성 곰팡이의 유용생리활성물질 생산유무를 확인한 결과 B. coicis, R. solani에 대해서 항균 활성이 있었다. JRC0301의 질소원으로는 peptone을 처리한 배지에서 생장이 가장 높았으며, 배양 pH로는 4.0과 4.5에서 가장 생장이 양호한 것으로 나타났다. 특히, pH4.0에서 peptone을 처리한 배지에서 가장 높은 균사 생장을 보였다. 탄소원으로는 ribitol을 처리한 배지에서 생장이 가장 높았으며, 배양 pH로는 4.0에서 가장 생장이 양호한 것으로 나타났다. R. conduplicans지의류의 지의류 형성 곰팡이는 식품유해세균 S. mutans와 S. anterotidis에 대하여 pH4.0의 peptone을 처리한 배양액에서 두 세균 모두에 항균활성이 가장 우수한 것으로 조사되었다. 현재 한국산 지의류 채집을 계속하고 있으며, 더 많은 지의류 형성 곰팡이균주 확보를 위해 자낭반을 이용한 분리법을 중심으로 지의류 형성 곰팡이분리를 하고 동시에 분리된 지의류 형성 곰팡이들은 분자생물학적 방법인 ITS rDNA 염기서열분석을 이용하여 지의류 형성 곰팡이임을 확인 후 확보된 지의류 형성 곰팡이들은 대량배양을 하고 있다. 또한 지의류 형성 곰팡이의 항균활성을 대치배양을 통해 조사하고, 최적생장 조건 구명 및 항균활성 조사를 하고 있다.
A lichen is a very special kind. We find that it is composed of two completely different organisms, microscopic green or blue-green algae that are related to free-living algae and colorless fungal threads. These two components grow together in a harmonious association referred to as symbiosis, or mo...
A lichen is a very special kind. We find that it is composed of two completely different organisms, microscopic green or blue-green algae that are related to free-living algae and colorless fungal threads. These two components grow together in a harmonious association referred to as symbiosis, or more simply a " living together". In this study, Isolation into pure culture was attempted on lichen by discharged spore method and thallus fragments in Korea, and DNA sequence analysis of ITS1, 5.8 rDNA and ITS2 regions demonstrated that the isolate lichen-forming fungi(LFF) was identical with the symbiotic mycobiont of lichens. And also, Mycelial growth and antagonistic activity of the isolate LFF was prominent in malt extract-yeast extract medium based with nitrogen source and carbon source at optimum pH. Isolation into pure culture was attempted on 125species (362 specimens) of lichen-forming fungi from diverse ecosystems and systematic groups of macrolichens (covering 2ascomycetes orders, 20families and 47genera) in Korea. One hundred ninteen isolates (47 species, 38％) were successfully isolated either from ascospores or photobiont-free fragments from thallus macerates. The total number of isolation attempts from ascospores (115 specimens) and thallus fragments (247 specimens), 44％ and 28％ were successful, respectively. A lichen-forming fungus(JRC0301) was successfully isolated from Ranalina conduplicans by discharged spore method and cultivated in pure culture. DNA sequence analysis of ITS1, 5.8 rDNA and ITS2 regions demonstrated that the isolate JRC0301 was identical with the symbiotic mycobiont of R. conduplicans. Mycelial growth and antibacterial activity of the isolate JRC0301 was prominent in malt extract-yeast extract medium based with peptone(nitrogen source, 0.2％, w/v) and ribitol (carbon source, 2％, w/v) at pH 4.0. The isolate showed antibacterial activity against food poisoning bacteria of Streptococcus mutans and Salmonella anterotidis, and antifungal activity against plant pathogenic fungi of Bipolaris coicisn and Rhizoctonia solani.
A lichen is a very special kind. We find that it is composed of two completely different organisms, microscopic green or blue-green algae that are related to free-living algae and colorless fungal threads. These two components grow together in a harmonious association referred to as symbiosis, or more simply a " living together". In this study, Isolation into pure culture was attempted on lichen by discharged spore method and thallus fragments in Korea, and DNA sequence analysis of ITS1, 5.8 rDNA and ITS2 regions demonstrated that the isolate lichen-forming fungi(LFF) was identical with the symbiotic mycobiont of lichens. And also, Mycelial growth and antagonistic activity of the isolate LFF was prominent in malt extract-yeast extract medium based with nitrogen source and carbon source at optimum pH. Isolation into pure culture was attempted on 125species (362 specimens) of lichen-forming fungi from diverse ecosystems and systematic groups of macrolichens (covering 2ascomycetes orders, 20families and 47genera) in Korea. One hundred ninteen isolates (47 species, 38％) were successfully isolated either from ascospores or photobiont-free fragments from thallus macerates. The total number of isolation attempts from ascospores (115 specimens) and thallus fragments (247 specimens), 44％ and 28％ were successful, respectively. A lichen-forming fungus(JRC0301) was successfully isolated from Ranalina conduplicans by discharged spore method and cultivated in pure culture. DNA sequence analysis of ITS1, 5.8 rDNA and ITS2 regions demonstrated that the isolate JRC0301 was identical with the symbiotic mycobiont of R. conduplicans. Mycelial growth and antibacterial activity of the isolate JRC0301 was prominent in malt extract-yeast extract medium based with peptone(nitrogen source, 0.2％, w/v) and ribitol (carbon source, 2％, w/v) at pH 4.0. The isolate showed antibacterial activity against food poisoning bacteria of Streptococcus mutans and Salmonella anterotidis, and antifungal activity against plant pathogenic fungi of Bipolaris coicisn and Rhizoctonia solani.
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