정상세포에는 독성을 나타나지 않고 면역체계를 활성화시킴으로서 암을 치료할수 있는 천연물질로부터 새로운 항암성분을 탐색하기 위해, 국내 자생 섬오가피 뿌리물추출물(SR-W)와 줄기물추출물(SS-W)을 이용해, 면역세포인 Jurkat-T 세포, Raw 264.7 세포와 수지상세포와 장점막 상피세포인 IEC-6 세포에 처리하여 IL-2, TNF-α와 ...
정상세포에는 독성을 나타나지 않고 면역체계를 활성화시킴으로서 암을 치료할수 있는 천연물질로부터 새로운 항암성분을 탐색하기 위해, 국내 자생 섬오가피 뿌리물추출물(SR-W)와 줄기물추출물(SS-W)을 이용해, 면역세포인 Jurkat-T 세포, Raw 264.7 세포와 수지상세포와 장점막 상피세포인 IEC-6 세포에 처리하여 IL-2, TNF-α와 IL-12 등의 항암 cytokine 분비 조절 여부를 확인 하였다. 면역세포와 점막세포에 대한 섬오가피 추출물의 세포독성을 확인하기 위해 MTT assay를 이용하여 섬오가피 물추출물의 농도별 세포 생존율을 확인하였을 때, 비교적 높은 농도인 10^(-6) g/㎖ 이하의 농도에서도 95% 이상의 생존을 보여서 실험에 사용된 모든 세포에 섬오가피 물추출물의 독성으로 인한 생존율의 변화는 거의 일어나지 않는 것을 확인하였다. Cytokine 분비 정도를 EILSA로 확인하였을 때, Raw 264.7 세포에 대한 섬오가피 줄기 추출물(SS-W) 경우는 TNF-α의 분비에 아무런 영향을 끼치지 않는 것으로 나타났지만 뿌리 물추출물(SR-W) 처리시에는 10^(-7) g/㎖에서 20% 정도의 감소를 보였다. TNF-α 분비 감소 결과는, SR-W가 항염증 물질의 암 예방제 연구 또는 염증 억제 성분의 분리 및 염증 반응 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 사료된다. Jurkat-T 세포에 대한 줄기 추출물(SS-W)처리에는, IL-2의 분비 증가를 확인 하였고, 이는 섬오가피 줄기 물추출물(SS-W)이 T 세포, NK 세포, B 세포에 작용하여 성장을 촉진하여 면역 증진 효과를 보일 것이라 판단 할 수 있다. Dendritic 세포의 myeloid 계열의 DC(DC-Ⅰ)와 lymphoid 계열의 DC(DC-Ⅱ)는 비교적 낮은 농도임에도 뿌리 물추출물(SR-W)처리시, IL-12의 분비를 보여, 이를 통해 대식세포, NK 세포, 세포독성 T 세포, B 세포 등의 활성이 증가 될 것이라 판단된다. 점막세포 IEC-6 세포의 IL-2의 분비는 뿌리(SS-W)와 줄기(SR-w)의 물추출물 모두에서 IL-2의 분비 증가가 다른 세포에서의 cytokine 분비 증가 보다 두드러지는 효과를 보였다. 이는 섬오가피 물추출물이 세균과 바이러스와 같은 외부 항원에 지속적으로 노출되는 장점막에서 항암관련 cytokine인 IL-2의 분비를 촉진함으로써, 점막 면역을 증진시킴을 예측할 수 있다. 본 연구에서는 이 결과를 통해, 섬오가피의 뿌리와 줄기 물추출물의 cytokine의 분비 조절 효과가 면역기능에 대한 약리적 효능으로 기인되며, NK 세포, 대식세포, 수지상 세포, T 세포등의 면역 세포들을 활성화하여 세포성 면역을 증강시킴으로써, 암치료의 부작용을 감소시키고, 치료효과를 높일 수 있는 유용한 자원으로의 가치가 있음을 제시하고자 한다.
정상세포에는 독성을 나타나지 않고 면역체계를 활성화시킴으로서 암을 치료할수 있는 천연물질로부터 새로운 항암성분을 탐색하기 위해, 국내 자생 섬오가피 뿌리물추출물(SR-W)와 줄기물추출물(SS-W)을 이용해, 면역세포인 Jurkat-T 세포, Raw 264.7 세포와 수지상세포와 장점막 상피세포인 IEC-6 세포에 처리하여 IL-2, TNF-α와 IL-12 등의 항암 cytokine 분비 조절 여부를 확인 하였다. 면역세포와 점막세포에 대한 섬오가피 추출물의 세포독성을 확인하기 위해 MTT assay를 이용하여 섬오가피 물추출물의 농도별 세포 생존율을 확인하였을 때, 비교적 높은 농도인 10^(-6) g/㎖ 이하의 농도에서도 95% 이상의 생존을 보여서 실험에 사용된 모든 세포에 섬오가피 물추출물의 독성으로 인한 생존율의 변화는 거의 일어나지 않는 것을 확인하였다. Cytokine 분비 정도를 EILSA로 확인하였을 때, Raw 264.7 세포에 대한 섬오가피 줄기 추출물(SS-W) 경우는 TNF-α의 분비에 아무런 영향을 끼치지 않는 것으로 나타났지만 뿌리 물추출물(SR-W) 처리시에는 10^(-7) g/㎖에서 20% 정도의 감소를 보였다. TNF-α 분비 감소 결과는, SR-W가 항염증 물질의 암 예방제 연구 또는 염증 억제 성분의 분리 및 염증 반응 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 사료된다. Jurkat-T 세포에 대한 줄기 추출물(SS-W)처리에는, IL-2의 분비 증가를 확인 하였고, 이는 섬오가피 줄기 물추출물(SS-W)이 T 세포, NK 세포, B 세포에 작용하여 성장을 촉진하여 면역 증진 효과를 보일 것이라 판단 할 수 있다. Dendritic 세포의 myeloid 계열의 DC(DC-Ⅰ)와 lymphoid 계열의 DC(DC-Ⅱ)는 비교적 낮은 농도임에도 뿌리 물추출물(SR-W)처리시, IL-12의 분비를 보여, 이를 통해 대식세포, NK 세포, 세포독성 T 세포, B 세포 등의 활성이 증가 될 것이라 판단된다. 점막세포 IEC-6 세포의 IL-2의 분비는 뿌리(SS-W)와 줄기(SR-w)의 물추출물 모두에서 IL-2의 분비 증가가 다른 세포에서의 cytokine 분비 증가 보다 두드러지는 효과를 보였다. 이는 섬오가피 물추출물이 세균과 바이러스와 같은 외부 항원에 지속적으로 노출되는 장점막에서 항암관련 cytokine인 IL-2의 분비를 촉진함으로써, 점막 면역을 증진시킴을 예측할 수 있다. 본 연구에서는 이 결과를 통해, 섬오가피의 뿌리와 줄기 물추출물의 cytokine의 분비 조절 효과가 면역기능에 대한 약리적 효능으로 기인되며, NK 세포, 대식세포, 수지상 세포, T 세포등의 면역 세포들을 활성화하여 세포성 면역을 증강시킴으로써, 암치료의 부작용을 감소시키고, 치료효과를 높일 수 있는 유용한 자원으로의 가치가 있음을 제시하고자 한다.
Acanthopanax Koreanum have traditionally been used as a tonic, a sedative as well as in the treatment of rheumatism, hypertension and diabetes. Although the Acanthopanax has been studied intensively, we know less about Acanthopanax Koreanum as a therapeutic plant, especially as a possible immuno-mod...
Acanthopanax Koreanum have traditionally been used as a tonic, a sedative as well as in the treatment of rheumatism, hypertension and diabetes. Although the Acanthopanax has been studied intensively, we know less about Acanthopanax Koreanum as a therapeutic plant, especially as a possible immuno-modulating drug. This study was performed to investigate the potential of water extracts of stem (SSW) and root (SRW) of Acanthopanax Koreanum as a immuno-modulating function by assay of induction of cytokines (IL-2, TNF-α, IL-12) on immune cells (Raw 264.7, Jurkat-T, DC-Ⅰ, DC-Ⅱ) and intestinal epitherial cell (IEC-6). Cytotoxicity of SSW and SRW on cells was measured by MTT assay. All cells showed more than 90% of the cells survived at concentrations lower than 10-6 g/㎖. The results obtained showed that the selected concentration of the extracts had no major effect on the cells when compared to the controls. The immuno-modulating function was assessed by detection of cytokine secretion using ELISA. After all cells were stimulated by mitogens, LPS, PMA and ionomycin, co-cultured with different concentrations of SSW and SRW. SRW inhibited TNF-α secretion at the concentration of 10^(-7) g/㎖ in 0.5 ng/㎖ LPS-stimulated Raw 264.7 cells. In 1 μM PMA and 0.5 μM ionomycin-stimulated Jurkat-T cells, SSW increased IL-2 secretion at the concentration of more than 5×10^(-10) g/㎖, but SRW decreased IL-2 secretion. And in 100 ng/㎖ LPS-stimulated DC-Ⅰ and DC-Ⅱ, SRW not changed significantly but highly enhanced IL-12 secretion at low concentrations. In addition, in 10 ㎍/㎖ LPS-stimulated IEC-6 cells, both SSW and SRW induced remarkably increases of IL-2 secretion. These results indicate that Acanthopanax Koreanum has an anti-inflammatory activity through inhibition of pro-inflammatory cytokines, a possibility to alternate cell-mediated immune reaction and mucosal immunity. And these also show the possibility of Acanthopanax Koreanum as an immunologic adjuvant when it is used with appropriate amount for those who are suffered by cancer. However, The mechanism of the cytokine regulation of this agent and in study are remained as further studies.
Acanthopanax Koreanum have traditionally been used as a tonic, a sedative as well as in the treatment of rheumatism, hypertension and diabetes. Although the Acanthopanax has been studied intensively, we know less about Acanthopanax Koreanum as a therapeutic plant, especially as a possible immuno-modulating drug. This study was performed to investigate the potential of water extracts of stem (SSW) and root (SRW) of Acanthopanax Koreanum as a immuno-modulating function by assay of induction of cytokines (IL-2, TNF-α, IL-12) on immune cells (Raw 264.7, Jurkat-T, DC-Ⅰ, DC-Ⅱ) and intestinal epitherial cell (IEC-6). Cytotoxicity of SSW and SRW on cells was measured by MTT assay. All cells showed more than 90% of the cells survived at concentrations lower than 10-6 g/㎖. The results obtained showed that the selected concentration of the extracts had no major effect on the cells when compared to the controls. The immuno-modulating function was assessed by detection of cytokine secretion using ELISA. After all cells were stimulated by mitogens, LPS, PMA and ionomycin, co-cultured with different concentrations of SSW and SRW. SRW inhibited TNF-α secretion at the concentration of 10^(-7) g/㎖ in 0.5 ng/㎖ LPS-stimulated Raw 264.7 cells. In 1 μM PMA and 0.5 μM ionomycin-stimulated Jurkat-T cells, SSW increased IL-2 secretion at the concentration of more than 5×10^(-10) g/㎖, but SRW decreased IL-2 secretion. And in 100 ng/㎖ LPS-stimulated DC-Ⅰ and DC-Ⅱ, SRW not changed significantly but highly enhanced IL-12 secretion at low concentrations. In addition, in 10 ㎍/㎖ LPS-stimulated IEC-6 cells, both SSW and SRW induced remarkably increases of IL-2 secretion. These results indicate that Acanthopanax Koreanum has an anti-inflammatory activity through inhibition of pro-inflammatory cytokines, a possibility to alternate cell-mediated immune reaction and mucosal immunity. And these also show the possibility of Acanthopanax Koreanum as an immunologic adjuvant when it is used with appropriate amount for those who are suffered by cancer. However, The mechanism of the cytokine regulation of this agent and in study are remained as further studies.
주제어
#섬오가피(Acanthopanax koreanum) SS-W SR-W Raw 264.7 Jurkat-T dendritic 세포 IEC-6 cytokine TNF-α IL-2 항암 점막면역 ELISA 세포성 면역
학위논문 정보
저자
김자인
학위수여기관
대진대학교 교육대학원
학위구분
국내석사
학과
교육학 영양교육
지도교수
김옥경
발행연도
2007
총페이지
ⅵ, 51 p.
키워드
섬오가피(Acanthopanax koreanum) SS-W SR-W Raw 264.7 Jurkat-T dendritic 세포 IEC-6 cytokine TNF-α IL-2 항암 점막면역 ELISA 세포성 면역
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