인삼은 동양에서 예로부터 여러 가지 질병에 탁월한 효과가 있으며 의학발전에도 인삼의 효능이 널리 사용되어 진다. 그 중에서도 흑삼은 구증구포의 과정을 거쳐 다른 인삼에 비해 유효사포닌 성분을 가지고 있다. 또한 인삼은 예로부터 당뇨, 고혈압, 항산화와 항암에 탁월한 효과를 보였다. 이에 본 실험에서는 누드마우스에 간암세포주인 HepG2 세포를 이식하여 고형암 모델을 만들고 농도별 흑삼추출물을 투여하여 고형암 성장의 억제효과를 알아보고자 한다. in vitro에서 HepG2 cell에 대한 흑삼추출물의 cell viability, apoptotic cell death를 알아보기 위하여 ...
인삼은 동양에서 예로부터 여러 가지 질병에 탁월한 효과가 있으며 의학발전에도 인삼의 효능이 널리 사용되어 진다. 그 중에서도 흑삼은 구증구포의 과정을 거쳐 다른 인삼에 비해 유효사포닌 성분을 가지고 있다. 또한 인삼은 예로부터 당뇨, 고혈압, 항산화와 항암에 탁월한 효과를 보였다. 이에 본 실험에서는 누드마우스에 간암세포주인 HepG2 세포를 이식하여 고형암 모델을 만들고 농도별 흑삼추출물을 투여하여 고형암 성장의 억제효과를 알아보고자 한다. in vitro에서 HepG2 cell에 대한 흑삼추출물의 cell viability, apoptotic cell death를 알아보기 위하여 MTT assay, DAPI 염색을 실시하였다. in vivo에서는 HepG2 세포를 이식한 누드마우스 고형암모델에 흑삼추출물을 75, 150, 300 mg/kg의 용량으로 경구투여하고, 5주 동안 3일 간격으로 고형암의 경시적 크기를 측정하였다. 실험 종료 후 고형암을 채취하여 암의 크기와 무게를 측정하였고, TUNEL assay 및 western blot을 실시하였다. HepG2 세포에 있어 MTT assay를 실시한 결과 흑삼추출물은 농도 의존적(0∼200 g/ml)으로 세포의 성장을 억제 하였으며, DAPI 염색에 있어서는 농도 의존적으로 apoptosis가 증가함을 확인하였다. HepG2 세포를 이식한 누드마우스 고형암모델에 있어서 고형암의 무게는 대조군(0.93 ± 0.14 g)에 비하여 흑삼추출물을 75 mg/kg, 150 mg/kg 그리고 300 mg/kg의 농도로 투여한 실험군(0.62 ± 0.34 g, 0.62 ± 0.31 g 그리고 0.51 ± 0.24 g)에서 감소되었고, 부피 또한 대조군(0.84 ± 0.19 mm3)에 비하여 흑삼추출물을 투여한 실험군(0.56 ± 0.28 mm3, 0.59 ± 0.27mm3 그리고 0.52 ± 0.26 mm3)에서 감소됨을 확인하였다. 고형암 조직에서의 Apoptosis를 확인하기 위하여 TUNEL 염색을 실시한 결과 흑삼추출물 투여군에서 농도별 유의성 있는 증가를 확인하였다. 또한, western blot에서 대조군에 비하여 흑삼추출물을 투여한 군의 고형암에서 pro-apoptotic protein인 Bax-α, Caspase-3와 9의 발현이 증가하고, anti-apoptotic protein인 Bcl-2의 발현이 억제되는 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 흑삼추출물은 고형암 성장의 진행을 억제하는 것으로 사료된다.
인삼은 동양에서 예로부터 여러 가지 질병에 탁월한 효과가 있으며 의학발전에도 인삼의 효능이 널리 사용되어 진다. 그 중에서도 흑삼은 구증구포의 과정을 거쳐 다른 인삼에 비해 유효사포닌 성분을 가지고 있다. 또한 인삼은 예로부터 당뇨, 고혈압, 항산화와 항암에 탁월한 효과를 보였다. 이에 본 실험에서는 누드마우스에 간암세포주인 HepG2 세포를 이식하여 고형암 모델을 만들고 농도별 흑삼추출물을 투여하여 고형암 성장의 억제효과를 알아보고자 한다. in vitro에서 HepG2 cell에 대한 흑삼추출물의 cell viability, apoptotic cell death를 알아보기 위하여 MTT assay, DAPI 염색을 실시하였다. in vivo에서는 HepG2 세포를 이식한 누드마우스 고형암모델에 흑삼추출물을 75, 150, 300 mg/kg의 용량으로 경구투여하고, 5주 동안 3일 간격으로 고형암의 경시적 크기를 측정하였다. 실험 종료 후 고형암을 채취하여 암의 크기와 무게를 측정하였고, TUNEL assay 및 western blot을 실시하였다. HepG2 세포에 있어 MTT assay를 실시한 결과 흑삼추출물은 농도 의존적(0∼200 g/ml)으로 세포의 성장을 억제 하였으며, DAPI 염색에 있어서는 농도 의존적으로 apoptosis가 증가함을 확인하였다. HepG2 세포를 이식한 누드마우스 고형암모델에 있어서 고형암의 무게는 대조군(0.93 ± 0.14 g)에 비하여 흑삼추출물을 75 mg/kg, 150 mg/kg 그리고 300 mg/kg의 농도로 투여한 실험군(0.62 ± 0.34 g, 0.62 ± 0.31 g 그리고 0.51 ± 0.24 g)에서 감소되었고, 부피 또한 대조군(0.84 ± 0.19 mm3)에 비하여 흑삼추출물을 투여한 실험군(0.56 ± 0.28 mm3, 0.59 ± 0.27mm3 그리고 0.52 ± 0.26 mm3)에서 감소됨을 확인하였다. 고형암 조직에서의 Apoptosis를 확인하기 위하여 TUNEL 염색을 실시한 결과 흑삼추출물 투여군에서 농도별 유의성 있는 증가를 확인하였다. 또한, western blot에서 대조군에 비하여 흑삼추출물을 투여한 군의 고형암에서 pro-apoptotic protein인 Bax-α, Caspase-3와 9의 발현이 증가하고, anti-apoptotic protein인 Bcl-2의 발현이 억제되는 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 흑삼추출물은 고형암 성장의 진행을 억제하는 것으로 사료된다.
The root of Panax ginseng C.A. Meyer has been used as an traditional herbal medicine in the East Asia countries for the treatment of various diseases. Black ginseng extract (BGE), one of generally consumed types dried Korean ginseng, was carried out to examine the anti-tumor effects using the cytoto...
The root of Panax ginseng C.A. Meyer has been used as an traditional herbal medicine in the East Asia countries for the treatment of various diseases. Black ginseng extract (BGE), one of generally consumed types dried Korean ginseng, was carried out to examine the anti-tumor effects using the cytotoxicity and tumor regression models. The major aim of this study was to examine whether BGE induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells, the mechanisms related to cell death, and inhibits the growth of HepG2 cell transplanted tumor in regression model. The BGE decreased tetrazolium conversion by viable cells to formazan in a dose-dependent manner. The HepG2 cells exposed to BGE underwent morphological changes, displaying elongation and fragmentation, producing apoptotic bodies. These results undergo apoptosis associated with increased caspase-9, cleaved caspase-3 activity in tumor tissues and HepG2 cells. These apoptotic markers were suppressed by the addition of BGE increased the expression of bax and conversely decreased bcl-2 significantly in tumor tissues and HepG2 cells (p<0.01). The growth rates of tumor were slightly increased and the sizes of tumor were significantly reduced compared with those of the BGE group (300 mg/kg/body weight) (p<0.01). These results suggested that extract of BGE may have possible potentials with anti-tumor activities.
The root of Panax ginseng C.A. Meyer has been used as an traditional herbal medicine in the East Asia countries for the treatment of various diseases. Black ginseng extract (BGE), one of generally consumed types dried Korean ginseng, was carried out to examine the anti-tumor effects using the cytotoxicity and tumor regression models. The major aim of this study was to examine whether BGE induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells, the mechanisms related to cell death, and inhibits the growth of HepG2 cell transplanted tumor in regression model. The BGE decreased tetrazolium conversion by viable cells to formazan in a dose-dependent manner. The HepG2 cells exposed to BGE underwent morphological changes, displaying elongation and fragmentation, producing apoptotic bodies. These results undergo apoptosis associated with increased caspase-9, cleaved caspase-3 activity in tumor tissues and HepG2 cells. These apoptotic markers were suppressed by the addition of BGE increased the expression of bax and conversely decreased bcl-2 significantly in tumor tissues and HepG2 cells (p<0.01). The growth rates of tumor were slightly increased and the sizes of tumor were significantly reduced compared with those of the BGE group (300 mg/kg/body weight) (p<0.01). These results suggested that extract of BGE may have possible potentials with anti-tumor activities.
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