Chondroitin sulfate와 heparin등의 GAGs는 포유동물의 조직에서 널리 분포하고 있으며, 그에 따라 포유동물이 주 원료로 사용되어 왔다. 그러나 최근 여러 가지 질병으로 인한 안전성이 보장되지 않는 단점으로 인해 그 대상이 해양생물로 바뀌어 가고 있는 실정이다. 그러나 이 또한 원료의 단가가 매우 높고 주원료인 상어, 고래, 다랑어류의 어획량이 감소하고 있어 대체 자원의 탐색이 이루어져야 할 것으로 보인다. 따라서 본 연구는 남해안 일대에서 여름철에 어획되어 부산과 경남지역을 중심으로 특정 지역을 위주로 소비되는 군소를 이용해 GAGs를 추출 정제하고 그 기능성을 검색하고자 하였다. 군소의 ...
Chondroitin sulfate와 heparin등의 GAGs는 포유동물의 조직에서 널리 분포하고 있으며, 그에 따라 포유동물이 주 원료로 사용되어 왔다. 그러나 최근 여러 가지 질병으로 인한 안전성이 보장되지 않는 단점으로 인해 그 대상이 해양생물로 바뀌어 가고 있는 실정이다. 그러나 이 또한 원료의 단가가 매우 높고 주원료인 상어, 고래, 다랑어류의 어획량이 감소하고 있어 대체 자원의 탐색이 이루어져야 할 것으로 보인다. 따라서 본 연구는 남해안 일대에서 여름철에 어획되어 부산과 경남지역을 중심으로 특정 지역을 위주로 소비되는 군소를 이용해 GAGs를 추출 정제하고 그 기능성을 검색하고자 하였다. 군소의 PS 추출에서 가수분해 효소로는 Flavourzyme 500 MG가 가장 우수하였다. 당도 및 ethanol 사용량에 따른 영향을 알아본 결과 Brix는 60일 때 가장 우수한 추출율을 나타내었고, ethanol 사용량은 5배를 사용하였을 때 가장 효과적인 추출율을 나타내었다. 군소 PS를 위한 최적 조건은 Flavourzyme 500 MG를 이용하여 60℃에서 15시간 반응 후 Brix를 60으로 조절한 상태에서 ethanol을 5배량 사용이었다. Ion-chromatograpy를 통해 정제된 군소 GAGs는 N-acetylglucoamine, N-acetylgalactosamine이 70% 이상을 차지하는 다당복합체인 것을 확인 할 수 있었으며 주 구성분이 heparin 또는 heparan sulfate일 것으로 추정하고 있으며 이를 확인하기 위해서는 연구가 더 진행되어야 할 것으로 생각된다. 군소로부터 추출한 PS와 정제한 GAGs의 기능성을 확인해 본 결과 대식세포주인 RAW 264.7을 통해 세포독성은 보이지 않는 것으로 나타났으며, NO 생성량, TNF-a, IL-6 생성량을 증가시키는 것으로 나타났다. 이와 같은 결과는 군소 PS와 GAGs는 대식세포를 직접적으로 활성화 시켜 면역증강 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한 위암 세포주인 AGS를 통해 100 μg/mL 농도에서 배양 72시간 후 약 40%에 가까운 위암세포 성장 억제 효과 나타내었고, 정상세포 IEC-6에는 독성을 보이지 않았다. 따라서 군소로부터 추출 정제된 PS와 GAGs는 면역증강을 위한 기능성 식품 및 약제 원료로서의 개발 가능성을 보여 주었으며, 위암 치료제로서의 개발 가능성도 있을 것으로 여겨진다.
Chondroitin sulfate와 heparin등의 GAGs는 포유동물의 조직에서 널리 분포하고 있으며, 그에 따라 포유동물이 주 원료로 사용되어 왔다. 그러나 최근 여러 가지 질병으로 인한 안전성이 보장되지 않는 단점으로 인해 그 대상이 해양생물로 바뀌어 가고 있는 실정이다. 그러나 이 또한 원료의 단가가 매우 높고 주원료인 상어, 고래, 다랑어류의 어획량이 감소하고 있어 대체 자원의 탐색이 이루어져야 할 것으로 보인다. 따라서 본 연구는 남해안 일대에서 여름철에 어획되어 부산과 경남지역을 중심으로 특정 지역을 위주로 소비되는 군소를 이용해 GAGs를 추출 정제하고 그 기능성을 검색하고자 하였다. 군소의 PS 추출에서 가수분해 효소로는 Flavourzyme 500 MG가 가장 우수하였다. 당도 및 ethanol 사용량에 따른 영향을 알아본 결과 Brix는 60일 때 가장 우수한 추출율을 나타내었고, ethanol 사용량은 5배를 사용하였을 때 가장 효과적인 추출율을 나타내었다. 군소 PS를 위한 최적 조건은 Flavourzyme 500 MG를 이용하여 60℃에서 15시간 반응 후 Brix를 60으로 조절한 상태에서 ethanol을 5배량 사용이었다. Ion-chromatograpy를 통해 정제된 군소 GAGs는 N-acetylglucoamine, N-acetylgalactosamine이 70% 이상을 차지하는 다당복합체인 것을 확인 할 수 있었으며 주 구성분이 heparin 또는 heparan sulfate일 것으로 추정하고 있으며 이를 확인하기 위해서는 연구가 더 진행되어야 할 것으로 생각된다. 군소로부터 추출한 PS와 정제한 GAGs의 기능성을 확인해 본 결과 대식세포주인 RAW 264.7을 통해 세포독성은 보이지 않는 것으로 나타났으며, NO 생성량, TNF-a, IL-6 생성량을 증가시키는 것으로 나타났다. 이와 같은 결과는 군소 PS와 GAGs는 대식세포를 직접적으로 활성화 시켜 면역증강 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한 위암 세포주인 AGS를 통해 100 μg/mL 농도에서 배양 72시간 후 약 40%에 가까운 위암세포 성장 억제 효과 나타내었고, 정상세포 IEC-6에는 독성을 보이지 않았다. 따라서 군소로부터 추출 정제된 PS와 GAGs는 면역증강을 위한 기능성 식품 및 약제 원료로서의 개발 가능성을 보여 주었으며, 위암 치료제로서의 개발 가능성도 있을 것으로 여겨진다.
Glycosaminoglycans such as heparin and dermatan sulfate are usually extracted from mammalian tissues. Some have recently been isolated from marine invertebrates. Marine origin may constitute a safer alternative with no infectious risk due to viruses or to prions. In this study, we extracted a whole ...
Glycosaminoglycans such as heparin and dermatan sulfate are usually extracted from mammalian tissues. Some have recently been isolated from marine invertebrates. Marine origin may constitute a safer alternative with no infectious risk due to viruses or to prions. In this study, we extracted a whole polysaccharidic fraction from the Aplysia kurodai and screening its functional properties using cell lines. The most effective enzyme was Flavourzyme for extracting polysaccharides from Aplysia kurodai. And the optimum condition of hydrolysis was incubation at 60℃ for 15 hr. Precipitation of polysaccharides were depended on brix and ethanol volume. The most effective concentration of Brix was sixty and ethanol volume was three times. The purified sample from Aplysia kurodai extracts respected heparin or heparan sulfate. The functional activities of extracts were investigated using cell lines. The extracted polysaccharides and its fraction from DEAE-Sepharose fast flow 6B chromatography did not show the toxicity on RAW 264.7 cell line in the range of 10-200 ug/mL, but increased the cell growth rate. The extracted polysaccharides and its fraction also increased the formation of NO, interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α on RAW 264.7 cell. Particularly, the polysaccharides fraction inhibited the proliferation rate of stomach cancer cell line, AGS, up to 40% for 72 hr incubation, but did not the intestinal epitherial IEC-6 cell lines. The polysaccharides and its response from Aplysia kurodai suggest the potential source to increase immune function and to inhibit the proliferation rate of the stomach cancer.
Glycosaminoglycans such as heparin and dermatan sulfate are usually extracted from mammalian tissues. Some have recently been isolated from marine invertebrates. Marine origin may constitute a safer alternative with no infectious risk due to viruses or to prions. In this study, we extracted a whole polysaccharidic fraction from the Aplysia kurodai and screening its functional properties using cell lines. The most effective enzyme was Flavourzyme for extracting polysaccharides from Aplysia kurodai. And the optimum condition of hydrolysis was incubation at 60℃ for 15 hr. Precipitation of polysaccharides were depended on brix and ethanol volume. The most effective concentration of Brix was sixty and ethanol volume was three times. The purified sample from Aplysia kurodai extracts respected heparin or heparan sulfate. The functional activities of extracts were investigated using cell lines. The extracted polysaccharides and its fraction from DEAE-Sepharose fast flow 6B chromatography did not show the toxicity on RAW 264.7 cell line in the range of 10-200 ug/mL, but increased the cell growth rate. The extracted polysaccharides and its fraction also increased the formation of NO, interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α on RAW 264.7 cell. Particularly, the polysaccharides fraction inhibited the proliferation rate of stomach cancer cell line, AGS, up to 40% for 72 hr incubation, but did not the intestinal epitherial IEC-6 cell lines. The polysaccharides and its response from Aplysia kurodai suggest the potential source to increase immune function and to inhibit the proliferation rate of the stomach cancer.
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