우리나라에서 약용되는 전호(Angelica Decursivae Radix)의 대표적인 기원 식물로는 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)와 바디나물(자화전호) (Angelica decursiva Franchet et Savatier) 과 (토)전호 (Anthriscus sylvestris Hoffm.) 등이 알려져 있다. 바디나물(Angelica decursiva)은 미나리과에 속하는 다년생 식물로 제주, 전남, 전북, 경남, 경북, 충남, 충북에 야생하며, 일본 중국에 분포한다. 그러나 우리나라에 주로 임상에서 사용되어온 ...
우리나라에서 약용되는 전호(Angelica Decursivae Radix)의 대표적인 기원 식물로는 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)와 바디나물(자화전호) (Angelica decursiva Franchet et Savatier) 과 (토)전호 (Anthriscus sylvestris Hoffm.) 등이 알려져 있다. 바디나물(Angelica decursiva)은 미나리과에 속하는 다년생 식물로 제주, 전남, 전북, 경남, 경북, 충남, 충북에 야생하며, 일본 중국에 분포한다. 그러나 우리나라에 주로 임상에서 사용되어온 전호는 일명 토전호, 아삼 등으로 불리 우는 Anthriscus sylvestris 이다. Anthriscus sylvestris 는 제주도, 울릉도, 전남, 전북, 경기, 평남, 함북에 야생하며, 코카서스, 시베리아, 일본, 사할린, 만주, 중국에 분포한다. 전호는 대한약전의 한약(생약) 구격집에 수록되어 있으며 백화전호(Peucedanum praeruptorum Dunn)와 바디나물(Angelica decursiva Franchet et Savatier)의 뿌리를 사용하는 것으로 되어 있다. 전호의 성분으로는 lignan, polyacetylene, coumarin 유도체 등이 알려져 있으며, 해열, 거담, 진해, 진통약으로 감기로 인한 기침, 천식, 두통에 사용되고 있고, 근래 전호 lignan 성분의 암세포주에 대한 세포독성 등이 확인된 바 있다. 오늘날에는 사람의 여러 감염증 치료 뿐 아니라, 식품의 원료가 되는 소, 돼지, 닭 등의 가축 및 수산물 등의 사육과정에서도 상당량의 항생제가 사용되고 있어서 다양한 병원균이 여러 가지 약제에 내성을 갖게 되고, 관련 식품 및 가공품을 섭취한 사람들과 동물들에게 심각한 문제를 야기 시키기도 한다. 항균제 내성 출현 및 확산은 국민의 건강 뿐 아니라 세계적인 문제로 여겨지고 있는 만큼, 다제 내성균의 증가와 신종 내성균의 출현 등의 내성 확산 방지를 위해서는 지속적, 체계적인 감시와 내성 관련 연구가 활발히 진행 되어야한다. 화학구조에 따라 진정, 진통, 소염, 항균 등의 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 알려져 있는 식물의 휘발성 정유는 이미 다수의 성분들이 항균제로 개발되었다. 또한, 혼합물 상태인 정유분획도 각종 감염증의 치료에 사용되고 있어 기존 항생제에 내성이 생긴 균의 감염에 대비할 수 있는 새로운 천연 항균제 개발이 활발히 진행되어지고 있다. 이에 본 연구는 한국에 야생하는 (토)전호(Anthriscus sylvestris Hoffm.) 뿌리의 정유를 추출하여 GC-MS를 이용하여 성분을 분석하고, silica gel column chromatography를 이용하여 주성분인 myristicin과 terpinolene을 분리하여 그 구조를 확인하였다. 또한 전호정유와 단리한 성분 myristicin 및 terpinolene에 대해 미량 액체 배지 희석법을 통해 20 strain의 병원균에 대한 항균효과를 실험한 결과 모든 균에 대한 MICs가 0.5->8 ㎍/㎖로 나타났고, 항생제 내성, 감수성 구분 없이 소화기 감염균에 대해 비슷한 억제효과를 가짐을 알 수 있었고, 전호정유 fraction과 기존항생제인 ampicillin과 T/S와의 병용효과를 실험 했을 때 FICI는 0.14-2.0으로 나타나 전반적으로 상승, 상가효과를 나타내었다. 또한 전호에서 분리한 정유와 주성분인 myristicin, terpinolene에 의한 radical 소거 활성 능력을 측정하여 억제력을 IC50으로 나타낸 결과 전호정유는 1.00 ㎎/㎖로 높은 항산화 효과를 나타내었고, myristicin과 terpinolene 역시 각각 19.05 ㎎/㎖, 5.67 ㎎/㎖로 free radical 제거 능력이 확인되었다. (토)전호(Anthriscus sylvestris Hoffm.) 뿌리에서 추출한 정유와 분리한 주성분인 myristicin의 in vitro 에서의 세포 독성을 규명하기 위해 인체 암세포주인 간암(SK-Hep-1), 자궁경부암(HeLa) 및 유방암(MCF-7) 세포주를 이용하여 세포 생존율을 측정한 결과 암세포의 증식이 농도 의존적으로 억제 되었다. 암세포에 대하여 전호정유와 myristicin이 80 ㎍/㎖ 이상의 고농도에서 특히 증식 억제 효과가 뚜렷하게 나타났으며, 3종 암세포 모두 myristicin 보다 전호정유의 암세포 증식 억제효과가 조금 더 뚜렷하게 나타났고, 전호정유를 처리한 암세포의 형태 변화를 위상차 현미경으로 관찰한 결과, 시간이 경과할수록 농도 의존적으로 암세포의 수가 줄어들고, 모양이 변화는 등 전호정유의 뚜렷한 암세포 증식 억제효과를 관찰 할 수 있었다. 한편, RAW 264.7 cell를 이용하여 in vitro에서의 세포 생육 및 분화를 규명하기 위해 전호에서 추출한 정유와 주성분인 myristicin을 농도를 달리하여 첨가한 후 세포 생존율을 MTT assay로 측정한 결과 100 ㎍/㎖ 이하의 농도에서는 cell viability가 높아 안전한 농도임을 알 수 있었고, 전호에서 추출한 정유와 myristicin을 처리한 세포 배양액에서 NO생성 저해활성을 측정함으로써, 전호정유와 myristicin의 항염증 효과를 확인한 결과 농도 의존적으로 유의성 있는 NO생성 저해 효과를 나타냈다. 또한 RAW 264.7세포에 전호정유를 세포배양액에 첨가, 배양한 후 IL-6, IL-1β와 TNF-α의 생성량을 각각 관찰하였다. IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 경우 전호정유를 첨가한 군에서 정상군에 비해 생성량이 증가하는 경향을 보여 전호정유가 IL-6, IL-1β와 TNF-α의 생성에 영향을 주는 것으로 보였다. 이러한 결과로 미루어 보면, 전호정유는 항생제 내성, 감수성 구분 없이 소화기 감염균에 대해 비슷한 억제효과를 나타내었으며, 항균제들과의 병용에서도 전호정유는 상승․상가효과를 나타내었고, 이것은 항균제의 사용은
우리나라에서 약용되는 전호(Angelica Decursivae Radix)의 대표적인 기원 식물로는 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)와 바디나물(자화전호) (Angelica decursiva Franchet et Savatier) 과 (토)전호 (Anthriscus sylvestris Hoffm.) 등이 알려져 있다. 바디나물(Angelica decursiva)은 미나리과에 속하는 다년생 식물로 제주, 전남, 전북, 경남, 경북, 충남, 충북에 야생하며, 일본 중국에 분포한다. 그러나 우리나라에 주로 임상에서 사용되어온 전호는 일명 토전호, 아삼 등으로 불리 우는 Anthriscus sylvestris 이다. Anthriscus sylvestris 는 제주도, 울릉도, 전남, 전북, 경기, 평남, 함북에 야생하며, 코카서스, 시베리아, 일본, 사할린, 만주, 중국에 분포한다. 전호는 대한약전의 한약(생약) 구격집에 수록되어 있으며 백화전호(Peucedanum praeruptorum Dunn)와 바디나물(Angelica decursiva Franchet et Savatier)의 뿌리를 사용하는 것으로 되어 있다. 전호의 성분으로는 lignan, polyacetylene, coumarin 유도체 등이 알려져 있으며, 해열, 거담, 진해, 진통약으로 감기로 인한 기침, 천식, 두통에 사용되고 있고, 근래 전호 lignan 성분의 암세포주에 대한 세포독성 등이 확인된 바 있다. 오늘날에는 사람의 여러 감염증 치료 뿐 아니라, 식품의 원료가 되는 소, 돼지, 닭 등의 가축 및 수산물 등의 사육과정에서도 상당량의 항생제가 사용되고 있어서 다양한 병원균이 여러 가지 약제에 내성을 갖게 되고, 관련 식품 및 가공품을 섭취한 사람들과 동물들에게 심각한 문제를 야기 시키기도 한다. 항균제 내성 출현 및 확산은 국민의 건강 뿐 아니라 세계적인 문제로 여겨지고 있는 만큼, 다제 내성균의 증가와 신종 내성균의 출현 등의 내성 확산 방지를 위해서는 지속적, 체계적인 감시와 내성 관련 연구가 활발히 진행 되어야한다. 화학구조에 따라 진정, 진통, 소염, 항균 등의 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 알려져 있는 식물의 휘발성 정유는 이미 다수의 성분들이 항균제로 개발되었다. 또한, 혼합물 상태인 정유분획도 각종 감염증의 치료에 사용되고 있어 기존 항생제에 내성이 생긴 균의 감염에 대비할 수 있는 새로운 천연 항균제 개발이 활발히 진행되어지고 있다. 이에 본 연구는 한국에 야생하는 (토)전호(Anthriscus sylvestris Hoffm.) 뿌리의 정유를 추출하여 GC-MS를 이용하여 성분을 분석하고, silica gel column chromatography를 이용하여 주성분인 myristicin과 terpinolene을 분리하여 그 구조를 확인하였다. 또한 전호정유와 단리한 성분 myristicin 및 terpinolene에 대해 미량 액체 배지 희석법을 통해 20 strain의 병원균에 대한 항균효과를 실험한 결과 모든 균에 대한 MICs가 0.5->8 ㎍/㎖로 나타났고, 항생제 내성, 감수성 구분 없이 소화기 감염균에 대해 비슷한 억제효과를 가짐을 알 수 있었고, 전호정유 fraction과 기존항생제인 ampicillin과 T/S와의 병용효과를 실험 했을 때 FICI는 0.14-2.0으로 나타나 전반적으로 상승, 상가효과를 나타내었다. 또한 전호에서 분리한 정유와 주성분인 myristicin, terpinolene에 의한 radical 소거 활성 능력을 측정하여 억제력을 IC50으로 나타낸 결과 전호정유는 1.00 ㎎/㎖로 높은 항산화 효과를 나타내었고, myristicin과 terpinolene 역시 각각 19.05 ㎎/㎖, 5.67 ㎎/㎖로 free radical 제거 능력이 확인되었다. (토)전호(Anthriscus sylvestris Hoffm.) 뿌리에서 추출한 정유와 분리한 주성분인 myristicin의 in vitro 에서의 세포 독성을 규명하기 위해 인체 암세포주인 간암(SK-Hep-1), 자궁경부암(HeLa) 및 유방암(MCF-7) 세포주를 이용하여 세포 생존율을 측정한 결과 암세포의 증식이 농도 의존적으로 억제 되었다. 암세포에 대하여 전호정유와 myristicin이 80 ㎍/㎖ 이상의 고농도에서 특히 증식 억제 효과가 뚜렷하게 나타났으며, 3종 암세포 모두 myristicin 보다 전호정유의 암세포 증식 억제효과가 조금 더 뚜렷하게 나타났고, 전호정유를 처리한 암세포의 형태 변화를 위상차 현미경으로 관찰한 결과, 시간이 경과할수록 농도 의존적으로 암세포의 수가 줄어들고, 모양이 변화는 등 전호정유의 뚜렷한 암세포 증식 억제효과를 관찰 할 수 있었다. 한편, RAW 264.7 cell를 이용하여 in vitro에서의 세포 생육 및 분화를 규명하기 위해 전호에서 추출한 정유와 주성분인 myristicin을 농도를 달리하여 첨가한 후 세포 생존율을 MTT assay로 측정한 결과 100 ㎍/㎖ 이하의 농도에서는 cell viability가 높아 안전한 농도임을 알 수 있었고, 전호에서 추출한 정유와 myristicin을 처리한 세포 배양액에서 NO생성 저해활성을 측정함으로써, 전호정유와 myristicin의 항염증 효과를 확인한 결과 농도 의존적으로 유의성 있는 NO생성 저해 효과를 나타냈다. 또한 RAW 264.7세포에 전호정유를 세포배양액에 첨가, 배양한 후 IL-6, IL-1β와 TNF-α의 생성량을 각각 관찰하였다. IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 경우 전호정유를 첨가한 군에서 정상군에 비해 생성량이 증가하는 경향을 보여 전호정유가 IL-6, IL-1β와 TNF-α의 생성에 영향을 주는 것으로 보였다. 이러한 결과로 미루어 보면, 전호정유는 항생제 내성, 감수성 구분 없이 소화기 감염균에 대해 비슷한 억제효과를 나타내었으며, 항균제들과의 병용에서도 전호정유는 상승․상가효과를 나타내었고, 이것은 항균제의 사용은
The essential oils from the roots of Anthriscus sylvestris Hoffm. (Umbelliferae), were obtained by steam distillation, using a simultaneous steam distillation-extraction apparatus. The compositions of the oils were analyzed by GC-MS and its main component, myristicin and terpinolene were isolated fr...
The essential oils from the roots of Anthriscus sylvestris Hoffm. (Umbelliferae), were obtained by steam distillation, using a simultaneous steam distillation-extraction apparatus. The compositions of the oils were analyzed by GC-MS and its main component, myristicin and terpinolene were isolated from the essential oils by silica gel column chromatography. Its structure was elucidated by UV, FT-IR, GC-MS, 1H-NMR and 13C-NMR. As the results of MIC assay, the essential oils of A. sylvestris, myristicin and terpinolene exhibited inhibitory activity against 20 tested bacteria. The MICs against antibiotic-susceptible and resistant strains of all bacteria strains were 0.50->8.00 ㎎/㎖. The essential oil in combination with ampicillin and T/S exhibited significant synergism against all bacteria tested 0.14-2 FICI. Moreover, the essential oil in combination with T/S exhibited significant synergism against Vibrio harveyi CCARM 0111 with FICI 0.14 especially. The cytotoxic effects of the essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin on cultured SK-Hep-1, HeLa, and MCF-7 cell lines were determined by MTT assay. The morphological changes by the treatment of the compounds were also observed. As the results, the essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin exhibited significant cytotoxic effect on both of the tested cancer cell lines dose dependently. To investigate their anti-inflammatory mechanism RAW 264.7 cells were used. The cell viabilities were determined by MTT assay after treatment with various dilution of the tested essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin. The inhibition on nitric oxide production in the cells activated with lipopolysaccharide (LPS) was evaluated by reaction with Griess reagent. Both the essntial oil A. sylvestris and myristicin inhibited the production of nitric oxide. The effect on various cytokines released from the cells were also measured using ELISA. LPS- induced IL-1β and IL-6 production were decreased in a dose- dependent manner, but small effect on TNF-α was observed at the concentrations tested.
The essential oils from the roots of Anthriscus sylvestris Hoffm. (Umbelliferae), were obtained by steam distillation, using a simultaneous steam distillation-extraction apparatus. The compositions of the oils were analyzed by GC-MS and its main component, myristicin and terpinolene were isolated from the essential oils by silica gel column chromatography. Its structure was elucidated by UV, FT-IR, GC-MS, 1H-NMR and 13C-NMR. As the results of MIC assay, the essential oils of A. sylvestris, myristicin and terpinolene exhibited inhibitory activity against 20 tested bacteria. The MICs against antibiotic-susceptible and resistant strains of all bacteria strains were 0.50->8.00 ㎎/㎖. The essential oil in combination with ampicillin and T/S exhibited significant synergism against all bacteria tested 0.14-2 FICI. Moreover, the essential oil in combination with T/S exhibited significant synergism against Vibrio harveyi CCARM 0111 with FICI 0.14 especially. The cytotoxic effects of the essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin on cultured SK-Hep-1, HeLa, and MCF-7 cell lines were determined by MTT assay. The morphological changes by the treatment of the compounds were also observed. As the results, the essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin exhibited significant cytotoxic effect on both of the tested cancer cell lines dose dependently. To investigate their anti-inflammatory mechanism RAW 264.7 cells were used. The cell viabilities were determined by MTT assay after treatment with various dilution of the tested essential oil of A. sylvestris and its main component, myristicin. The inhibition on nitric oxide production in the cells activated with lipopolysaccharide (LPS) was evaluated by reaction with Griess reagent. Both the essntial oil A. sylvestris and myristicin inhibited the production of nitric oxide. The effect on various cytokines released from the cells were also measured using ELISA. LPS- induced IL-1β and IL-6 production were decreased in a dose- dependent manner, but small effect on TNF-α was observed at the concentrations tested.
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