Coenzyme Q10은 체내에서 에너지(ATP)를 만들어 내기 위한 필수 성분으로 강력한 항산화 기능뿐만 아니라 조직의 산소공급을 증대시키는 기능도 갖고 있다. Coenzyme Q10에 관한 다양한 연구들이 지속적으로 늘어나고 있으며 이에 따른 다양한 매트릭스에서의 coenzyme Q10의 농도를 정확하게 분석하는 분석법이 요구된다. Coenzyme Q10은 n-hexane으로 liquid-liquid extraction하였다. HPLC를 이용한 분석은 Luna phenyl-hexyl 컬럼(5 ㎛, 50 ㎜ x 2.0 ㎜)을 사용하였으며, 이동상은 2-propanol:100% acetonitrile with 0.1% formic acid (60:40, v/v) 혼합액을 사용하였다. 검출을 위한 분석방법은 ...
Coenzyme Q10은 체내에서 에너지(ATP)를 만들어 내기 위한 필수 성분으로 강력한 항산화 기능뿐만 아니라 조직의 산소공급을 증대시키는 기능도 갖고 있다. Coenzyme Q10에 관한 다양한 연구들이 지속적으로 늘어나고 있으며 이에 따른 다양한 매트릭스에서의 coenzyme Q10의 농도를 정확하게 분석하는 분석법이 요구된다. Coenzyme Q10은 n-hexane으로 liquid-liquid extraction하였다. HPLC를 이용한 분석은 Luna phenyl-hexyl 컬럼(5 ㎛, 50 ㎜ x 2.0 ㎜)을 사용하였으며, 이동상은 2-propanol:100% acetonitrile with 0.1% formic acid (60:40, v/v) 혼합액을 사용하였다. 검출을 위한 분석방법은 MRM 정량방법으로 coenzyme Q10과 내부표준물질로 사용한 coenzyme Q9의 mass transition은 각각 m/z 862.7→847.6, 794.5→779.5이었다. APCI 에서 negative ion mode를 이용하였다. 검량선 범위가 0.05 ~ 50 µg/mL인 직선성은 결정계수(r²)가 0.99 이상으로 양호하였으며 Coenzyme Q10의 일내(intra-day) 및 일간(inter-day) 정밀성의 변동계수(coefficients of variation)는 <3.17%, <6.04%으로 우수한 재현성을 나타내었고, 정확성 역시 회수율이 일내 및 일간 89.34% ~ 113.6%으로 우수한 정확성을 나타내었다. 단기온도(6시간), 냉•해동(-70℃에서 실온까지 3번의 냉•해동), 조제 후 (10℃에서 12시간)안정성에서 문제가 없는 것을 확인하였다. 최저정량한계는 0.05 µg/mL이었다. 따라서 본 연구에서 확립된 LC-MS/MS 분석법을 이용하면 혈장에서의 coenzyme Q10의 정확하고 신속한 분석이 가능할 것으로 판단된다.
Coenzyme Q10은 체내에서 에너지(ATP)를 만들어 내기 위한 필수 성분으로 강력한 항산화 기능뿐만 아니라 조직의 산소공급을 증대시키는 기능도 갖고 있다. Coenzyme Q10에 관한 다양한 연구들이 지속적으로 늘어나고 있으며 이에 따른 다양한 매트릭스에서의 coenzyme Q10의 농도를 정확하게 분석하는 분석법이 요구된다. Coenzyme Q10은 n-hexane으로 liquid-liquid extraction하였다. HPLC를 이용한 분석은 Luna phenyl-hexyl 컬럼(5 ㎛, 50 ㎜ x 2.0 ㎜)을 사용하였으며, 이동상은 2-propanol:100% acetonitrile with 0.1% formic acid (60:40, v/v) 혼합액을 사용하였다. 검출을 위한 분석방법은 MRM 정량방법으로 coenzyme Q10과 내부표준물질로 사용한 coenzyme Q9의 mass transition은 각각 m/z 862.7→847.6, 794.5→779.5이었다. APCI 에서 negative ion mode를 이용하였다. 검량선 범위가 0.05 ~ 50 µg/mL인 직선성은 결정계수(r²)가 0.99 이상으로 양호하였으며 Coenzyme Q10의 일내(intra-day) 및 일간(inter-day) 정밀성의 변동계수(coefficients of variation)는 <3.17%, <6.04%으로 우수한 재현성을 나타내었고, 정확성 역시 회수율이 일내 및 일간 89.34% ~ 113.6%으로 우수한 정확성을 나타내었다. 단기온도(6시간), 냉•해동(-70℃에서 실온까지 3번의 냉•해동), 조제 후 (10℃에서 12시간)안정성에서 문제가 없는 것을 확인하였다. 최저정량한계는 0.05 µg/mL이었다. 따라서 본 연구에서 확립된 LC-MS/MS 분석법을 이용하면 혈장에서의 coenzyme Q10의 정확하고 신속한 분석이 가능할 것으로 판단된다.
Coenzyme Q10 (Ubiquinone) is a vitamin-like substance, and found in the mitochondria of all living cells. Also recognized as a powerful systemic antioxidant that protects DNA, lipids and proteins from oxidative damage. Various analytical techniques have been employed for coenzyme Q10 analysis in sam...
Coenzyme Q10 (Ubiquinone) is a vitamin-like substance, and found in the mitochondria of all living cells. Also recognized as a powerful systemic antioxidant that protects DNA, lipids and proteins from oxidative damage. Various analytical techniques have been employed for coenzyme Q10 analysis in samples of biological origin. A simple, sensitive and rapid LC-MS/MS method was developed and validated for the determination of coenzyme Q10 in human plasma. Liquid–liquid extraction with n-hexane was used for the sample preparation. Luna phenyl-hexyl column (5 ㎛, 50 ㎜ x 2.0 ㎜) and the mobile phase of 2-propanol:100% acetonitrile with 0.1% formic acid (60:40, v/v) were used for the analysis. Quantitative analysis was performed in the multiple reaction monitoring mode at m/z 862.7→847.6 for coenzyme Q10 and m/z 794.5→779.5 for the coenzyme Q9 (IS). Negative ion mode using atmospheric pressure chemical ionization was used. The method has shown good linearity over the range of 0.05-50 µg/mL (r²>0.99). The intra- and inter-day precision of the QC samples were <3.17%, <6.04% (CV). The intra- and inter-day mean recovery of the QC samples ranged from 89.34% to 113.6%. The lower limit of quantitation (LLOQ) was 0.05 µg/mL and stability was very satisfactory. This validated method has been successfully used to analyze human plasma samples for application in pharmacokinetic studies.
Coenzyme Q10 (Ubiquinone) is a vitamin-like substance, and found in the mitochondria of all living cells. Also recognized as a powerful systemic antioxidant that protects DNA, lipids and proteins from oxidative damage. Various analytical techniques have been employed for coenzyme Q10 analysis in samples of biological origin. A simple, sensitive and rapid LC-MS/MS method was developed and validated for the determination of coenzyme Q10 in human plasma. Liquid–liquid extraction with n-hexane was used for the sample preparation. Luna phenyl-hexyl column (5 ㎛, 50 ㎜ x 2.0 ㎜) and the mobile phase of 2-propanol:100% acetonitrile with 0.1% formic acid (60:40, v/v) were used for the analysis. Quantitative analysis was performed in the multiple reaction monitoring mode at m/z 862.7→847.6 for coenzyme Q10 and m/z 794.5→779.5 for the coenzyme Q9 (IS). Negative ion mode using atmospheric pressure chemical ionization was used. The method has shown good linearity over the range of 0.05-50 µg/mL (r²>0.99). The intra- and inter-day precision of the QC samples were <3.17%, <6.04% (CV). The intra- and inter-day mean recovery of the QC samples ranged from 89.34% to 113.6%. The lower limit of quantitation (LLOQ) was 0.05 µg/mL and stability was very satisfactory. This validated method has been successfully used to analyze human plasma samples for application in pharmacokinetic studies.
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