대청엽을 기능성화장품의 소재로 이용하기 위하여 대청엽MeOH 추출물로부터 활성물질을 분리하고 분리된 화합물에 대하여 항산화 활성, 미백 활성, 주름개선 활성 및 항염증 활성을 확인하였다. 대청엽 추출물을 용매분획을 하고 각각의 분획에 대하여 활성을 검토한 결과 가장 우수한 활성을 나타낸 ethyl acetate 분획으로부터 활성물질을 분리하고 각각 tryptanthrin (1), 2-Pyridinol (2), Isovitexin (3), isatisine A (4), deoxyvasicinone (5), 5-hydroxyoxindole (6), 6-methyoxychromanone (7), 3,4'-dihydroxy-3',5'-dimethoxypropio phenone (8), cappariloside A (9), 3-(2'-hydroxyphenyl)-4-(3H)-quinazolinone (10), p-hydroxybenzoic acid (11)로 동정하였다. 대청엽 ...
대청엽을 기능성화장품의 소재로 이용하기 위하여 대청엽MeOH 추출물로부터 활성물질을 분리하고 분리된 화합물에 대하여 항산화 활성, 미백 활성, 주름개선 활성 및 항염증 활성을 확인하였다. 대청엽 추출물을 용매분획을 하고 각각의 분획에 대하여 활성을 검토한 결과 가장 우수한 활성을 나타낸 ethyl acetate 분획으로부터 활성물질을 분리하고 각각 tryptanthrin (1), 2-Pyridinol (2), Isovitexin (3), isatisine A (4), deoxyvasicinone (5), 5-hydroxyoxindole (6), 6-methyoxychromanone (7), 3,4'-dihydroxy-3',5'-dimethoxypropio phenone (8), cappariloside A (9), 3-(2'-hydroxyphenyl)-4-(3H)-quinazolinone (10), p-hydroxybenzoic acid (11)로 동정하였다. 대청엽 80% 에탄올의 페놀성 화합물 및 플라보노이드 함량을 측정한 결과 각각 80.98 및 48.76 mg/g으로 용매분획물 중에서 가장 함량이 높았다. 대청엽 ethyl acetate 분획물은 1,000 μg/mL의 농도에서 전자공여능과 ABTS 라디칼 소거 활성이 가장 우수하였다. 분리된 화합물의 항산화 활성을 측정한 결과 1, 2, 6 및 9는 대조물질인 vitamin C와 유사한 활성을 보여주었다. 미백효과를 확인하기 위하여 mushroom tyrosinase에 대한 저해활성을 조사한 결과 9는 53.36%, 1은 36.47%의 저해활성을 나타냈다. 멜라노마 세포에서 tyrosinase 저해활성 및 melanin 생합성에 대한 저해활성도 9와 1이 높은 활성을 나타냈다. 1 및 9는 melanin 합성에 관계된 tyrosinase 및 MITF의 단백질 발현을 효과적으로 감소시켰으며, 면역형광 염색법을 통해서도 화합물 1 및 화합물 9의 MITF 발현 감소 효과를 확인하였다. 주름개선 활성을 조사한 결과 1 및 2에서 각각 32.22 및 31.60%의 elastase 저해활성과 40.25 및 39.04%의 collagenase 저해활성을 나타내었다. 또한 화합물 11종의 섬유아세포에서의 collagen 생성효과를 측정한 결과 1 및 2가 42.63 및 42.31%로 높은 collagen 생합성효과를 나타내었으며, MMP-1의 발현율은 1과 2를 처리한 시험구에서 각각 47.0 및 50.4%로 낮은 효과를 나타냈다. 섬유아세포에 처리된 1 및 2의 농도가 증가할수록 MMP-1 단백질의 발현이 억제되고, COLA I 단백질의 발현이 증가하였으며, 섬유아세포 내에서의 AP-1의 단백질의 발현 정도를 c-fos 항체에 대한 염색으로 측정한 결과 1 및 2에 의해 c-fos의 형광 발현이 감소되었다. 따라서 대청엽의 주름개선효과는 화합물 1과 화합물 2에 의한 것으로 추측된다. 대청엽의 항염증 효과를 알아보기 위하여 대식세포 내에서 분리된 화합물 11종의 NO 저해활성을 측정한 결과 1과 6이 10 μM에서 64.34 및 65.34%로 우수한 NO 저해활성을 나타내었다. 또한 1과 6은 PGE₂와 TNF-α, IL-1β 및 IL-6와 같은 cytokine의 생성 저해 효과가 우수하였으며, iNOS 및 COX-2 단백질의 발현율 또한 농도 의존적으로 감소시키는 것을 확인하였다. NF-kB에 대한 면역형광 염색을 실시한 결과 1 및 6에 의해 NF-kB의 형광 발현이 감소되었다. 따라서 대청엽의 항염증효과는 화합물 1과 화합물 6에 의한 것으로 추측된다. 이상의 결과로부터 대청엽의 항산화효과, 미백효과, 주름개선효과 및 항염증효과가 확인되었으며, 각각의 활성물질도 확인되었다. 따라서, 대청엽은 기능성화장품의 우수한 첨가제로 사용할 수 있다고 사료된다.
대청엽을 기능성화장품의 소재로 이용하기 위하여 대청엽MeOH 추출물로부터 활성물질을 분리하고 분리된 화합물에 대하여 항산화 활성, 미백 활성, 주름개선 활성 및 항염증 활성을 확인하였다. 대청엽 추출물을 용매분획을 하고 각각의 분획에 대하여 활성을 검토한 결과 가장 우수한 활성을 나타낸 ethyl acetate 분획으로부터 활성물질을 분리하고 각각 tryptanthrin (1), 2-Pyridinol (2), Isovitexin (3), isatisine A (4), deoxyvasicinone (5), 5-hydroxyoxindole (6), 6-methyoxychromanone (7), 3,4'-dihydroxy-3',5'-dimethoxypropio phenone (8), cappariloside A (9), 3-(2'-hydroxyphenyl)-4-(3H)-quinazolinone (10), p-hydroxybenzoic acid (11)로 동정하였다. 대청엽 80% 에탄올의 페놀성 화합물 및 플라보노이드 함량을 측정한 결과 각각 80.98 및 48.76 mg/g으로 용매분획물 중에서 가장 함량이 높았다. 대청엽 ethyl acetate 분획물은 1,000 μg/mL의 농도에서 전자공여능과 ABTS 라디칼 소거 활성이 가장 우수하였다. 분리된 화합물의 항산화 활성을 측정한 결과 1, 2, 6 및 9는 대조물질인 vitamin C와 유사한 활성을 보여주었다. 미백효과를 확인하기 위하여 mushroom tyrosinase에 대한 저해활성을 조사한 결과 9는 53.36%, 1은 36.47%의 저해활성을 나타냈다. 멜라노마 세포에서 tyrosinase 저해활성 및 melanin 생합성에 대한 저해활성도 9와 1이 높은 활성을 나타냈다. 1 및 9는 melanin 합성에 관계된 tyrosinase 및 MITF의 단백질 발현을 효과적으로 감소시켰으며, 면역형광 염색법을 통해서도 화합물 1 및 화합물 9의 MITF 발현 감소 효과를 확인하였다. 주름개선 활성을 조사한 결과 1 및 2에서 각각 32.22 및 31.60%의 elastase 저해활성과 40.25 및 39.04%의 collagenase 저해활성을 나타내었다. 또한 화합물 11종의 섬유아세포에서의 collagen 생성효과를 측정한 결과 1 및 2가 42.63 및 42.31%로 높은 collagen 생합성효과를 나타내었으며, MMP-1의 발현율은 1과 2를 처리한 시험구에서 각각 47.0 및 50.4%로 낮은 효과를 나타냈다. 섬유아세포에 처리된 1 및 2의 농도가 증가할수록 MMP-1 단백질의 발현이 억제되고, COLA I 단백질의 발현이 증가하였으며, 섬유아세포 내에서의 AP-1의 단백질의 발현 정도를 c-fos 항체에 대한 염색으로 측정한 결과 1 및 2에 의해 c-fos의 형광 발현이 감소되었다. 따라서 대청엽의 주름개선효과는 화합물 1과 화합물 2에 의한 것으로 추측된다. 대청엽의 항염증 효과를 알아보기 위하여 대식세포 내에서 분리된 화합물 11종의 NO 저해활성을 측정한 결과 1과 6이 10 μM에서 64.34 및 65.34%로 우수한 NO 저해활성을 나타내었다. 또한 1과 6은 PGE₂와 TNF-α, IL-1β 및 IL-6와 같은 cytokine의 생성 저해 효과가 우수하였으며, iNOS 및 COX-2 단백질의 발현율 또한 농도 의존적으로 감소시키는 것을 확인하였다. NF-kB에 대한 면역형광 염색을 실시한 결과 1 및 6에 의해 NF-kB의 형광 발현이 감소되었다. 따라서 대청엽의 항염증효과는 화합물 1과 화합물 6에 의한 것으로 추측된다. 이상의 결과로부터 대청엽의 항산화효과, 미백효과, 주름개선효과 및 항염증효과가 확인되었으며, 각각의 활성물질도 확인되었다. 따라서, 대청엽은 기능성화장품의 우수한 첨가제로 사용할 수 있다고 사료된다.
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