갯기름나물 (Peucedanum japonicum Thunberg, 산형과)의 뿌리인 식방풍의 세 가지 지표성분 (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, 3',4'-disenecioylkhellactone)에 대한 동시분석이 가능하도록 HPLC-DAD 분석법을 확립하고, 그 신뢰성을 검증하였으며, 식방풍의 coumarin류 성분 20가지를 동시에 확인 가능한 UHPLC-MS/MS 분석을 실시하였다. 식방풍 시료의 최적화된 추출조건은 상온에서 ...
갯기름나물 (Peucedanum japonicum Thunberg, 산형과)의 뿌리인 식방풍의 세 가지 지표성분 (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, 3',4'-disenecioylkhellactone)에 대한 동시분석이 가능하도록 HPLC-DAD 분석법을 확립하고, 그 신뢰성을 검증하였으며, 식방풍의 coumarin류 성분 20가지를 동시에 확인 가능한 UHPLC-MS/MS 분석을 실시하였다. 식방풍 시료의 최적화된 추출조건은 상온에서 메탄올로 40분간 초음파추출법으로 하였다. HPLC-DAD 분석은 Optimapak C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) 칼럼으로 증류수와 아세토니트릴/메탄올 (9/1, v/v)의 기울기 용리조건으로 최적화하였고, DAD의 파장 322 nm에서 검출하였다. HPLC-DAD 분석법에 대하여 특이성, 직선성, 정확성 및 정밀성 (일내, 일간 검증), 정량한계, 회수율과 완건성 항목을 검증하였고, 결과가 적합한 기준 내에서 만족하였다. 식방풍에 존재하는 다수의 coumarin류 성분들에 대한 HPLC-DAD 및 UHPLC-MS/MS 분석을 실시하였으며, 그 결과 20가지의 coumarin류 성분을 확인하였고, MS/MS spectrum을 획득하였다. 유통 한약재 60종 (식방풍 33종, 방풍 2종 및 해방풍 25종)에 대한 지표성분 함량분석을 실시하였고, 선정한 식방풍의 지표성분이 특이성 있는 성분임을 확인하였다. 33종 식방풍에 대한 함량분석 결과를 바탕으로 함량기준을 설정하였고, peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside는 0.036%, hyuganin C는 0.107% 그리고 3',4'-disenecioylkhellactone는 0.099% 이상이 적합할 것으로 사료된다. 시료를 기원식물별, 산지별로 구별하기 위하여 다변량 통계분석법의 일종인 주성분분석과 군집분석을 활용하여 패턴분석을 실시하였으며, 기원식물에 따라 식방풍과 방풍, 해방풍에 명확하게 구분되었다. 본 연구에서 개발된 HPLC-DAD 분석법은 한약재를 모니터링하고 품질평가를 하는데 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
갯기름나물 (Peucedanum japonicum Thunberg, 산형과)의 뿌리인 식방풍의 세 가지 지표성분 (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, 3',4'-disenecioylkhellactone)에 대한 동시분석이 가능하도록 HPLC-DAD 분석법을 확립하고, 그 신뢰성을 검증하였으며, 식방풍의 coumarin류 성분 20가지를 동시에 확인 가능한 UHPLC-MS/MS 분석을 실시하였다. 식방풍 시료의 최적화된 추출조건은 상온에서 메탄올로 40분간 초음파추출법으로 하였다. HPLC-DAD 분석은 Optimapak C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) 칼럼으로 증류수와 아세토니트릴/메탄올 (9/1, v/v)의 기울기 용리조건으로 최적화하였고, DAD의 파장 322 nm에서 검출하였다. HPLC-DAD 분석법에 대하여 특이성, 직선성, 정확성 및 정밀성 (일내, 일간 검증), 정량한계, 회수율과 완건성 항목을 검증하였고, 결과가 적합한 기준 내에서 만족하였다. 식방풍에 존재하는 다수의 coumarin류 성분들에 대한 HPLC-DAD 및 UHPLC-MS/MS 분석을 실시하였으며, 그 결과 20가지의 coumarin류 성분을 확인하였고, MS/MS spectrum을 획득하였다. 유통 한약재 60종 (식방풍 33종, 방풍 2종 및 해방풍 25종)에 대한 지표성분 함량분석을 실시하였고, 선정한 식방풍의 지표성분이 특이성 있는 성분임을 확인하였다. 33종 식방풍에 대한 함량분석 결과를 바탕으로 함량기준을 설정하였고, peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside는 0.036%, hyuganin C는 0.107% 그리고 3',4'-disenecioylkhellactone는 0.099% 이상이 적합할 것으로 사료된다. 시료를 기원식물별, 산지별로 구별하기 위하여 다변량 통계분석법의 일종인 주성분분석과 군집분석을 활용하여 패턴분석을 실시하였으며, 기원식물에 따라 식방풍과 방풍, 해방풍에 명확하게 구분되었다. 본 연구에서 개발된 HPLC-DAD 분석법은 한약재를 모니터링하고 품질평가를 하는데 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
A high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD) method was developed and validated for the simultaneous analysis of 3 marker compounds (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, and 3',4'-disenecioylkhellactone) of Peucedani japonici Radix, which is the root of P...
A high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD) method was developed and validated for the simultaneous analysis of 3 marker compounds (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, and 3',4'-disenecioylkhellactone) of Peucedani japonici Radix, which is the root of Peucedanum japonicum Thunberg (Umbelliferae). Extraction conditions were optimized by sonication with methanol for 40 minutes at room temperature. The chromatographic separation was performed on an Optimapak C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) with a gradient elution of water and acetonitrile/methanol (9/1, v/v). The extract was detected by DAD at the wavelength of 322 nm. The method was validated by assessing specificity, linearity, accuracy & precision (intra- and inter-day), limit of quantitation (LOQ), recovery and robustness. All the results were within the required criteria. Also, a UHPLC-MS/MS using Q Exactive orbitrap mass spectrometer was conducted to identify many of coumarins in Peucedani japonici Radix. As a results, Full MS and MS/MS spectrum of coumarins were obtained by UHPLC-MS/MS system. A total of 60 medicinal herbs (33 samples of Peucedani japonici Radix, 2 of Saposhnikoviae Radix, 25 of Glehniae Radix) were analyzed by the developed method, and it was found that the contents of marker compounds differed greatly. Multivariate statistical methods, such as principal component analysis (PCA) and cluster analysis (CA), were used to characterize the medicinal herbs origin. As a result, Peucedani japonici Radix was clearly distinguished from Saposhnikoviae Radix and Glehniae Radix. This study was successfully applied to monitoring and quality control of Peucedani japonici Radix as compared with Saposhnikoviae Radix and Glehniae Radix.
A high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD) method was developed and validated for the simultaneous analysis of 3 marker compounds (peucedanol-7-O-β-D-glucopyranoside, hyuganin C, and 3',4'-disenecioylkhellactone) of Peucedani japonici Radix, which is the root of Peucedanum japonicum Thunberg (Umbelliferae). Extraction conditions were optimized by sonication with methanol for 40 minutes at room temperature. The chromatographic separation was performed on an Optimapak C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) with a gradient elution of water and acetonitrile/methanol (9/1, v/v). The extract was detected by DAD at the wavelength of 322 nm. The method was validated by assessing specificity, linearity, accuracy & precision (intra- and inter-day), limit of quantitation (LOQ), recovery and robustness. All the results were within the required criteria. Also, a UHPLC-MS/MS using Q Exactive orbitrap mass spectrometer was conducted to identify many of coumarins in Peucedani japonici Radix. As a results, Full MS and MS/MS spectrum of coumarins were obtained by UHPLC-MS/MS system. A total of 60 medicinal herbs (33 samples of Peucedani japonici Radix, 2 of Saposhnikoviae Radix, 25 of Glehniae Radix) were analyzed by the developed method, and it was found that the contents of marker compounds differed greatly. Multivariate statistical methods, such as principal component analysis (PCA) and cluster analysis (CA), were used to characterize the medicinal herbs origin. As a result, Peucedani japonici Radix was clearly distinguished from Saposhnikoviae Radix and Glehniae Radix. This study was successfully applied to monitoring and quality control of Peucedani japonici Radix as compared with Saposhnikoviae Radix and Glehniae Radix.
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