경제수입의 증가와 생활수준의 향상에 따라 외모에 대한 관심이 높아지고, 동시에 의학 기술의 발달로 평균수명이 늘어남에 따라 최근 피부노화를 완화하거나 지연시키는 화장품에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. Rutin은 모세혈관확장피부 개선을 위한 화장품 성분으로는 사용되어 왔으나 노화완화 효능에 관한 성분의 연구는 아직까지 미비한 상태이다. 따라서 본 연구에서는 플라보노이드 항산화제인 Quercetin의 배당체로 알려진 rutin을 연구 대상으로 선정하여 세포효력시험과 인체적용시험을 적용하여 노화를 완화하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(human dermal fibroblasts; HDFs)에 대한 rutin의 노화 완화작용을 검증하는 데 목적이 있다. Rutin의 효능을 검증하기 위해 세포 생존율, ...
경제수입의 증가와 생활수준의 향상에 따라 외모에 대한 관심이 높아지고, 동시에 의학 기술의 발달로 평균수명이 늘어남에 따라 최근 피부노화를 완화하거나 지연시키는 화장품에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. Rutin은 모세혈관확장피부 개선을 위한 화장품 성분으로는 사용되어 왔으나 노화완화 효능에 관한 성분의 연구는 아직까지 미비한 상태이다. 따라서 본 연구에서는 플라보노이드 항산화제인 Quercetin의 배당체로 알려진 rutin을 연구 대상으로 선정하여 세포효력시험과 인체적용시험을 적용하여 노화를 완화하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(human dermal fibroblasts; HDFs)에 대한 rutin의 노화 완화작용을 검증하는 데 목적이 있다. Rutin의 효능을 검증하기 위해 세포 생존율, SA-β-galactosidase assay, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), ROS 변화를 확인하였다. 1, 10, 50 µM 농도의 rutin은 HDFs에 대한 독성이 없었다. Rutin을 3시간 전처리하면 H2O2에 의해 감소한 cell viability가 농도의존적으로 증가되어, rutin이 손상된 세포의 회복에 효과가 있음을 확인하였다. HDFs에 H2O2를 처리하여 유도된 세포노화 실험에서 rutin 농도의존적으로 노화세포가 감소함을 확인하였다. H2O2에 의해 증가된 ROS는 rutin 처리에 의해 감소함을 확인하였다. H2O2에 의해 감소한 대표적 항산화 효소인 SOD1 mRNA와 CAT mRNA의 발현이 rutin 농도의존적으로 회복됨을 확인하였다. 그리고 H2O2에 의해 감소한 COL1A1 mRNA의 발현이 rutin 농도의존적으로 회복하였고, 증가된 MMP-1 mRNA의 발현은 감소함을 확인하였다. 이러한 결과들은 rutin이 피부의 노화작용을 효과적으로 완화함을 보여주는 것이다. Rutin의 피부개선 효능을 검증하기 위하여 인체적용 시험을 실시하였다. 시험은 이중맹검법으로 진행하였고, 시험물질은 4주 동안 사용하였다. 실험군의 보습 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 34.30%, 사용 4주 후 51.73%로 현저히 증가되었다. 실험군의 경피수분손실량 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 8.70%, 사용 4주 후 28.07%로 증가되었다. 실험군의 진피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 6.23%, 사용 4주 후 10.76%로 증가되었다. 실험군의 진피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 10.73%, 사용 4주 후 20.16%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 길이 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 13.45%, 사용 4주 후 23.90%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 면적 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 14.66%, 사용 4주 후 27.19%로 증가되었다. 실험군의 눈밑 주름 갯수 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 31.96%, 사용 4주 후 49.48%로 증가되었다. 실험군의 피부 탄력도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 25.34%, 사용 4주 후 40.50%로 증가되었다. 따라서 rutin이 피부탄력과 주름개선에 도움을 주는 효능이 있음을 확인하였으며, 앞으로 rutin이 주름개선용 기능성 화장품 소재로서 사용가치가 클 것이라 사료된다.
경제수입의 증가와 생활수준의 향상에 따라 외모에 대한 관심이 높아지고, 동시에 의학 기술의 발달로 평균수명이 늘어남에 따라 최근 피부노화를 완화하거나 지연시키는 화장품에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. Rutin은 모세혈관확장피부 개선을 위한 화장품 성분으로는 사용되어 왔으나 노화완화 효능에 관한 성분의 연구는 아직까지 미비한 상태이다. 따라서 본 연구에서는 플라보노이드 항산화제인 Quercetin의 배당체로 알려진 rutin을 연구 대상으로 선정하여 세포효력시험과 인체적용시험을 적용하여 노화를 완화하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(human dermal fibroblasts; HDFs)에 대한 rutin의 노화 완화작용을 검증하는 데 목적이 있다. Rutin의 효능을 검증하기 위해 세포 생존율, SA-β-galactosidase assay, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), ROS 변화를 확인하였다. 1, 10, 50 µM 농도의 rutin은 HDFs에 대한 독성이 없었다. Rutin을 3시간 전처리하면 H2O2에 의해 감소한 cell viability가 농도의존적으로 증가되어, rutin이 손상된 세포의 회복에 효과가 있음을 확인하였다. HDFs에 H2O2를 처리하여 유도된 세포노화 실험에서 rutin 농도의존적으로 노화세포가 감소함을 확인하였다. H2O2에 의해 증가된 ROS는 rutin 처리에 의해 감소함을 확인하였다. H2O2에 의해 감소한 대표적 항산화 효소인 SOD1 mRNA와 CAT mRNA의 발현이 rutin 농도의존적으로 회복됨을 확인하였다. 그리고 H2O2에 의해 감소한 COL1A1 mRNA의 발현이 rutin 농도의존적으로 회복하였고, 증가된 MMP-1 mRNA의 발현은 감소함을 확인하였다. 이러한 결과들은 rutin이 피부의 노화작용을 효과적으로 완화함을 보여주는 것이다. Rutin의 피부개선 효능을 검증하기 위하여 인체적용 시험을 실시하였다. 시험은 이중맹검법으로 진행하였고, 시험물질은 4주 동안 사용하였다. 실험군의 보습 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 34.30%, 사용 4주 후 51.73%로 현저히 증가되었다. 실험군의 경피수분손실량 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 8.70%, 사용 4주 후 28.07%로 증가되었다. 실험군의 진피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 6.23%, 사용 4주 후 10.76%로 증가되었다. 실험군의 진피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 10.73%, 사용 4주 후 20.16%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 길이 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 13.45%, 사용 4주 후 23.90%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 면적 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 14.66%, 사용 4주 후 27.19%로 증가되었다. 실험군의 눈밑 주름 갯수 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 31.96%, 사용 4주 후 49.48%로 증가되었다. 실험군의 피부 탄력도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 2주 후 25.34%, 사용 4주 후 40.50%로 증가되었다. 따라서 rutin이 피부탄력과 주름개선에 도움을 주는 효능이 있음을 확인하였으며, 앞으로 rutin이 주름개선용 기능성 화장품 소재로서 사용가치가 클 것이라 사료된다.
Paying more attention to our appearance by the increase of average real incomes and improvement of living standard, studies on anti-aging cosmetics are active with longer life expectancies followed by the development of medical technology. Despite the excellent efficacy of rutin which is commonly tr...
Paying more attention to our appearance by the increase of average real incomes and improvement of living standard, studies on anti-aging cosmetics are active with longer life expectancies followed by the development of medical technology. Despite the excellent efficacy of rutin which is commonly treated as anti-aging cosmetics ingredients to improve hemotelangiosis skin, studies for efficacy of anti-aging improvement are still inadequate. The study selects rutin which is known as glycoside of quercetin (antioxidant flavonoid) as research subject in order to verify its efficacy on skin anti-aging by examining human body application and cell effectiveness. The aim of the in vitro assay is verifying the anti-aging action of rutin on the human dermal fibroblasts (HDFs). We confirmed the effects of rutin using cell viability, SA-β-galactosidase assay, quantitative real-time PCR and ROS formation were implemented to investigate the efficacy of rutin. Rutin at concentrations of 1, 10 and 50 µM did not affect cell viability. A 3 h-pretreatment with rutin at 1, 10 and 50 µM showed a significant protective effect against H2O2 irradiation induced loss of cell viability and rutin was effective for the recovery of damaged cells. It was found that rutin reduced senescence cells in H2O2–induced HDFs in SA-β-gal positive cells. Increased ROS by H2O2 radiation were removed by the treatment of rutin. It is confirmed that pretreating rutin to HDFs induces SOD1 mRNA and CAT mRNA expression. Expression of MMP1 was decreased but COL1A1 was increased under the same condition. This result shows that rutin have anti-aging effect on skin. To examine rutin’s effect of improving the skin, this work conducted clinical trial. The clinical study was carried out into double-blind test and the test material was used for 4 weeks. The moisture enhancement rate of the experimental group, it drastically increased to 34.30% for 2 weeks after the use and to 51.73% for 4 weeks after the use. The improvement rate of TEWL of the experimental group were increased to 8.70% (2 weeks after the use) and 28.07% (4 weeks). The improvement rate of dermal thickness and dermal density of the experimental group were increased to 6.23% (2 weeks after the use) and 10.76% (4 weeks), and 10.73% (2 weeks) and 20.16% (4 weeks), respectively. The improvement rate of crow's feet length and crow’s feet area of the experimental group were increased to 13.45% (2 weeks after the use) and 23.90% (4 weeks), 14.66% (2 weeks) and 27.19% (4 weeks). The improvement rate(%) of under eye wrinkle of the experimental group increased to 31.96% (2 weeks after the use) and 49.48% (4 weeks), respectively. The improvement rate of skin elasticity of the experimental group were increased to 25.34% (2 weeks after the use) and 40.50% (4 weeks). Such results show that rutin have effect on improving the skin moisture, TEWL, thickness, density, wrinkles and elasticity of the skin. Therefore, rutin is effective in the skin anti-wrinkles and elasticity, and it is considered that rutin have indefinite value of use as anti-wrinkles cosmetics ingredients in the future.
Paying more attention to our appearance by the increase of average real incomes and improvement of living standard, studies on anti-aging cosmetics are active with longer life expectancies followed by the development of medical technology. Despite the excellent efficacy of rutin which is commonly treated as anti-aging cosmetics ingredients to improve hemotelangiosis skin, studies for efficacy of anti-aging improvement are still inadequate. The study selects rutin which is known as glycoside of quercetin (antioxidant flavonoid) as research subject in order to verify its efficacy on skin anti-aging by examining human body application and cell effectiveness. The aim of the in vitro assay is verifying the anti-aging action of rutin on the human dermal fibroblasts (HDFs). We confirmed the effects of rutin using cell viability, SA-β-galactosidase assay, quantitative real-time PCR and ROS formation were implemented to investigate the efficacy of rutin. Rutin at concentrations of 1, 10 and 50 µM did not affect cell viability. A 3 h-pretreatment with rutin at 1, 10 and 50 µM showed a significant protective effect against H2O2 irradiation induced loss of cell viability and rutin was effective for the recovery of damaged cells. It was found that rutin reduced senescence cells in H2O2–induced HDFs in SA-β-gal positive cells. Increased ROS by H2O2 radiation were removed by the treatment of rutin. It is confirmed that pretreating rutin to HDFs induces SOD1 mRNA and CAT mRNA expression. Expression of MMP1 was decreased but COL1A1 was increased under the same condition. This result shows that rutin have anti-aging effect on skin. To examine rutin’s effect of improving the skin, this work conducted clinical trial. The clinical study was carried out into double-blind test and the test material was used for 4 weeks. The moisture enhancement rate of the experimental group, it drastically increased to 34.30% for 2 weeks after the use and to 51.73% for 4 weeks after the use. The improvement rate of TEWL of the experimental group were increased to 8.70% (2 weeks after the use) and 28.07% (4 weeks). The improvement rate of dermal thickness and dermal density of the experimental group were increased to 6.23% (2 weeks after the use) and 10.76% (4 weeks), and 10.73% (2 weeks) and 20.16% (4 weeks), respectively. The improvement rate of crow's feet length and crow’s feet area of the experimental group were increased to 13.45% (2 weeks after the use) and 23.90% (4 weeks), 14.66% (2 weeks) and 27.19% (4 weeks). The improvement rate(%) of under eye wrinkle of the experimental group increased to 31.96% (2 weeks after the use) and 49.48% (4 weeks), respectively. The improvement rate of skin elasticity of the experimental group were increased to 25.34% (2 weeks after the use) and 40.50% (4 weeks). Such results show that rutin have effect on improving the skin moisture, TEWL, thickness, density, wrinkles and elasticity of the skin. Therefore, rutin is effective in the skin anti-wrinkles and elasticity, and it is considered that rutin have indefinite value of use as anti-wrinkles cosmetics ingredients in the future.
주제어
#Rutin Anti-aging Anti-wrinkle Elasticity Human dermal fibroblast
학위논문 정보
저자
이성내
학위수여기관
건국대학교 대학원
학위구분
국내박사
학과
생물공학 향장생물
지도교수
안성관
발행연도
2014
총페이지
79
키워드
Rutin Anti-aging Anti-wrinkle Elasticity Human dermal fibroblast
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