인삼 (Panax ginseng)은 2000년이 넘는 기간 동안 동아시아에서 매우 중요한 천연물로 알려져 왔고, 현재도 전 세계적으로 광범위하게 사용되고 있는 약초이다. 인삼의 주된 성분은 ginsenosides로서 그 종류와 약리적 효능에 대해서 다양한 연구가 진행되고 있다. 인삼 중에서 한국에 자생하는 고려인삼은 심장질환, 관절염과 당뇨병 등을 포함한 다양한 질병에 약리적 효능이 뛰어난 것으로 알려져 있다. 특히 수삼을 쪄서 말린 형태의 홍삼은 다른 인삼 종류에서 발견되지 않는 특정 ginsenosides가 있다는 여러 연구 보고가 있다. 홍삼은 인삼을 찌고 말리는 과정에서 생겨나는 화학적으로 변화된 생리활성물질들에 의해 인삼과 차별화된 효과를 보여준다. 또한 홍삼은 ...
인삼 (Panax ginseng)은 2000년이 넘는 기간 동안 동아시아에서 매우 중요한 천연물로 알려져 왔고, 현재도 전 세계적으로 광범위하게 사용되고 있는 약초이다. 인삼의 주된 성분은 ginsenosides로서 그 종류와 약리적 효능에 대해서 다양한 연구가 진행되고 있다. 인삼 중에서 한국에 자생하는 고려인삼은 심장질환, 관절염과 당뇨병 등을 포함한 다양한 질병에 약리적 효능이 뛰어난 것으로 알려져 있다. 특히 수삼을 쪄서 말린 형태의 홍삼은 다른 인삼 종류에서 발견되지 않는 특정 ginsenosides가 있다는 여러 연구 보고가 있다. 홍삼은 인삼을 찌고 말리는 과정에서 생겨나는 화학적으로 변화된 생리활성물질들에 의해 인삼과 차별화된 효과를 보여준다. 또한 홍삼은 장내미생물의 생물학적 전환에 의해 변화되어 생체 내 약리활성을 보이는데, 이는 개인의 장내 미생물의 분포 차이에 의해 약리작용에서도 차이를 보일 수 있다. 홍삼이나 홍삼을 다시 효소에 의해 발효시킨 발효홍삼은 인삼의 주성분이 ginsenoside Rb1, Rg1인 것과 달리 ginsenoside Rg3를 주성분으로 하고 있다는 특징이 있다. 이러한 ginsenoside Rg3는 장내 미생물에 의해 ginsenoside Rh2로 대사되는 것으로 알려져 있다. 많은 전임상이나 임상 연구를 통하여 발효홍삼은 여러 만성질환이나 노화과정에서 약화되는 면역기능을 항진시키는데 효과가 있음이 밝혀졌고, 심장질환, 암, 당뇨병, 간독성 그리고 면역질환과 같은 병리학적 질환에 광범위하게 사용되면서 그 치료 효과가 입증되고 있다. 이러한 약리적 효능에 대한 연구에도 불구하고 고려인삼이나 가공하여 만든 고려홍삼, 발효홍삼 등에 대해서 임상연구와 약동학적 연구, 대사경로에 대한 구명은 제대로 이루어지고 있지 않고 있다. Ginsenoside가 체내에서 어떻게 대사되어 작용하는 지에 대한 전반적인 연구가 부족한 실정이다. 인삼에 대해서도 대부분의 연구들이 일부 ginsenoside의 대사경로 구명에 대해서만 진행되어, 전체적인 발효홍삼의 ginsenoside 대사경로에 대한 연구가 필요하다. 또한, 고려인삼이나 고려홍삼, 발효홍삼의 우수성에 대해서는 오래전부터 알려져 있으나 과학적 근거가 부족한 실정이라 발효된 고려홍삼의 한국인을 대상으로 한 약동학 연구 자료가 필요하다. 본 연구에서는 LC-MS/MS의 고감도의 신속하고 정확한 방법을 이용하여 ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 혈중 분석법에 대해서 개발을 하였다. 개발된 분석법은 생체시료 분석법 가이드라인에 따라 정확성, 정밀성, 직선성과 검출한계 등을 검증하였다. 혈장시료로부터 분석한 ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 검량선은 모두 r2≥0.999이었고, ginsenoside Rb1은 10-500 ng/mL에서 그리고 ginsenoside Rg1과 20(S)-ginsenoside Rh2는 1-500 ng/mL 범위에서 양호한 직선성을 나타내었다. Ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 LC-MS/MS분석법의 타당성을 입증하기 위한 검증한 결과 일내 재현성과 일간 재현성의 평균 정밀성과 정확성이 모두 기준값(15%) 이내에 들어 이 분석법은 충분한 감도와 정확성 및 정밀성이 있는 것으로 판단되었다. 따라서 LC-MS/MS 분석법을 이용한 인체 혈장 내의 ginsenoside Rb1, Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2 각각을 정량한 본 시험법은 적합한 시험법임을 확인하였다. 또한, 검증한 분석법으로 발효 고려홍삼 (ginsenoside Rb1: 0.95 mg/g, ginsenoside Rg1: 0.98 mg/g, 20(S)-ginsenoside Rg3: 0.19 mg/g)을 경구 투여한 건강한 한국인 피험자로부터 20(S)-ginsenoside Rg3와 대사체로 알려진 20(S)-ginsenoside Rh2의 혈중 농도를 측정하여 약동학 연구를 하였다. 그 결과 혈중에서 20(S)-ginsenoside Rg3는 검출되지 않았으나 20(S)-ginsenoside Rh2는 혈장에서 Tmax가 약 1.9 시간이었고, Cmax와 AUClast, AUCinf는 각각 214.4±117.0 ng/mL, 1303.9±749.3 ng·h/mL, 그리고 1369.3±786.5 ng·h/mL이었다. 본 연구를 통하여 개발된 분석법이 한국인의 발효홍삼에 대한 약동학 연구에 적용 가능함을 확인하였다. 본 분석법에 다른 혈중 ginsenoside 분석법을 추가적으로 개발하면 ginsenoside의 전반적인 대사경로에 대한 연구를 가능하게 할 것으로 기대된다. 따라서 ginsenoside의 대사경로에 대해 전반적인 연구가 진행되면 고려인삼의 우수성에 대한 근거가 마련될 것이다.
인삼 (Panax ginseng)은 2000년이 넘는 기간 동안 동아시아에서 매우 중요한 천연물로 알려져 왔고, 현재도 전 세계적으로 광범위하게 사용되고 있는 약초이다. 인삼의 주된 성분은 ginsenosides로서 그 종류와 약리적 효능에 대해서 다양한 연구가 진행되고 있다. 인삼 중에서 한국에 자생하는 고려인삼은 심장질환, 관절염과 당뇨병 등을 포함한 다양한 질병에 약리적 효능이 뛰어난 것으로 알려져 있다. 특히 수삼을 쪄서 말린 형태의 홍삼은 다른 인삼 종류에서 발견되지 않는 특정 ginsenosides가 있다는 여러 연구 보고가 있다. 홍삼은 인삼을 찌고 말리는 과정에서 생겨나는 화학적으로 변화된 생리활성물질들에 의해 인삼과 차별화된 효과를 보여준다. 또한 홍삼은 장내미생물의 생물학적 전환에 의해 변화되어 생체 내 약리활성을 보이는데, 이는 개인의 장내 미생물의 분포 차이에 의해 약리작용에서도 차이를 보일 수 있다. 홍삼이나 홍삼을 다시 효소에 의해 발효시킨 발효홍삼은 인삼의 주성분이 ginsenoside Rb1, Rg1인 것과 달리 ginsenoside Rg3를 주성분으로 하고 있다는 특징이 있다. 이러한 ginsenoside Rg3는 장내 미생물에 의해 ginsenoside Rh2로 대사되는 것으로 알려져 있다. 많은 전임상이나 임상 연구를 통하여 발효홍삼은 여러 만성질환이나 노화과정에서 약화되는 면역기능을 항진시키는데 효과가 있음이 밝혀졌고, 심장질환, 암, 당뇨병, 간독성 그리고 면역질환과 같은 병리학적 질환에 광범위하게 사용되면서 그 치료 효과가 입증되고 있다. 이러한 약리적 효능에 대한 연구에도 불구하고 고려인삼이나 가공하여 만든 고려홍삼, 발효홍삼 등에 대해서 임상연구와 약동학적 연구, 대사경로에 대한 구명은 제대로 이루어지고 있지 않고 있다. Ginsenoside가 체내에서 어떻게 대사되어 작용하는 지에 대한 전반적인 연구가 부족한 실정이다. 인삼에 대해서도 대부분의 연구들이 일부 ginsenoside의 대사경로 구명에 대해서만 진행되어, 전체적인 발효홍삼의 ginsenoside 대사경로에 대한 연구가 필요하다. 또한, 고려인삼이나 고려홍삼, 발효홍삼의 우수성에 대해서는 오래전부터 알려져 있으나 과학적 근거가 부족한 실정이라 발효된 고려홍삼의 한국인을 대상으로 한 약동학 연구 자료가 필요하다. 본 연구에서는 LC-MS/MS의 고감도의 신속하고 정확한 방법을 이용하여 ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 혈중 분석법에 대해서 개발을 하였다. 개발된 분석법은 생체시료 분석법 가이드라인에 따라 정확성, 정밀성, 직선성과 검출한계 등을 검증하였다. 혈장시료로부터 분석한 ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 검량선은 모두 r2≥0.999이었고, ginsenoside Rb1은 10-500 ng/mL에서 그리고 ginsenoside Rg1과 20(S)-ginsenoside Rh2는 1-500 ng/mL 범위에서 양호한 직선성을 나타내었다. Ginsenoside Rb1과 Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2의 LC-MS/MS분석법의 타당성을 입증하기 위한 검증한 결과 일내 재현성과 일간 재현성의 평균 정밀성과 정확성이 모두 기준값(15%) 이내에 들어 이 분석법은 충분한 감도와 정확성 및 정밀성이 있는 것으로 판단되었다. 따라서 LC-MS/MS 분석법을 이용한 인체 혈장 내의 ginsenoside Rb1, Rg1, 20(S)-ginsenoside Rh2 각각을 정량한 본 시험법은 적합한 시험법임을 확인하였다. 또한, 검증한 분석법으로 발효 고려홍삼 (ginsenoside Rb1: 0.95 mg/g, ginsenoside Rg1: 0.98 mg/g, 20(S)-ginsenoside Rg3: 0.19 mg/g)을 경구 투여한 건강한 한국인 피험자로부터 20(S)-ginsenoside Rg3와 대사체로 알려진 20(S)-ginsenoside Rh2의 혈중 농도를 측정하여 약동학 연구를 하였다. 그 결과 혈중에서 20(S)-ginsenoside Rg3는 검출되지 않았으나 20(S)-ginsenoside Rh2는 혈장에서 Tmax가 약 1.9 시간이었고, Cmax와 AUClast, AUCinf는 각각 214.4±117.0 ng/mL, 1303.9±749.3 ng·h/mL, 그리고 1369.3±786.5 ng·h/mL이었다. 본 연구를 통하여 개발된 분석법이 한국인의 발효홍삼에 대한 약동학 연구에 적용 가능함을 확인하였다. 본 분석법에 다른 혈중 ginsenoside 분석법을 추가적으로 개발하면 ginsenoside의 전반적인 대사경로에 대한 연구를 가능하게 할 것으로 기대된다. 따라서 ginsenoside의 대사경로에 대해 전반적인 연구가 진행되면 고려인삼의 우수성에 대한 근거가 마련될 것이다.
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