황색포도상구균을 비롯한 여러 포도상구균은 식품환경 및 의료분야에서 생물막을 형성하여 다양한 질병을 유발한다고 알려져 있다. 이러한 생물막을 제어하기 위해서는 생물막 형성 균주를 찾는 것은 중요하며, 현재 Congo-red agar 및 ...
황색포도상구균을 비롯한 여러 포도상구균은 식품환경 및 의료분야에서 생물막을 형성하여 다양한 질병을 유발한다고 알려져 있다. 이러한 생물막을 제어하기 위해서는 생물막 형성 균주를 찾는 것은 중요하며, 현재 Congo-red agar 및 crystal violet 방법이 대표적으로 많이 사용되고 있다. 하지만 Congo-red agar 방법은 생물막 형성에 관여하는 유전자(ica)와 낮은 상관성을 보이며, crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 표면의 재질 및 환경의 영향을 받아, 실제 내성을 판별하기 적합하지 않다. 그러므로 생물막 형성 균주를 판별할 수 있는 정확한 검출 방법 및 실제 내성이 높은 생물막 형성 균주를 판별할 수 있는 방법이 필요하다. 이에 본 연구는 생물막 형성 균주를 검출할 수 있는 정확한 방법과 내성이 높은 생물막 형성 균주를 판별 하기 위한 세포의 다양한 특성을 조사하였다. 다양한 배지 및 조성을 달리하여 Congo-red agar와 Congo-red broth를 만들었으며, TSB배지를 이용한 Congo-red broth의 결과가 생물막 형성에 관여하는 ica 유전자와 완벽히 일치하는 것을 확인하였다. 또한 ica, colony spreading, 항생제 민감성과 같은 다양한 세포의 특성과 상대습도 43%와 68%과 같은 건조한 환경에서의 내성과의 상관성을 조사하였다. Colony spreading과 ica는 건조한 환경에서의 내성과 낮은 상관성을 보였다. 반면, penicillin과 ampicillin에서 저항성 있는 균주는 건조한 환경에서도 유의적으로 높은 내성을 보였다. Crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 표면의 재질 및 환경의 영향을 받았다. 하지만 평판계수법으로 다양한 환경에서 형성한 생물막의 실제 균 수와 소독제 처리 시 내성과의 상관성을 조사한 결과 낮은 상관성을 보였다. 본 연구 결과 기존에 사용되고 있는 Congo-red agar 대신 Congo-red broth를 사용할 경우 보다 정확한 생물막 형성 균주를 판별 할 수 있을 거라 사료되며, penicillin과 ampicillin에 대한 민감도는 건조한 환경에서의 내성을 평가하는데 특성에 이용될 수 있을 것이라 사료된다. Crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 균 수 또는 실제 내성과 낮은 상관성을 보이므로, 정확한 방법의 개발하기 위한 추가연구가 필요할 것으로 보인다.
황색포도상구균을 비롯한 여러 포도상구균은 식품환경 및 의료분야에서 생물막을 형성하여 다양한 질병을 유발한다고 알려져 있다. 이러한 생물막을 제어하기 위해서는 생물막 형성 균주를 찾는 것은 중요하며, 현재 Congo-red agar 및 crystal violet 방법이 대표적으로 많이 사용되고 있다. 하지만 Congo-red agar 방법은 생물막 형성에 관여하는 유전자(ica)와 낮은 상관성을 보이며, crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 표면의 재질 및 환경의 영향을 받아, 실제 내성을 판별하기 적합하지 않다. 그러므로 생물막 형성 균주를 판별할 수 있는 정확한 검출 방법 및 실제 내성이 높은 생물막 형성 균주를 판별할 수 있는 방법이 필요하다. 이에 본 연구는 생물막 형성 균주를 검출할 수 있는 정확한 방법과 내성이 높은 생물막 형성 균주를 판별 하기 위한 세포의 다양한 특성을 조사하였다. 다양한 배지 및 조성을 달리하여 Congo-red agar와 Congo-red broth를 만들었으며, TSB배지를 이용한 Congo-red broth의 결과가 생물막 형성에 관여하는 ica 유전자와 완벽히 일치하는 것을 확인하였다. 또한 ica, colony spreading, 항생제 민감성과 같은 다양한 세포의 특성과 상대습도 43%와 68%과 같은 건조한 환경에서의 내성과의 상관성을 조사하였다. Colony spreading과 ica는 건조한 환경에서의 내성과 낮은 상관성을 보였다. 반면, penicillin과 ampicillin에서 저항성 있는 균주는 건조한 환경에서도 유의적으로 높은 내성을 보였다. Crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 표면의 재질 및 환경의 영향을 받았다. 하지만 평판계수법으로 다양한 환경에서 형성한 생물막의 실제 균 수와 소독제 처리 시 내성과의 상관성을 조사한 결과 낮은 상관성을 보였다. 본 연구 결과 기존에 사용되고 있는 Congo-red agar 대신 Congo-red broth를 사용할 경우 보다 정확한 생물막 형성 균주를 판별 할 수 있을 거라 사료되며, penicillin과 ampicillin에 대한 민감도는 건조한 환경에서의 내성을 평가하는데 특성에 이용될 수 있을 것이라 사료된다. Crystal violet을 이용한 생물막 형성능 평가 방법은 균 수 또는 실제 내성과 낮은 상관성을 보이므로, 정확한 방법의 개발하기 위한 추가연구가 필요할 것으로 보인다.
Various methods have been developed for the detection of biofilm-forming strains and quantification of biofilm. Results of methods were contradictory and did not show high correlation with other biofilm characteristics of bacteria or survival of their biofilm. Therefore, this study was conducted to ...
Various methods have been developed for the detection of biofilm-forming strains and quantification of biofilm. Results of methods were contradictory and did not show high correlation with other biofilm characteristics of bacteria or survival of their biofilm. Therefore, this study was conducted to evaluate various previously reported Congo-red agar methods and to develop an accurate Congo-red method for the detection of slime-producing Staphylococcus aureus. And this study investigated survival of S. aureus biofilm at dry condition (43% and 68% relative humidity) and biofilm associated cell characteristics (presence of ica gene, colony spreading, antibiotics resistance) and then evaluated its relationship. Also this study investigated effect of material type and glucose addition on the biofilm formation of S. aureus using crystal violet staining method and evaluated resistance of S. aureus biofilm depending on adhered types on stainless steel against water and chlorine sanitizer then evaluated its relationship with biofilm formation measured by crystal violet staining method. The icaA/D genes were found in 32 S. aureus and 5 other strains, and these results correlated perfectly with results on Congo-red broth based on TSB supplemented with sucrose. Colony spreading on soft agar and presence of ica gene were showed low relationship with survival at RH 43% and 68% condition. Whereas among various antibiotics, resistance against ampicillin and penicillin was showed high correlation with survivals of S. aureus biofilm at dry environment condition. S. aureus adhered better on hydrophilic surface (glass, stainless steel) than hydrophobic surface (polypropylene, polystyrene) and the addition of carbon source such as glucose could enhance the biofilm formation. However, results of biofilm measured by crystal violet staining methods and efficacy of sanitizer did not correlated results of biofilm formation. Therefore, this new TSB based Congo-red broth method could be use as a useful detection or screening method for biofilm-forming S. aureus. Also, ampicillin and penicillin could be use as indicator to find the resistant form of S. aureus biofilm.
Various methods have been developed for the detection of biofilm-forming strains and quantification of biofilm. Results of methods were contradictory and did not show high correlation with other biofilm characteristics of bacteria or survival of their biofilm. Therefore, this study was conducted to evaluate various previously reported Congo-red agar methods and to develop an accurate Congo-red method for the detection of slime-producing Staphylococcus aureus. And this study investigated survival of S. aureus biofilm at dry condition (43% and 68% relative humidity) and biofilm associated cell characteristics (presence of ica gene, colony spreading, antibiotics resistance) and then evaluated its relationship. Also this study investigated effect of material type and glucose addition on the biofilm formation of S. aureus using crystal violet staining method and evaluated resistance of S. aureus biofilm depending on adhered types on stainless steel against water and chlorine sanitizer then evaluated its relationship with biofilm formation measured by crystal violet staining method. The icaA/D genes were found in 32 S. aureus and 5 other strains, and these results correlated perfectly with results on Congo-red broth based on TSB supplemented with sucrose. Colony spreading on soft agar and presence of ica gene were showed low relationship with survival at RH 43% and 68% condition. Whereas among various antibiotics, resistance against ampicillin and penicillin was showed high correlation with survivals of S. aureus biofilm at dry environment condition. S. aureus adhered better on hydrophilic surface (glass, stainless steel) than hydrophobic surface (polypropylene, polystyrene) and the addition of carbon source such as glucose could enhance the biofilm formation. However, results of biofilm measured by crystal violet staining methods and efficacy of sanitizer did not correlated results of biofilm formation. Therefore, this new TSB based Congo-red broth method could be use as a useful detection or screening method for biofilm-forming S. aureus. Also, ampicillin and penicillin could be use as indicator to find the resistant form of S. aureus biofilm.
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