동결보존은 많은 포유동물 종에서 성공적으로 적용하여 사용되어 지고 있다. 그럼에도 불구하고 돼지 배아는 온도에 매우 민감하여 동결/융해 시 발달 능력이 감소되는 것으로 나타나고 있다. 본 연구의 목적은 돼지 배아의 유리화 동결/융해 후 생존 능력을 평가하고자 한다. 돼지의 배반포는 인위적인 blastocoele의 탈수(FBC)...
동결보존은 많은 포유동물 종에서 성공적으로 적용하여 사용되어 지고 있다. 그럼에도 불구하고 돼지 배아는 온도에 매우 민감하여 동결/융해 시 발달 능력이 감소되는 것으로 나타나고 있다. 본 연구의 목적은 돼지 배아의 유리화 동결/융해 후 생존 능력을 평가하고자 한다. 돼지의 배반포는 인위적인 blastocoele의 탈수(FBC)와 비 인위적 탈수 방법으로 유리화 냉동하였고, 부수적으로 배양액에 fetal bovine serum(FBS)을 첨가하거나 첨가하지 않은 상태로 배양을 실시하였다. 유리화 동결/융해된 돼지 배반포는 각각 group A; non-FBC와 non-FBS, group B; non-FBC와 FBS, group C; FBC와 non-FBS, group D; FBC와 FBS 군으로 나누어 연구를 실시하였다. 초급속 동결/융해된 돼지 배반포의 각각의 군에서 생존율은 39.5, 52.5, 54.8 및 66.7%로 나타났다(p<0.05). 생존한 배반포의 reactive oxygen species(ROS) level은 다른 group과 비교하였을 때 group D에서 유의하게 낮게 나타났다(p<0.05). 게다가 total cell 수 역시 group D에서 유의하게 높게 나타났다(p<0.05). 그 외에도 group D에서 세포사멸 세포의 수가 유의하게 적은 것으로 나타났다(2.0±1.5 vs 3.2±2.1, 2.8±1.9, 2.7±1.6, p<0.05). 이 결과는 FBC/FBS방법이 유리화 동결/융해 과정에서 ROS와 세포사멸지수의 세포내 수준을 조절함으로써 유리화 동결된 배반포의 발달능력을 향상시키는 것으로 판단된다. 따라서 본 연구는 FBC/FBS방법이 돼지 배반포의 유리화동결/융해과정에 효과적인 처리 방법임을 제시한다.
동결보존은 많은 포유동물 종에서 성공적으로 적용하여 사용되어 지고 있다. 그럼에도 불구하고 돼지 배아는 온도에 매우 민감하여 동결/융해 시 발달 능력이 감소되는 것으로 나타나고 있다. 본 연구의 목적은 돼지 배아의 유리화 동결/융해 후 생존 능력을 평가하고자 한다. 돼지의 배반포는 인위적인 blastocoele의 탈수(FBC)와 비 인위적 탈수 방법으로 유리화 냉동하였고, 부수적으로 배양액에 fetal bovine serum(FBS)을 첨가하거나 첨가하지 않은 상태로 배양을 실시하였다. 유리화 동결/융해된 돼지 배반포는 각각 group A; non-FBC와 non-FBS, group B; non-FBC와 FBS, group C; FBC와 non-FBS, group D; FBC와 FBS 군으로 나누어 연구를 실시하였다. 초급속 동결/융해된 돼지 배반포의 각각의 군에서 생존율은 39.5, 52.5, 54.8 및 66.7%로 나타났다(p<0.05). 생존한 배반포의 reactive oxygen species(ROS) level은 다른 group과 비교하였을 때 group D에서 유의하게 낮게 나타났다(p<0.05). 게다가 total cell 수 역시 group D에서 유의하게 높게 나타났다(p<0.05). 그 외에도 group D에서 세포사멸 세포의 수가 유의하게 적은 것으로 나타났다(2.0±1.5 vs 3.2±2.1, 2.8±1.9, 2.7±1.6, p<0.05). 이 결과는 FBC/FBS방법이 유리화 동결/융해 과정에서 ROS와 세포사멸지수의 세포내 수준을 조절함으로써 유리화 동결된 배반포의 발달능력을 향상시키는 것으로 판단된다. 따라서 본 연구는 FBC/FBS방법이 돼지 배반포의 유리화동결/융해과정에 효과적인 처리 방법임을 제시한다.
Cryopreservation has been applied successfully in many mammalian species. Nevertheless, pig embryos, because of their greater susceptibility to cryoinjuries, have shown a reduced developmental competence. The aim of this study was to evaluate the survival status of vitrified-warmed porcine blastocys...
Cryopreservation has been applied successfully in many mammalian species. Nevertheless, pig embryos, because of their greater susceptibility to cryoinjuries, have shown a reduced developmental competence. The aim of this study was to evaluate the survival status of vitrified-warmed porcine blastocysts. Forced collapse blastocoele (FBC) and non-FBC blastocysts are vitrified and concomitantly cultured in culture media which were supplemented with/without fetal bovine serum (FBS). Porcine vitrified-warmed blastosysts were examined in four different methods: group A, non-FBC and non-FBS; group B, non-FBC and FBS; group C, FBC and non-FBS; group D, FBC and FBS. After culture, differences in survival rates of blastocysts derived from vitrified-warmed porcine blastocysts were found in group A-D (39.5, 52.5, 54.8 and 66.7%, respectively, p<0.05). Reactive oxygen species (ROS) level of survived blastocysts was lower in group D than that of another groups (p<0.05). Moreover, total cell number of survived blastocysts was higher in group D than that of other groups (p<0.05). Otherwise, group D showed significantly lower number of apoptotic cells than other groups (2.0±1.5 vs 3.2±2.1, 2.8±1.9, 2.7±1.6, respectively, p<0.05). Taken together, these results showed that FBS/FBC improves the developmental competence of vitrified porcine blastocysts by modulating intracellular levels of ROS and the apoptotic index during the vitrification/warming procedure. Therefore, I suggest that FBS and FBC are effective treatment technique during the vitrification/warming procedures of porcine blastocysts.
Cryopreservation has been applied successfully in many mammalian species. Nevertheless, pig embryos, because of their greater susceptibility to cryoinjuries, have shown a reduced developmental competence. The aim of this study was to evaluate the survival status of vitrified-warmed porcine blastocysts. Forced collapse blastocoele (FBC) and non-FBC blastocysts are vitrified and concomitantly cultured in culture media which were supplemented with/without fetal bovine serum (FBS). Porcine vitrified-warmed blastosysts were examined in four different methods: group A, non-FBC and non-FBS; group B, non-FBC and FBS; group C, FBC and non-FBS; group D, FBC and FBS. After culture, differences in survival rates of blastocysts derived from vitrified-warmed porcine blastocysts were found in group A-D (39.5, 52.5, 54.8 and 66.7%, respectively, p<0.05). Reactive oxygen species (ROS) level of survived blastocysts was lower in group D than that of another groups (p<0.05). Moreover, total cell number of survived blastocysts was higher in group D than that of other groups (p<0.05). Otherwise, group D showed significantly lower number of apoptotic cells than other groups (2.0±1.5 vs 3.2±2.1, 2.8±1.9, 2.7±1.6, respectively, p<0.05). Taken together, these results showed that FBS/FBC improves the developmental competence of vitrified porcine blastocysts by modulating intracellular levels of ROS and the apoptotic index during the vitrification/warming procedure. Therefore, I suggest that FBS and FBC are effective treatment technique during the vitrification/warming procedures of porcine blastocysts.
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